传染性法氏囊病(InfectiousbursaldiseaseIBD)又称传染性腔上囊炎(病);冈布罗病(Gumborddisease);传染性禽肾病(infedionsAviannephrosis);1970年Hitchner提议,统之称为(IBD)本病是由IBDV引起幼鸡的急性、高度接触性传染病。其特征为间歇性腹泻,颤抖,极度衰弱,法氏囊、腿肌和胸肌和肌胃交界处出血为特征,本病的危害除了使鸡减重或发病死亡外,更重要的是由于病毒引起体液免疫中枢器官——法氏囊损害,导致ND、MD等疫苗接种后免疫应答差或失败,还容易使病鸡感染其它传染病和寄生虫病。本病遍布于世界大多养鸡业发达地区,例如欧、美、澳等大型肉用鸡场,美鸡群阳性率近100%,荷兰88%,意大利害76%,我国于79年起先后在北京、广州、上海等地报道发现本病,并分离到病毒,目前已传遍全国各地,是养禽业一大疫病。一、病原IBDV:1、形态、地位:1986年已被归类为新建立的双股RNA病毒科(Birnaviridae),其大小和壳粒排列方式与蓝舌病病毒(BTV)相同。病毒粒子无囊膜,仅由核酸和衣壳组成,核酸为双节段双股RNA型。电镜检查IBDV有大小两种不同颗粒,大(60)小(20)nm,均为20面体立体对称,小颗粒,可能是大颗粒降解产物/卫星病毒。本病毒无红细胞凝集性。2、血清型:IBDV有二个不同血清型,用中和试验可加以区别,其中IBDVII型是火鸡源性的,但其致病性迄今为止未明了。IBDVI(鸡源性毒株)型还可根据血清学方法进一步划分亚型或不同抗原性毒株,JackwoodTFFU1987曾分为6个亚型。毒株间抗原性差异(用单抗区分)克解释免疫失败的原因。病毒粒子3、培养:病毒可在来自无污染IBD的种鸡蛋卵化的鸡胚繁殖,以CAM(绒毛尿囊膜)途径最好(次为卵黄囊尿囊腔最差)。接种72小时后,胚体、CAM、AAF(尿囊液)病毒浓度达高峰,鸡胚3-7天死亡(5天最多)。适应于鸡胚的IBDV可在鸡胚成纤维细胞(CEF)上增殖并形成蚀斑,而鸡体IBD强毒很难适应CEF细胞,而能在鸡胚法氏囊细胞上生长Lukert等(1974)在CEB细胞上传代(4)适应后又能在鸡胚肾(CEK)继代(3)并产生CPE。鸡胚死亡全身水肿,头部和趾部充血和小点出血,肝有斑驳状坏死。而由变异株引起的病变仅见肝坏死和脾脏肿大,不致死鸡胚。4、抵抗力:较强,对脂溶剂不敏感,耐热(56℃、5h),耐酸(PH2、1h),0.5%碳酸30℃1小时不灭活,但0.5%氯胺10min杀死病毒,病毒-20℃贮藏3年对鸡仍有致病力。病鸡舍中V可存活100天以上。二、流行病学1、易感性:自然宿主仅鸡和火鸡,并具有宿主特异性,野鸟和鸭可产生抗体反应,并从鸭中分离V。3-6周龄鸡最易感,成年鸡因法氏囊萎缩一般不敏感,但野外也见有15周龄鸡感染发病,有母源抗体雏鸡发病可推迟5-8周龄,3周龄以下鸡可隐性感染引起免疫抑制。不同品种鸡均可感染。全年均可发病,但育雏季节多见(4-7月)一般发病率高(可达100%,死亡率不高,多在5%-20-30%)但环境条件较差、伴发其它疾病时可更高(雏鸡达80%)。2、传播途径:本病为高度接触传染病,消化道,呼吸道,眼结膜等均可传播。3、传染源:病鸡,排毒高峰在感染后3-11天,13天后在排泄物中V显然减少或难以发现,病愈带毒或以卵传递均尚末未证实,但通过吸血昆虫或卵壳污染传播仍有可能。4、流行特点:(1)、初发多是急性型,症状明显,死亡率较高,以后则不太严重,时常查觉不到。(2)、往往突然发生,传播迅速,通常在感染后第三天开始死亡,5-7天达到高峰,以后很快停息,表现为高峰死亡和迅速康复的曲线。(3)、死亡率的差异很大,有的是3-5%,一般为15-20%,高死亡率可达到60%。三、症状经眼接种3周龄鸡24小时后可见法氏囊的组织学变化,2-3天可见症状,雏鸡群常大批突然发病,传播迅速,2-3天内可使60~70%雏鸡发病终究传播全群。