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临床免疫学第一章概论1、主要的分泌型抗体是IgA，存在于胃肠道和支气管分泌液、初乳、唾液和泪液中，是参与黏膜免疫的主要抗体。2、补体系统C3含量最高，C2含量最低。豚鼠血清中补体含量丰富。3、淋巴结皮质区：B淋巴细胞副皮质区：T淋巴细胞4、T细胞表面CD3是组成TCR-CD8复合物的重要组成部分。5、外周免疫器官是免疫应答发生的场所6、CD2是T细胞的绵羊红细胞受体7、成熟B细胞的mIg主要是mIgM、mIgD8、目前不能利用抗原抗体检测核酸9、免疫防御是指机体排斥微生物的侵袭及其他外源性抗原异物的能力免疫自稳是机体阻止外来异物入侵、清除自身衰老和损伤细胞、对自身成分产生免疫耐受，并通过免疫调节达到维持机体内环境稳定的功能。第二章抗原抗体反应1、抗原抗体反应的pH6.0~9.02、抗原抗体结合的作用力：静电引力，范德华力，氢键结合力，疏水作用范德华力最小，疏水作用最大3、人血清中的抗原抗体不发生自然沉淀是由于带有大量的氨基和羧基残基形成水化层。第三章免疫原和抗血清的制备1、鉴定抗血清的特异性：双向免疫扩散抗体效价的测定：双向免疫扩散待测抗原定量测定：单向免疫扩散2、半抗原：只有反应原性，没有免疫原性3、R型抗血清—来源于家兔—反应范围宽，适于做诊断试剂H型抗血清—来源于马—适合范围窄，适于做免疫治疗4、第1次与第2次免疫间隔时间以10~20天为好，第3次及以后间隔一般为7~10天。第四章单克隆抗体制备1、人-鼠嵌合抗体是将人IgC区和鼠IgV区连接2、杂交瘤细胞得到的是鼠源性抗体3、噬菌体抗体库技术可以得到完全人源化抗体4、次黄嘌呤磷酸核糖转化酶是HGPRT第五章凝集反应1、参与直接凝集反应的抗体主要是IgM抗体；IgG分子量小，难以发生凝集。2、临床诊断中的外斐试验、肥达试验、交叉配血试验常用试管凝集法3、SPA协同凝集试验是一种间接凝集试验，能够检测IgG抗体4、ABO血型鉴定常用玻片凝集法5、用红细胞包被抗原检测抗体——正向间接凝集试验；特异性抗体致敏载体检测抗原——反向间接血凝试验；第六章沉淀反应1、免疫固定电泳=区带电泳+免疫沉淀反应；免疫电泳实质上是在直流电场作用下的凝胶扩散试验；火箭免疫电泳实质上是将单向免疫扩散与电泳相结合，在直流电场中加速定向扩散的单向免疫扩散技术。2、沉淀反应中，沉淀线靠近抗原孔，提示抗体含量大；靠近抗体孔，提示抗原含量大。沉淀线弯向分子量大的一方。3、免疫沉淀反应目前应用最广，定量比较准确的是免疫比浊法。4、参加沉淀反应的抗原物理性质必须是可溶的。第七章放射免疫分析1、RIA（放射免疫分析）：以放射性核素标记的抗原与反应系统中未标记抗原竞争结合为原理来测定待检样品中抗原量的一种分析法。放射强度与抗原量成反比。2、IRMA（免疫放射分析）：用放射性核素标记的过量抗体与待检抗原直接结合的非竞争性放射免疫分析法。放射强度与抗原量成正比。灵敏度较高。第八章荧光免疫技术1、荧光免疫技术中，间接法所用的第二抗体可以是IgA、IgG、IgM。2、免疫荧光细胞化学分为直接法、夹心法、间接法和补体法。常设阳性对照、阴性对照、替代对照和吸收试验。3、时间分辨荧光免疫测定利用镧系元素荧光寿命长的特点，待寿命短的自然荧光完全衰退后再测定，从而有效地消除非特异性荧光。4、组成荧光显微镜的结构中，只有目镜与普通显微镜相同。5、荧光素与蛋白质形成的是共价键。6、化学发光法灵敏度最高。7、荧光效率是指荧光色素将吸收的光能转变为荧光的百分率。