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1.高效液相色谱法（HighPerformanceLiquidChromatography，HPLC）：采用高压输液泵将不同极性的流动相泵入装有固定相的色谱柱进行分离测定的色谱方法。2.气相色谱法（gaschromatography,GC）用气体作为移动相的色谱法。根据所用固定相的不同可分为两类：固定相是固体的，称为气固色谱法；固定相是液体的则称为气液色谱法。3.外标法（externalstandardmethod）：用纯物质配制一系列不同浓度的标准试样，在一定的色谱条件下准确定量进样，测定峰面积（或峰高），绘制标准曲线。在完全相同的色谱条件下对样品进行测定，根据所得的峰面积（或峰高），带入曲线求出被测组分的含量。4.内标法（internalstandardmethod）：将一个已知准确含量的化合物加入样品和标准品中，进行提取、蒸发、溶解、进样等一系列操作，根据被测组分与内标物的峰高（或峰面积）之比计算被测物的含量。5.共同抗原(commonantigen)：两种不同生物间存在相同或相似的抗原决定簇，称为共同抗原。6.交叉反应（CrossReaction）──由共同抗原刺激机体产生的抗体分子可以和不同生物间相同或相似的抗原决定簇结合。7.半抗原（hapten）：分子量小于1000的物质，需要与蛋白质或多肽等载体物质结合后，才能具有抗原性，并诱发特异性抗体。这类小分子物质称为半抗原。（临床上使用的药物大多数为半抗原）。抗体质量评价：从三个方面进行评价7+8+98.抗体的特异性（specificity）①抗体与标记及非标记药物的结合能力（要求：对标记及非标记药物有同等结合力，以便有效抑制）②抗体与同特定抗原相似物质的结合能力，即交叉反应的程度（要求：抗体与标记药物的结合力不被交叉反应所抑制）.9.亲和力（affinity）：抗体对抗原吸引力的大小及抗原抗体结合的牢固度。10.滴度（titer）:能与定量药物产生一定程度结合的抗血清的最大稀释度，是抗血清中抗体浓度的一种表达方式。稀释倍数越大，表示滴度越高。11.放射免疫分析（radioimmunoassayRIA）:根据放射性同位素检测的高灵敏性以及Ag-Ab反应的高度特异性，利用放射性同位素标记抗原或抗体的一种超微量分析方法。(RIA测定的基本原理即竞争蛋白结合分析，标记药物所用的试剂为放射性同位素)。12.血浆（plasma）：加抗凝剂（如肝素、枸橼酸、草酸盐、EDTA等）于全血中，离心或沉降后的浅黄色上清液，含纤维蛋白原。13.血清（serum）：全血自然放置，离心或沉降后的浅黄色上清液，不含纤维蛋白原.14.离子液体(ionicliquids，ILs)又称室温离子液体，是由有机阳离子和有机或无机阴离子构成、在低于或接近室温呈液体的一种熔融性盐类.15.固相萃取法（solidphaseextraction，SPE）(原理)：将样品溶液通过预先填充固定相填料的柱子，待测组分通过吸附、分配等形式被截留，然后用适当的溶剂洗脱，达到分离、净化和富集的目的。16.分子印迹技术（molecularlyimprintedtechnology，MIT）：将各种生物大分子从凝胶转移到一种固定基质上的过程称为印迹技术（blotting）。当模板分子（印迹分子）与聚合物单体接触时会形成多重作用点，通过聚合过程这种作用就会被记忆下来，当模板分子除去后，聚合物中就形成了与模板分子空间构型相匹配的具有多重作用点的空穴，这样的空穴将对模板分子及其类似物具有选择识别特性。17.固相微萃取（solidphasemicro-extraction，SPME）原理：利用石英纤维表面的色谱固定相对分析组分的吸附作用，将组分从试样基质中萃取出来，并逐渐富集，在进样过程中，通过解吸由色谱仪进行分析。18.体内药物分析(PharmaceuticalAnalysisinBiologicalSamples）：通过分析的手段研究药物在体内数量与质量的变化，以获得各种药物代谢动力学参数及其转化、代谢的方式与途径等信息，为药物的研究、生产、临床应用等作出评价，有助于药物的改进和发展。19.治疗药物监测（TherapeuticDrugMonitoring,TDM）：在药代动力学原理的指导下，应用现代先进的分析技术，测定血液中或其他体液中药物浓度，以用于药物治疗的指导与评价。对药物治疗的指导，主要是指设计或调整给药方案。因此，又称为临床药代动力学监测（clinicalpharmacokineticmornitoring，CPM）。20.高分辨率气相色谱法（highresolutiongaschromatography,HRGC）是采用高分离效能的毛细管柱分离复杂组分的一种气相色谱法。21.氢火焰离子化检测器（FID）：有机物在火焰中电离形成离子流，根据离子流的出现和大小进行分析。22.分析质量控制（AnalyticalQualitycontrol，AQC）即质量保证（Quality，Assurance）是科学管理实验室的一种有效方法，通过对仪器、试剂、方法、操作技术等系统的分析质量管理，监测分析质量所处的状况，引起警觉并推动人们去改善分析工作的各个环节。23.气相色谱/质谱联用（gaschromatography/massspectrometry,GC/MS）将气相色谱仪与质谱仪通过接口组件进行连接，以气相色谱作为试样分离、制备的手段，将质谱作为气相色谱的在线检测手段进行定性、定量分析，辅以相应的数据收集与控制系统构建而成的一种色谱-质谱联用技术。