潜伏期为2-3天。早期症状为自啄腔(泄殖腔),引起红肿炎症,病鸡食欲降低,颈/全身震颤,畏寒,常聚堆,步态不稳,毛蓬松。随后出现腹泻,排白色带微黄色泡沫稀粪便。泄殖腔周周羽毛污染。后期,体温低于正常,卧地不动,严重脱水,极度衰竭死亡。泄殖腔上缘突出,用手可触摸到肿大的法氏囊。急性多是出现症状后1-2天死亡,5-7天达死亡高峰,后渐减少。耐过鸡贫血,消瘦生长缓慢,饮料利用率低。多数情况本病为慢性及隐性感染。四、病变1、法氏囊是IBDV主要靶器官,病变有特征性,感染初期(3~4天)浆膜水肿,出血、坏死性炎症,严重时覆盖有黄色胶冻物,囊增大2-3倍,中壁增厚3~4倍,囊白色变为奶酪色,后期(5天)萎缩、呈深灰色,触之坚实。2、腺、肌胃交界处常见出血斑(条状出血)。3、胸、股肌常条状出血。4、国外报道:肾病变显著,不同程度肿胀、肾小管扩张(尿酸盐沉积)。5、病理组织学变化:①法氏囊髓质区淋巴细胞病变和坏死,被异染细胞,细胞残屑团块增生,网状内皮细胞取代。②正常滤泡结构发生改变:髓质区形成囊状空腔,发生坏死,异染细胞浆细胞吞噬现象法氏囊上皮层增生。③脾、胸腺、哈德氏腺(付泪腺)盲肠扁桃体也有同样坏死性炎症。1周龄鸡浆细胞减少5—10倍。发病鸡精神高度沉郁、羽毛逆立、伏地无力发病鸡胸肌及腹壁肌肉大片出血,法氏囊出血肿大如葡萄样发病鸡两腿外侧肌肉出血发病鸡法氏囊肿大,浆膜出血发病鸡法氏囊浆膜出血法氏囊肿大如紫葡萄样法氏囊出血,流出至泄殖腔切开法氏囊显示粘膜面出血发病鸡法氏囊粘膜出血法氏囊萎缩(发病鸡中间)法氏囊萎缩,粘膜出血结痂法氏囊萎缩,剖开后腔内见干酪样物质发病鸡法氏囊水肿,肾肿大,小叶灰白发病鸡腺胃粘膜出血五、诊断1.当急性爆发,遇到发病率高,发病和临诊康复都很快,(5-7D)死亡集中发生于几天之内等应疑为本病,通过剖检查到法氏囊特征性肉眼变化,则基本确诊。既使受母源抗体保护或日龄小的幼雏,亚临诊感染,也可通过观察法氏囊病变来诊断。2.病原检查:可将病料法氏囊、脾、肾等制成乳剂后离心或过滤后,经绒毛尿囊腔(CAM)接种9~11日龄鸡胚,3-5D后收获死亡鸡胚和CAM继代,可见胚胎水肿、出血。中和试验鉴定分离的病毒,或用人工感染易感雏鸡。可用电镜和荧光抗体法检查感染组织或鸡胚,细胞培养物。3.血清学诊断:琼扩:查抗原,感染2—4天就可查出。感染鸡最早感染鸡最早5天,但8天全部转阳。该方法简便、易行、欠敏感。对流免疫电泳:快速、敏感。微量血清中和:可了解鸡群免疫水平,较琼扩敏感。近年来,ELISA,免疫荧光。ELISA、琼扩、中和反应三者高度相关。4.易感鸡感染试验:取病死鸡的典型病变的法氏囊,磨碎制成悬液,经滴鼻和口服感染21-25日龄易感鸡,在感染后48-72小时出现病状,死后剖检法氏囊有特征性的病变。琼扩试验的沉淀线六、防制无特效疗法。本病为高度接触传染性,预防本病常需要用综合性的防制措施。1、严格执行卫生措施。病毒对外界环境抵抗力高,能在鸡舍中长期存活。因此要有严格的消毒制度。2、免疫接种:灭活苗:安全,不影响法氏囊功能,但免疫期较短,多用于中雏连续二次以上免疫,或作为种鸡加强免疫,母源抗体可维持29天。弱毒苗:可肌注、点眼、滴鼻、饮水、气雾、幼雏经饮水免疫效果比灭活苗好,对中雏以上鸡也能迅速产生免疫力,种鸡经活苗免疫后,抗体水平不高,个体差异大,又影响母源抗体。只能使1周龄雏鸡受到保护,若使保护期延长,至3~4周。饮水免疫:不能用酸碱性稀释液稀释疫苗,可加脱脂奶粉,或硫代硫酸钠。雏鸡免疫最好在母源抗体消失后,尤其是灭活菌,如果太晚,则不能保护野毒的感染。接种活苗后7天可接种其它疫苗,无抑制。种鸡免疫最好在法氏囊发达阶段,否则效果不佳。种鸡免疫程序:一日龄和/或2~3周龄用弱毒苗,18周龄前后最好再用灭活苗加强免疫一次(40~42周龄再次免疫,以保证3~4周龄内得到保护)。雏鸡(美国海兰国际公司),18~20日龄首免(中等毒活苗),28-30日龄再免,可控制病的发生。