8、间接免疫荧光法是目前公认最有效检测抗核抗体的方法。9、前临床治疗药物检测最常用的检测方法是：荧光偏振免疫分析法（FPIA）适宜检测小分子物质，常用于药物、激素的测定。第九章酶免疫技术1、酶免疫技术中最佳工作浓度的选定常用棋盘滴定法。2、HRP最常用的底物—四甲基联苯胺TMB3、待测抗原浓度过高会出现钩状效应。4、ELISA最常用的包被载体是聚苯乙烯。常用的封闭物质是牛血清白蛋白。第十章化学放光免疫分析技术1、电化学发光法检测灵敏度可达pg/mL2、直接化学发光剂：吖啶酯、三联吡啶钌酶促反应发光剂：HRP-鲁米诺，碱性磷酸酶AP-AMPPO3、电化学发光免疫分析（ECUA）常用的标记物是三联吡啶钌4、吖啶酯作用需要在碱性条件下。第十一章生物素-亲和素放大技术1、1个亲和素分子可结合4个生物素2、BAB：以游离的亲和素为桥联剂，将检测反应体系中抗原-生物素化抗体复合物与标记生物素连接起来。3、ABC：制备亲和素-生物素-过氧化物酶复合物，与反应体系中生物素化抗体或生物素化第二抗体相遇时，ABC中未饱和的亲和素结合部位可以和抗体上的生物素结合。BA（LBA）：以标记亲和素直接与生物素化抗体连接进行检测。4、BAB、ABC将酶标记在生物素上；LBA将酶标记在亲和素上。5、亲和素与生物素结合的特点：不属于免疫反应，但特异性强，亲和力大，结合后很稳定。6、免疫组化前对标本进行固定主要的目的是保存组织细胞抗原特异性的稳定。7、直接法BAS为生物素化第一抗体，间接法BAS为生物素化第二抗体。第十二章固相膜免疫测定1、免疫电镜技术中应用最广的标记物是胶体金。2、斑点酶免疫吸附试验的检测灵敏度较一般ELISA高6~8倍，常用载体为NC膜。3、胶体金制备的一般方法是还原法。4、固相膜免疫测定中最常用硝酸纤维素膜（NC膜）5、常用于检测hCG的是免疫层析试验6、检测结核感染常用ELISPOT7、HIV确认试验采用IBT（免疫印迹法）8、放射免疫沉淀实验（RIPA）是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法，同时弥补了免疫印迹法的不足。第十四章免疫细胞的分离及其表面标志检测技术1、Percoll分离液常用来分离单核细胞和淋巴细胞2、溶菌酶主要由巨噬细胞分泌3、检测中性粒细胞功能：NBT试验（硝酸四氮唑蓝还原试验）、细胞内杀菌功能试验第十五章免疫细胞功能检测技术1、检测T细胞功能的方法：T细胞增殖试验、分泌功能测定、T细胞介导的细胞毒试验、体内试验等。2、检测巨噬细胞的方法：炭粒廓清试验、吞噬功能检测、巨噬细胞溶酶体酶的测定、巨噬细胞促凝血活性测定。3、检测巨噬细胞的功能对了解机体特异性和非特异性免疫状态有重要作用。常用鸡红细胞、白色念珠菌、酵母细胞等做吞噬颗粒。4、抵御化脓性细菌感染的非特异性免疫细胞是中性粒细胞。5、淋巴因子在IV型变态反应的发生机制中起重要作用。6、活化NK细胞可分泌INF-γ和TNF-α7、IL-6可诱导肝细胞合成α1-抗糜蛋白酶。IL-6可刺激浆细胞生长，用浆细胞增殖法检测IL-6。由活化的T细胞和成纤维细胞产生。8、INF-γ由T细胞和NK细胞合成9、所有有核细胞均可产生IL-1，主要是巨噬细胞10、IL-2可刺激T细胞生长，介导细胞毒作用，促进B细胞生长分化，增强巨噬细胞抗原递呈能力、杀菌力及细胞毒性主要由T细胞产生，用T淋巴细胞增殖法检测IL-2。11、检测干扰素：抗病毒活性法干扰素的生物活性：抗肿瘤、抗病毒、免疫调节12、细胞因子检测最简单的方法是免疫学检测，最可靠的是生物学检测。