兔减压神经放电及药物对放电的影响【目的和原理】本实验的目的是熟悉外周神经复合电位引导方法,通过同步记录减压神经放电及颈总动脉血压变化,观察二者之间的关系,从而了解压力感受器的工作特性,加深对减压反射的理解。压力感受性反射是保持动脉血压稳定的重要调节机制。减压神经为主动脉弓血管壁上压力感受器的传入纤维。多数哺乳动物的减压神经在颈部混入迷走神经,其传入中枢的冲动引起降压反射。家兔的减压神经自成一束,在颈部与交感神经、迷走神经和颈总动脉一起走行于颈动脉鞘内,主要反映主动脉弓压力感受器感受压力刺激的情况。减压神经是传入神经,当主动脉弓处血压升高时,主动脉管壁被动扩张,减压神经传入冲动频率增多,反之,传入减少。在压力感受性调节中,心迷走神经的节前和节后纤维均为胆碱能纤维,其节后纤维通过释放Ach作用于心肌M受体而抑制心肌的活动使得血压降低;心交感神经和交感缩血管神经的节前和节后纤维分别为胆碱能纤维和肾上腺素能纤维,节前纤维释放Ach作用于节后神经元的N受体而兴奋节后神经,后者再释放去甲肾上腺素兴奋心肌,收缩血管,使得血压升高。不同药物作用于迷走神经及交感神经改变动脉血压,使得减压神经放电出现差异。【实验对象】家兔【实验器械和药品】台秤、兔手术台、注射器(1ml、20ml各一个)、哺乳类动物手术器械一套、BL-420生物信号记录分析系统、监听器、引导电极、血压换能器、三通阀、铁支架2个、动脉夹2个、动脉插管、玻璃分针、棉线、25%氨基甲酸乙酯(乌拉坦)、0.5%肝素盐水、1:100000乙酰胆碱、1:10000去甲肾上腺素、生理盐水、酚妥拉明。【实验方法和步骤】1:动物手术(1)家兔捉拿、称重。静脉注射25%乌拉坦(4ml/kg)将动物麻醉,仰卧固定于兔手术台;(2)减压神经和颈总动脉的分离:剪去颈部手术野的毛,于喉下正中部位切开皮肤6~9cm,止血钳行钝性分离,暴露气管及两侧颈总动脉。先不破坏颈动脉鞘,仔细观察迷走神经与交感神经之间一条最细的神经即为减压神经。分离气管用作插管;用玻璃分针轻轻分离左侧减压神经2~3cm,其下穿2根用生理盐水浸泡过的棉线备用;分离两侧颈总动脉2~3cm,一侧穿双线备动脉插管用,另一侧用于实验牵拉及夹闭用;(3)动脉插管:动脉插管内预先充满肝素盐水溶液,结扎颈总动脉远心端。用动脉夹夹住其近心端,穿线备用;用眼科剪剪一斜形剪口,心向插入动脉插管并结扎、固定。如有较多血液进入插管内,可经三通管向管内推入少量肝素溶液。2:仪器连接减压神经放电引导电极一端钩挂分离的减压神经,另外一端与BL-420系统1通道相连,血压换能器插头连至BL-420系统2通道,打开生物机能实验系统调至减压神经放电模块观察减压神经放电状况及动脉血压。3:观察项目(1)观察血压正常时减压神经放电的波形、频率和幅度及其放电时的声音特点。(2)牵拉对侧颈总动脉刺激颈动脉窦压力感受器,观察减压神经放电及血压的变化;(3)夹闭对侧颈总动脉刺激颈动脉窦压力感受器,观察减压神经放电及血压的变化;(4)耳缘静脉注射1:100000乙酰胆碱0.3mL,观察动脉血压及减压神经放电频率的变化及二者之间的变化。(5)待血压恢复正常或波动平复后,耳缘静脉注射1:10000去甲肾上腺素0.5mL,观察动脉血压及减压神经放电频率的变化及二者之间的变化。(6)切断减压神经,分别在中枢端和外周段记录放电,观察有何变化。【注意事项】1悬挂减压神经时不要牵拉过紧,引导电极应悬空,勿触及周围组织。2尽量将周围减压神经上的结缔组织分离干净,以免增大引导电阻。3分离神经不能过度牵拉神经,并要注意防止神经干燥,影响实验结果。【预期结果】1:血压处于正常情况时减压神经的群集放电波形,呈三角形,幅度先大后小,群集放电节律与心率同步,同时能听到监听器发出类似火车开动的声音。2:牵拉一侧颈总动脉后,血压反射性升高,颈动脉窦压力感受器受到的刺激增大,传出神经冲动的频率增加,通过窦N传向延髓心血管中枢的刺激亦增大,使心迷走紧张加强,心交感和心缩血管紧张减弱,作用于心脏,使心率减慢,心输出量减少,血管舒张,血管外周阻力降低,从而血压恢复性降低。但整体改变血压的效果不是特别明显。3:夹闭一侧颈总动脉后,远心端的颈动脉窦张力感受器感受到血压下降,传出神经冲动的频率减慢。信息沿窦神经上传至延髓孤束核心血管中枢。使心迷走紧张减弱,心交感和心缩血管紧张加强,作用于心脏,使心率加快,心输出量增加,血管收缩,血管外周阻力增加,从而血压恢复性升高。4:心交感神经和交感缩血管神经的节后纤维为肾上腺素能纤维,静脉注射去甲肾上腺素兴奋心肌,收缩血管,使得血压升高。动脉血压升高时,压力感受器传入冲动增多,通过中枢的整合作用,使心迷走紧张加强,心交感和心缩血管紧张减弱,作用于心脏,使心率减慢,心输出量减少,血管舒张,血管外周阻力降低,从而血压恢复性降低。5:心迷走神经的节前和节后纤维均为胆碱能纤维,静脉注射乙酰胆碱后,Ach作用于心肌M受体而抑制心肌的活动使得血压降低;随后,压力感受器感受血压降低,传入神经冲动减少,通过心血管中枢的整合作用,使心迷走紧张减弱,心交感和心缩血管紧张加强,作用于心脏,使心率加快,心输出量增加,血管收缩,血管外周阻力增加,从而血压恢复性升高。6:减压神经为主动脉弓血管壁上压力感受器的传入纤维,切断神经后,刺激外周段没有任何的反映,刺激中枢端,使得压力感受器传入冲动增多,最终的结果是使得血压调节性降低。【实验结论】当动脉血压升高时,可引起压力感受性反射,使得心率减慢,心输出量减少,血管舒张和外周阻力降低,进而血压下降;相反,当动脉血压降低时,压力感受性反射冲动减少,使得心率增快,心输出量增多,血管收缩和外周阻力增加,进而血压升高。【思考题】1.在一个心动周期中,减压神经放电与血压的关系如何?2.压力感受性反射有何生理意义?3:当动脉血压升高或者降低时,怎样使得血压恢复正常?