例说生物组织中还原糖脂肪蛋白质的鉴定

例说“生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定”郑小勤例1在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，下列对实验材料的选择的叙述中，错误的是（）A.甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定B.花生种子含脂肪多且子叶肥厚，是用于脂肪鉴定的理想材料C.大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想的植物组织材料D.鸡蛋清含蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的理想的动物材料[解析]本实验的原理是：生物组织中的有关有机化合物（可溶性还原糖、脂肪、蛋白质），能够与某些化学试剂产生特定的颜色反应，从而鉴定它们的存在。所以，实验材料的选择是实验成功的关键。做还原糖的鉴定实验，应该选择含糖量较高且糖具有还原性（如葡萄糖、麦芽糖、果糖）、颜色为白色或近于白色的植物组织，以苹果、梨为最好。做脂肪的鉴定实验，应该选择富含脂肪的种子，以花生种子为最好。做蛋白质的鉴定实验，最好选用富含蛋白质的生物组织，植物材料常用的是大豆种子，动物材料常用的是鸡蛋蛋白。至于甘蔗茎的薄壁组织和甜菜的块根虽然富含近于白色的蔗糖，但蔗糖无还原性，不能与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。[参考答案]A例2有关鉴定可溶性还原糖的实验中操作方法正确的是（）A.先加入斐林试剂甲液，后加入乙液B.先加入斐林试剂乙液，后加入甲液C.将斐林试剂甲液和乙液混合均匀后再加D.斐林试剂在实验前就要配制好[解析]因为若先加入溶液（即斐林试剂甲液），还原糖中的还原性半缩醛羟基易被氧化而失去还原性，再加入溶液（即斐林试剂乙液）后就不能产生砖红色沉淀。所以，必须混合后配成。悬浊液再加入，才可产生砖红色沉淀。又因斐林试剂很不稳定，容易生成蓝色沉淀，所以应将甲液、乙液分别配制储存，使用时再临时配制。[参考答案]C例3关于双缩脲试剂A和B以及使用方法正确的是（）A.试剂A和B分别为浓度0.1g/mL的溶液和0.01g/mL的溶液，二者混合后立即使用B.试剂A和B分别为浓度0.1g/mL的溶液和0.01g/mL的溶液，使用时先加A液，再加B液C.试剂A和B分别为浓度0.1g/mL的溶液和0.05g/mL的溶液，使用时先加A液，再加B液D.试剂A和B分别为浓度0.1g/mL的溶液和0.05g/mL的溶液，二者混合后立即使用[解析]使用双缩脲试剂与使用斐林试剂不同，应先加入试剂A（即0.1g/mL的溶液），造成碱性环境，只有在碱性环境中，蛋白质才容易与发生颜色反应，形成紫色或紫红色络合物。另外，由于在碱性溶液中易生成蓝色沉淀，会遮蔽实验中所产生的紫色，影响观察结果，所以不能加入过量的双缩脲试剂B（只能加入3～4滴双缩脲试剂B）。同样为了防止生成较多的沉淀遮蔽实验结果，在配制溶液时，双缩脲试剂B的浓度（0.01g/mL的溶液）比斐林试剂乙液的浓度（0.05g/mL的溶液）小得多，这也是斐林试剂和双缩脲试剂不能互换使用的道理。[参考答案]B例4下列关于还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的实验操作步骤的叙述中，正确的是（）A.用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定B.脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴C.在蛋白质的鉴定实验中，若用蛋清做实验材料，可以直接使用，不用稀释D.供实验用的花生种子必须提前浸泡，浸泡时间应该长一点，便于切片[解析]用于鉴定还原糖的试剂乙与鉴定蛋白质的试剂B为什么不能互换，例3中已作了分析，这里不再赘述。为了清楚地看到细胞中脂肪微粒的显色反应，在脂肪的鉴定实验中，把化学反应和显微镜观察结合起来，这种方法称为“显微化学鉴定”。如果用蛋清做实验材料，必须稀释，因为如果稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后，会粘固在试管的内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不容易刷洗干净。花生种子浸泡时间短了，不容易切片；浸泡时间过长，组织太软，切下的薄片不容易成形，所以一般是提前浸泡3～4小时。[参考答案]B