雏鸡:首免:10~14日(无母源抗体),20~28日(有母源抗体),隔3~4周二免(饮水),18~26周龄用灭活苗三免。方式:免疫雏鸡产生主动免疫,或免疫种鸡使后代获得被免疫。(梁焕春,1989年提出)IBDV强毒接种鸡胚CAM,取尿囊液5ml(104.5CELD501ml),注入妊娠7个月母牛乳房内(每周一次,共三次),然后收集初乳,冻干,按5%比例加入饲料中,喂鸡,可使鸡免于感染,且不影响弱毒苗接种。IBD疫苗可分为3类:(1)、温和型:对法氏囊无任何影响,可用1日龄鸡多种方式免疫。7~14天后产生中和抗体。特点:保护率低。国内复制出荷兰PBG弱毒苗。(2)、中等毒力活疫苗:对法氏囊有轻度可逆行影响,但不影响发育,出现抗体早(5天),效价高(1:640~2560),保护率高达85~95%。如北京兽研所将CU1M株适应鸡胚成纤维细胞在上海制药厂生产(代号BJ-836),又如国内复制的荷兰D78鸡胚弱毒苗。(3)、毒性型:目前都不使用。如J-1株。3、防制对策:(1)、母源抗体监测:最好为微量中和,但琼扩最易推广。1日龄阳性率小于80%,可在10~17日龄接种;1日龄阳性率大于80%,则10日龄再测,若大于50%,则17~24日再接;若小于50%,14~21日接种。(2)、环境消毒,防止野毒感染,接种7天后才有免疫力。(3)、发生后处理:对症治疗(补液),使饲料蛋白含量控制在15%,饲料中加1~3倍VB和VC。疾病初期可全群肌注、饮水免疫。4、国内研究进展:(1)、哈兽研:进口弱毒疫苗株,研制成IBD-PBG-98弱毒苗(鸡胚苗),常水稀释苗,以2000EID50口服免疫幼鸡,可获取100%保护,稀释的常水中可加1%脱脂乳更佳。用量已大于600万头份。(2)、南农大:引进(美)IBD弱毒鸡胚苗,使之适应于鸡胚成纤维细胞,研制成细胞苗(代B-2)。疫苗可滴鼻、点眼、饮水等免疫,雏鸡安全,野外能有效减少死亡率,控制本病。已在10省市应用,用量大于6千万头份。(3)、吉林兽医所进行IBD-2512株鸡胚弱毒适应于鸡胚成纤维细胞。(4)、广东生物药厂从引起荷兰D78疫苗中分离病毒,复制疫苗成功。(5)、北京牧医所用该所培育的IBD鸡胚成纤维细胞毒-CJ801BKP株作种毒制备油佐剂灭活苗,已在10省市16万只鸡试验。反映安全性好,对子代有良好保护率,也可用感染鸡囊毒直接制苗。近年仍有增多趋势,商品疫苗对变异的亚型仅能部分保护,而变异的野毒株有高度侵袭力,可使法氏囊迅速萎缩。禽脑脊髓炎(AvianencephalomyelitisAE)禽传染性脑脊髓炎(AE),俗称流行性震颤(Epidemictremor),是一种主要侵害雏鸡中枢神经系统的病毒性传染病。以共济失调、头颈震颤和两肢轻瘫及不完全麻痹,母鸡产蛋量急速下降为主要特征。在临床上发病率较低。一、病原禽传染性脑脊髓炎病毒(Avianencephalomyelitisvirus)属于小RNA病毒科(Picornaviridae),肠道病毒属(Enterovirus),病毒粒子具有六边形轮廓,无囊膜,直径24~32nm。病毒的浮密度为1.31~1.33,沉降系数为148S。病毒可抵抗氯仿、酸、胰酶、胃蛋白酶和DNA酶。在二价镁离子保护下可抵抗热效应,56℃1h稳定。各病毒株对组织的趋向性及致病性虽有不同,但在物理、化学和血清学上都与原型鸡胚适应毒株(VanRoekel)无差异。禽传染性脑脊髓炎病毒各毒株大都为嗜肠性,但有些毒株是嗜神经性的,此种病毒株对鸡的致病性则较强。当家禽被感染后,病毒自粪便中排出,且可存活至少4周。通常野毒株可在易感鸡胚卵黄囊发育,但对鸡胚是非致死性的,病毒脑连续传代可适应鸡胚,感染鸡胚脑中的病毒滴度很高。该病毒还可在鸡胚肾、鸡胚成纤维细胞和鸡胚胰细胞中增殖,一般见不到致细胞病变现象。多次传代后将失去其毒力,在鸡胚神经细胞中复制可获得较高滴度的病毒,产生少许细胞病变。因此可为血清学试验和疫苗制备提