什么是CHO细胞MDCK细胞Vero细胞和EB66细胞

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资源描述

CHO细胞,即中国仓鼠卵巢细胞(Chinesehamsterovary),该细胞具有不死性,可以传代百代以上,是目前生物工程上广泛使用的细胞。全世界批准正式应用于人类疾病治疗或疾病预防的基因工程产品约有三十多种,其中只有一种(乙肝疫苗)是由酵母菌生产的,其余所有产品都是由CHO细胞和大肠杆菌生产的,大肠杆菌不能形成有活性的二聚体(如白介素2),也不具有糖基化的功能(如EPO),而CHO却具有如上的功能,因此CHO成为表达复杂生物大分子的理想宿主。另外CH0细胞在基因工程使用中还有一个优点,该细胞属于成纤维细胞(fibroblast),是一种非分泌型细胞,它本身很少分泌CHO内源蛋白,因此对目标蛋白分离纯化工作十分有利。MDCK细胞的来源:MDCK是S.H.MADIN于1958年9月建成,来源于考克斯班尼犬肾脏,该肾脏细胞原代培养时其形态类似于成纤维细胞,经过胰蛋白酶和EDTA混合消化液的连续6次消化法纯化而上皮样细胞,每次纯化间隔时间为7D。培养中MDCK细胞具有远段肾小管与集合管,来源细胞的分化特性。MDCK细胞株至少有两种细胞类型,一种命名为C5A,其在含I型胶原的培养物中生长时,能分泌液体,导致囊肿形成,但在塑料面的培养低物上培养时,能分泌液体,却不能形成囊肿,另一种细胞正好相反。2.MDCK细胞的用途:MDCK细胞被广泛用作远曲小管或集合管的模型,还可用于代谢研究和Pg级药物与药物相互作用研究以及观察流感病毒株对细胞功能的影响。3.MDCK细胞的培养,的确有的用DMEM培养基,有的用MEM培养基,培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199等培养基中同样很容易生长。所以我认为你可以任意选择。我过去比较喜欢用DMEM培养基。4.高糖DMEM与低糖DMEM的区别是:高糖DMEM的葡萄糖含量是25.5mmol/L,而低糖DMEM的糖含量是5.5mmol/L,其中低糖DMEM的糖含量与一般的培养基相同,所以可以和其他一般培养基通用,而高糖DMEM主要用在肿瘤等特殊细胞的培养,如何选择需要依照要求而定。我建议你用低糖DMEM培养基。5.血清最好使用胎牛血清,没有也可以用小牛血清。胎牛血清价格相对贵一点。Vero细胞系是从非洲绿猴的肾脏上皮细胞中分离培养出来的。这个细胞系由日本千叶大学的Yasumura和Kawakita于1962年3月27日扩增出来。该细胞系取“VerdaReno”(世界语意为‘绿色的肾脏’)的简写而命名为Vero,而Vero本身在世界语中也有“真相”的意思。Vero细胞用途广泛:1.用于检查大肠杆菌毒素。大肠杆菌毒素最初就因此细胞系而被命名为Vero毒素,后来被称为志贺菌素样毒素,因为它与在痢疾志贺菌中分离出来的志贺菌素很相似。2.作为培养病毒的细胞宿主。比如:测定某种药物对病毒复制速度的影响,检验是否存在狂犬病毒或者为了研究目的培养病毒。3.作为真核寄生虫的宿主细胞,尤其是锥体虫属。EB66细胞株是从鸭胚胎干细胞中提取并驯化出来的传代细胞,通过先进的驯化工艺,保证了EB66细胞株的基因稳定、无菌、易接种并且可以全悬浮、无血清工艺培养、规模化的特性。EB66细胞株的应用将使疫苗生产企业在提高产品质量的基础上,直接降低研发及生产成本。因此该细胞株受到了国内广大疫苗研产企业的高度关注。

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