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第一章血液样本采集和血涂片制备考点1：血液是由红细胞、白细胞、血小板和血浆组成。考点2：离体后的血液自然凝固，分离出来的淡黄色透明液体称为血清。考点3：血浆适用于血浆生理性和病理性化学成分的测定，特别是内分泌激素测定。除钙离子外，它含有其他全部凝血因子，也适用于血栓与止血的检查。考点4：正常成人血量约为(70±l0)m17kg体重，成人约4—5L，约占体重的7%~8%，其中血浆占55%．血细胞占45%。考点5：血液的红色来自红细胞内血红蛋白。动脉血氧合血红蛋白含量较高，呈鲜红色：静脉血还原血红蛋白含量高，呈暗红色。严重贫血者血液红色变浅。考点6：严重一氧化碳中毒或氰化物中毒者血液呈樱红色。考点7：正常人血液pH值7.35—7.45，动脉血pH值7.40，静脉血pH值7.35。考点8：正常男性的血液比密约为1.055一1.063，女性约为．051一1.060，相对黏度为4—5；．血浆比密约为1.025—1.030；血辋胞比密约为1.0900血液比密与红细胞含量、红细胞内血红蛋白禽量有关。血浆比密和血浆内蛋白浓度有关。考点9：血液具有红细胞的悬浮稳定性、黏滞性、凝固性三睁特性。考点10：血液生理功能包括：运输功能、协调功能、维护机体内环境稳定和防御功能。考点11：静脉采血法放血与混匀的操作方法是：取下注射器针头，将血液沿试管壁缓缓注入抗凝管中，防止溶血和泡沫产生。轻轻混匀抗凝血，切忌振荡试管，盖紧试管塞备用。考点12：患者在静脉采血过程中进针时或采血后如发生眩晕，应让其平卧休息。必要时可嗅吸芳香氨酊、针剌（或指压）人中和合谷等穴位。若因低血糖诱发眩晕，可立即静脉注射葡萄糖或让患者口服糖水。如有其他情况，应找医生共同处理。考点13：皮肤采血法通常选择耳垂或手指部位。而新生儿做血细胞计数时，常用的采血部位是拇指或足跟。考点14：手指采血检查结果比较恒定，世界卫生组织(WHO)推荐的成人毛细血管采血最常用的部位是左手无名指。考点15：皮肤采血法通常选择耳垂或手指部位。耳垂采血时痛感较轻，操作方便，但血循环较差，受气温影响较大-检查结果不够恒定，一般情况下不宜使用。考点16：皮肤采血法的注意事项包括：①采血部位的皮肤应完整，无烧伤、冻疮、发绀、水肿或炎症等；②严格按无菌技术操作，防止采血部位感染，做到一人一针一管，避免交叉感染；③皮肤消毒后，应待75%乙醇挥发后采血，否则流出的血液扩散而不成滴；④如血流不畅切勿用力挤压．以免造成组织液混入，影响结果的准确性；⑤进行多项检查时，采血的顺序依次为血小板计数、红细胞计数、血红蛋白测定、白细胞计数、血型鉴定等。考点17：真空采血法的采血装置有套筒式、头皮静脉式两种。封闭式采血无需容器之间的转移，减少了溶血现象，能有效保护血液有形成分。样本转运方便，能有效避免医护人员和患者间交叉感染。考点18：各种彩色真空定量采血容器，根据需要标有不同的色码，适于不同的检验项目。其中，伞血细胞计数应选用紫色的真空采皿容器。考点19：凝皿检查（门、肚啊、因子测定）应选用的彩包真空采血容器是淡蓝色。考点20：彩色真空定量采血用于葡萄糖、糖耐量、乙醇浓度测试，应添加的抗凝剂是氟化钠、草酸钾。考点21：彩色真空定量采血用于血培养，应添加的抗凝剂是多茴香脑磺酸钠(SPS)。考点22：皮肤采血法的缺点是易于溶血、凝血、混入组织逵，而且局部皮肤揉擦、针刺深度不一、个体皮肤厚度差异等都影响检查结果，所以，皮肤采血检查结果重复性差、准确性不好。考点23：封闭式采血法的操作规范，有利于样本收集运送和保存，防止院内血源性传染病。考点24：采血方法应在患者、采血、溶血、样本处理、实验结果分析等方面进行质量控制。考点25：采血时，止血带结扎时间应小于1min．如超过2min，大静脉血流受阻而使毛细血管内压增高，使相对分子质量5kD的物质逸人组织液，或缺氧引起血液成分的变化，使检查结果不可靠。考点26：草酸盐溶解后解离的草酸根离子能与样本中钙离子形成草酸钙沉淀，使钙离子失去凝血作用，阻止血液凝固。