13、活化的T细胞能产生multi-CSF14、CD3-CD16+CD56+为NK细胞15、流式细胞仪采用的发光源系统为激光第十八章体液免疫球蛋白检测及应用1、定量检测病人外周血免疫球蛋白IgG、IgA、IgE常用的方法是单向琼脂扩散法。2、母乳中的IgA分泌型提高了婴儿出生后4~6个月内的局部免疫屏障，常称为局部抗体。3、抗体分子中与抗原结合的部位是VH与VL4、SLE患者以IgG、IgA升高多见类风湿关节炎患者IgM升高为主5、IgE能与肥大细胞和嗜碱性粒细胞结合6、中性粒细胞不具有Fc受体7、血清中含量最多的抗体是IgG含量最少的是IgE第十九章补体检测及应用1、能够激活补体替代途径的免疫球蛋白是IgA聚合物2、补体活化顺序是C1423567893、HLA-III类基因区包括C2、C4、B因子等4、C1抑制物缺陷会导致遗传性血管性水肿5、具有过敏毒素作用的补体成分是C3a、C5a，在变态反应中导致组织损伤。6、补体结合试验阳性—不溶血阴性—溶血第二十二章感染性疾病与感染免疫检测1、HBeAg是乙肝传染性的标志，在急性乙肝早期常有检出2、肥达反应，抗体效价≥1:80或双份血清效价呈4倍以上增长具有诊断价值。3、中和作用是机体灭活游离病毒的主要方式4、抗链球菌溶血素O（ASO）常用检测方法是乳胶凝集试验和免疫散射比浊法。5、循环抗原检测用于诊断念珠菌病。6、结核杆菌检测：结核菌素试验、分枝杆菌抗体检测、全血干扰素测定法。第二十三章超敏反应性疾病及其免疫检测1、I型超敏反应：①药物过敏性休克；②血清过敏性休克；③呼吸道过敏反应，如过敏性鼻炎和过敏性哮喘；④消化道过敏反应；⑤皮肤过敏反应，如荨麻疹、湿疹和血管神经性水肿。2、介导II型超敏反应的主要是IgG和IgM，少数IgA。3、II型超敏反应：①输血反应；②新生儿溶血症；③自身免疫性溶血性贫血；④药物过敏性血细胞减少症；⑤肺出血肾炎综合症；⑥甲状腺功能亢进（Graves病）。4、III型超敏反应：①Arthus反应和类Arthus反应；②血清病；③链球菌感染后肾小球肾炎；④类风湿关节炎；⑤系统性红斑狼疮。5、IV型超敏反应：①感染性迟发型超敏反应；②接触性皮炎；③移植排斥反应。6、接触性皮炎由效应T细胞作用，无抗体参与。7、与血管炎性超敏反应有关的细胞主要是中性粒细胞。8、IV型超敏反应的机制：①T细胞致敏；②致敏T细胞产生效应。第二十四章自身免疫性疾病及其免疫检测1、I型自身免疫性肝炎的标志抗体是：抗平滑肌抗体2、常用来检测免疫复合物（CIC）的方法是聚乙二醇（PEG）沉淀法。3、抗核抗体（ANA）无器官特异性，无种属特异性ANA的主要性质是IgG，也有IgM、IgA、IgD4、目前最常用的抗ENA抗体谱的检测方法是免疫印迹法。5、自身免疫性溶血多见于中年女性。第二十五章免疫增殖性疾病及其免疫检测1、常用鉴定M蛋白的方法是免疫固定电泳。2、巨球蛋白血症是以分泌IgM的浆细胞恶性增殖为病理基础的疾病，好发于老年男性，骨痛、骨折较少，主要表现为骨髓外浸润、肝、脾、淋巴结肿大，血粘滞过高，电泳时难以泳动。3、抗体主要存在于电泳的γ区第二十六章免疫缺陷性疾病及免疫检测1、编码HLA-I类抗原的基因位点是A、B、C位点2、NBT还原实验可鉴别细菌和病毒感染，细菌感染时中性粒细胞杀菌能力增强。3、先天性胸腺发育不良首选T细胞亚群分析。第二十七章肿瘤免疫及其免疫检测1、NSE是检测小细胞肺癌的指标2、能用细胞分型法检测的HLA抗原为HLA-A.DP3、CEA是结直肠癌的肿瘤标志物4、CA125是卵巢癌相关抗原5、CA153是乳腺癌的标志物