24.选择离子检测（selectedionmonitoring，SIM）按一般质谱法或被测组分的质谱图（含多个不同质量碎片离子），在质谱图中选定一个或几个特定质量的离子监测，记录所选离子的离子强度岁时间的变化曲线，即SIM谱图。25.微透析microdialysis：以透析原理作为基础，通过对插入生物体内中的微透析探头在非平衡条件下进行灌流，物质沿浓度梯度逆向扩散，使被分析物质穿过膜扩散进入透析管内,并被透析管内连续流动的灌流液不断带出，从而达到活体组织取样的目的。26.平衡透析equilibriumdialysis：用于测定溶液中小分子或离子与大分子间结合的技术。将大分子溶液和小分子溶液分别置于只允许小分子透过而不允许大分子透过的半透膜两侧，当透析达到平衡时，测定膜两侧溶液中小分子的浓度，即可分析得大分子与小分子结合的数据。27.超滤法ultrafiltration：超滤是一种加压膜分离技术，即在一定的压力下，使小分子溶质和溶剂穿过一定孔径的特制的薄膜，而使大分子溶质不能透过，留在膜的一边，从而使大分子物质得到了部分的纯化。28.衍生化derivatization：衍生化是一种利用化学变换把化合物转化成类似化学结构的物质。一般来说，一个特定功能的化合物参与衍生反应，溶解度，沸点，熔点，聚集态或化学成分会产生偏离。由此产生的新的化学性质可用于量化或分离。样品的衍生化的作用主要是把难于分析的物质转化为与其化学结构相似但易于分析的物质，便于量化和分离。29.生物样品预处理：一、必要性1.多数生物样品须均匀化处理后才能测定，2.可将样品纯化，3.可将样品浓集，4.保护仪器。二、选择预处理方法的考虑因素：1．生物样品的类型；非均匀样品：（均匀化、去蛋白）、均匀样品：（血样：除蛋白、提取，唾液：离心沉淀除粘蛋白，尿液：缀合物水解）2．药物（代谢物）的理化性质与浓度范围3．药物测定的目的，4．分析技术与仪器一般预处理方法（一）样品的均匀化（目的：保证取样的均匀性；方法：匀浆法、超声匀化法、涡漩混合法）（二）去蛋白处理：1.加入与水互溶的有机溶剂（目的：使蛋白变性沉淀，离心去除。局限性：产生稀释，使上清液药浓偏低；内源性杂质多。）2.超滤离心法和平衡透析法（特点：1.半透膜原理,测定游离药物2.不破坏样品中的组分（无损伤性）3.透析法所需时间较长）3.其它方法(1）加酸性沉淀剂2.加入无机盐3.加入重金属盐类)（三）缀合物水解（1.酸水解2.酶水解：β-葡萄糖醛酸苷酶芳基硫酸酯酶3.溶剂解）液-液萃取法（liquid-liquidextraction，LLE）多数药物是亲脂性的，在适当的溶剂中的溶解度大于水相中的溶解度，而血样或尿样中含有的大多数内源性杂质是强极性的水溶性物质。因而用有机溶剂提取一次即可出去大部分杂质，从大量的样品中提取药物经浓集后作为分析用样品。5章免疫化学法体内药分常用三大免疫标记抗体技术为1.放射免疫分析（radioimmunoassayRIA）2.酶免疫分析（enzymeimmunoassay,EIA）3.荧光免疫分析（fluorescenceimmunoassay，FIA）免疫化学法-原理：竞争蛋白结合分析，即利用抗原抗体竞争反应，作竞争免疫分析。分析系统中三种基本成分：①非标记药物（Ag）（待测药物、待测标准品）②试剂中的标记药物（Ag*）③特异性抗体（Ab）抗原抗体竞争反应的两个阶段第一阶段：抗原抗体发生特异性结合的阶段。此阶段反应快，仅需几秒至几分钟，但不出现可见反应。第二阶段：可见反应阶段。反应慢。抗原抗体反应的特点：1.特异性抗原抗体的结合实质上是抗原决定簇与抗体超变区中抗原结合点之间的结合。由于两者在化学结构和空间结构上的互补关系，所以呈现高度的特异性。2.可逆性免化法特点：1.灵敏度极高，最低检测浓度达10-9~10-12g/ml水平（原因：①选用对药物具高度亲和性的抗体用结合蛋白使含量极低的药物被抗体牢固结合，易于检出。②引入了能够提供强检测信号的标记物，如：放射性同位素标记,荧光标记，酶标记等，并采用高灵敏的理化手段检测）2.特异性（选择性）较高（原因：选用的抗体对被测药物具高度的专一性，能够与被测药物进行选择性的结合。说明：由于交叉反应的存在，使免化法的特异性不如色谱法高）3.所需样品量少，且样品前处理过程简单，常常不需要任何前处理。RIA中的基本问题1抗体的制备2标记药物的制备3结合标记药物与游离标记药物的分离（分离技术：双抗体法、固相法、吸附法、化学试剂沉淀法）4放射性强度测定5标准曲线的绘制及样品测定RIA中常用的放射性同位素：3H，14C，125I，131I,75Se等RIA的优缺点:优点：(1)灵敏度高(2)选择性高(3)样品需求量少，且不需预处理（简单）(4)可同时进行大批量的样品测定(5)准确度和精密度较高，仅次于色谱法RSD≤10%；缺点：（1）不能同时测定药物代谢产物，也不能同时测定多种药物（2）由于RIA是一种非均相免疫分析，给合态和游离态药物需先分离后才测定（3）放射性同位素对体有害（4）测定完以后的处理较麻烦体内药物分析方法建立的一般步骤：（1）以纯品进行测定（目的：基本条件的摸索）（2）以经过纯化处理的空白样品进行测定（目的：背景检查）（3）空白样品添加标准品后测定（目的：内源性干扰检查）（4）体内实际样品测定（目的：代谢产物干扰情况检查）