它对凝血因子V保护作用差，影响凝血酶原时间测定，及自动凝血仪的检测结果，因此，不适于凝血检查。考点27：肝素不与钙离子结合，主要是加强抗凝血酶(AT)灭活丝氨酸蛋白酶的作用，阻止凝血酶的形成，并有阻止血小板聚集等作用，从而阻止血液凝固。考点28：枸橼酸钠能与血液中钙离子结合形成螯合物，阻止血液凝固。它适用于红细胞沉降率、凝血检查，是输血保养液的成分。考点29：常用的乙二胺四乙酸盐有钠盐或钾盐，能与血液中钙离子结合成螯合物，使Ca2+失去凝血作用，阻止血液凝固。考点30:EDTA盐对血细胞形态、血小板计数影响很小。适用于血液学检查，尤其是血小板计数。考点31：新载玻片常带有游离碱质，必须用约1mol/LHCl浸泡24h，清水冲洗，干燥后备用。用过的载玻片可用适量肥皂或其他洗涤剂煮沸20min，趁热刷去血膜，清水冲洗，必要时蒸馏水浸泡，干燥后备用。考点32：血涂片制备有手工推片法、载玻片压拉法、棕黄层涂片法等。血涂片可用非抗凝静脉血或毛细血管血，也可用EDTA抗凝血液制备。EDTA抗凝血有时可能引起红细胞皱缩和白细胞聚集，因此最好使用非抗凝血制备血涂片。考点33：手，丁推片法是指取血l滴置载玻片一端，以边缘平滑的推片，从血滴前方接触血液，使血液沿推片散开，通常推片与载玻片保持250一300夹角，平稳地向前推动，血液即在载玻片上形成薄层血膜。考点34：瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝（又称关蓝）组成。考点35：亚甲蓝为四甲基硫堇染料，有对醌型和邻醌型两种结构。通常为氯盐，即氯化美蓝，有色部分为阳离子。考点36：瑞氏染液中甲醇既能溶解美蓝和伊红，同时又能固定细胞形态，因此具有溶解作用。考点37：瑞氏染色法的染色深浅与pH值(最适值为6.4—6.8)、细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度有关。偏酸时，易于伊红结合，红细胞和嗜酸性粒细胞，细胞核呈淡蓝色或不染色；偏碱时，易于美蓝结合，所有细胞呈灰蓝色。考点38：瑞氏染色后在冲洗时应以流水冲洗，不能先倒掉染液，以防染料沉着在血涂片上。冲洗时间不能过久，以防脱色。如血涂片上有染料颗粒沉积，可滴加甲醇，然后立即用流水冲洗。考点39：瑞氏染色时，染色过深时可用水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。染色过淡可以复染；复染时应先加缓冲液，然后再加染液。考点40：吉姆萨染色法是将干燥的血涂片用甲醇固定3—5min。染色时，将血涂片置于用酸盐缓冲液稀释10—20倍的吉姆萨染液中，浸泡10一30min。冲洗时，取出用流水冲洗，待干镜检。考点41：瑞氏染色法是最经典、最常用的染色法，尤其对于细胞质成分、中性颗粒等可获得很好的染色效果，但对细胞核的着色能力略差。考点42：血液制备涂片时，血滴愈大、角度愈大、推片速度愈快，血膜愈厚，反之则愈薄。考点43：对于一个严重贫血患者，细胞数减少，血细胞比容减低、血液较稀时，制备血涂片时需采用大血滴、大角度、快推。第二章红细胞检查考点1：红细胞是血液中数量最多的有形成分，起源于骨髓造血干细胞。考点2：网织红细胞经约48h成完全成熟的红细胞，释放入血液，平均寿命约120do考点3：衰老红细胞主要在脾破坏，分解为铁、珠蛋白和胆红素。考点4：红细胞生理功能是通过胞内的血红蛋白来实现的。红细胞有交换和携带气体的功能。考点5：血红蛋白分子是在有核红细胞、网织红细胞内形成的一种含色素蛋白质。由亚铁血红素和珠蛋白构成。考点6：手工显微镜法是用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充人血细胞计数池，在显微镜下计数一定体积内的红细胞数，经换算求出每升血液中红细胞数量。而血液分析仪法是采用电阻抗和光散射原理。考点7：红细胞计数采用手工显微镜法产生误差的原因有：①血液发生凝固：②稀释、充池、计数不规范；③微量吸管、计数极不标缝：④固有误差。考点8：成年男性红细胞计数的参考值为(4～5.5)×1012/L；成年女性为(3.5—5.0)×1012/L；新生儿为(6.0—7.0)×1012/L。考点9：医学决定红细胞计数水平高于6.8×1012/L，应采取治疗措施；低于参考低限，为诊断贫血界限，应寻找病因；低于1.5×10127L应考虑输血。考点10：新生儿由于出生前处于生理性缺氧状态，故红细胞数明显增高，较成人约增加35%，出生2周后逐渐下降，2个月婴儿约减少30%。考点11：男性红细胞在6~7岁时最低，随年龄增大而逐渐上升，25—30岁达到高峰，30岁后随年龄增大而逐渐下降，直到．60岁尚未停止。考点12：女性红细胞随年龄增大而逐渐上升，13~15岁达到高峰，随后受月经、内分泌等因素影响而逐渐下降，21~35岁维持最低水平，以后随年龄增大而逐渐上升，与男性水平相当。考点13：真性红细胞增多症、良性家族性红细胞增多症等能引起原发性红细胞增多。考点14：呕吐、严重腹泻、多汗、多尿、大面积烧伤、晚期l消化道肿瘤而长期不能进食等均可引起相对性红细胞增多。考点15：改良牛鲍计数板用优质厚玻璃制成。每块计数板分为2个计数池，计数池两侧各有一条支持柱，将特制的专用盖玻片覆盖其上，形成高0.l0mm的计数池。考点16：红细胞计数采用的盖玻片是专用的玻璃盖片，要求表面平整光滑，两面平整度在0.002唧以内，盖玻片规格是24mm×20mm×0.6mm。考点17：患者，女性，48岁，用改良牛鲍计数板计数其红细胞，中央大方格内4角及中央5个中方格内红细胞总数为300，则其红细胞计数为3×1012/L。考点18：红细胞计数时需遵循一定方向逐格进行，以免重复或遗漏，对压线细胞采用数左不数右、数上不数下的原则。考点19:Hayem红细胞稀释液中，NaCI具有调节渗透压的作用。考点20:Hayem红细胞稀释液巾，Na2S04具有提高比密防止细胞粘连的作用。考点21:Hayem红细胞稀释液中，HgC12具有防腐的作用。考点22：枸橼酸钠稀释液中，枸橼酸钠具有抗凝、维持渗透压的作用。考点23：枸橼酸钠稀释液中，甲醛具有防腐和固定红细胞的作用。考点24：血液中血红蛋白以各种形式存在，包括：氧合血红蛋白、碳氧血红蛋白、高铁血红蛋白或其他衍生物。考点25：血液中血红蛋白采用比色法测定。考点26：血液中除硫化血红蛋白外的各种血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白，再和CN一结合生成稳定的棕红色复合物一氰化高铁血红蛋白。考点27：血液中除SHb外的各种Hb均可与低浓度SDS作用，生成SDS—Hb棕红色化合物，其吸收曲线波峰在538nm，波谷在500nm，肩峰在560nm，用分光光度计测定波峰处吸光度，经换算可得到每升血液中的血红蛋白浓度。考点28：氰化高铁血红蛋白法操作简单、显色快、结果稳定可靠、读取吸光度后可直接定值。1966年被ICSH推荐为血红蛋白测定的参考方法。考点29：氰化高铁血红蛋白测定法的致命弱点是氰化钾(KCN)试剂有剧毒，使用管理不当可造成公害。便；试剂稳定性差；需要绘制标准曲线考点30:SDS测定法具有操作简单、呈色稳定、准确性和精确性符合要求、无公害等优点。考点31：碱羟血红蛋白(ADH575)测定法试剂简单，呈色稳定，无公害，吸收峰在575nm，可用氯化血红素作为标准品。考点32：异常血浆蛋白质、高脂血症、白细胞数超过30.O×109/L、脂滴等可产生浊度，干扰血红蛋白(Hb)测定。考点33：正常成年男性血红蛋白的参考范围为120-170g/L。考点34：血红蛋白随年龄增长，可增高或减低，和红细胞变化相似。红细胞和血红蛋白量有日内波动，上午7时达高峰，随后下降。考点35：发生大细胞性贫血或小细胞低色素性贫血时，红细胞计数与血红蛋白浓度不成比例。大细胞性贫血的血红蛋白浓度相对偏高。考点36:HiCN转化液应贮存在棕色有塞玻璃瓶中。HiCN转化液在4℃保存一般可数月，不能在0℃以下保存，因为结冰可使高铁氯化钾还原，试剂失效。考点37：红细胞形态检查与血红蛋白测定、红细胞计数结果相结合可粗略推断贫血原因，对贫血诊断和鉴别诊断有很重要的临床价值。将细胞分布均匀的血涂片，进行染色后，根据各种细胞和成分各自的呈色特点，在显微镜下进行观察