主要组织相容性复合体-是由一群紧密连锁的基因群组成,定位于动物或人某对染色体的特定区域主要组织相容性复合体-是由一群紧密连锁的基因群组成,定位于动物或人某对染色体的特定区域,呈高度多态性。其编码的分子表达于不同细胞表面,参与抗原递呈,制约细胞间相互识别及诱导免疫应答。学术术语来源---HLA-A2小干扰RNA的设计及沉默效果检测文章亮点:1实验筛选出2个相对效果较好的小干扰RNA片段,随机选择1个并将有效的序列克隆入慢病毒载体并进行包装后,能有效地沉默HLA-A2在293T细胞中的表达。2实验中获得的siRNA-HLA-A2能有效沉默人胚肺成纤维细胞中HLA-A2基因的表达,减弱或抑制感染了siRNA-HLA-A2的人胚肺成纤维细胞的HLA-A2抗原的数量,从而达到减弱细胞免疫排斥反应的发生。关键词:组织构建;组织工程;人类白细胞抗原A2;RNA干扰;基因沉默;人胚肺成纤维细胞;辽宁省自然科学基金主题词:HLA抗原;RNA干扰;基因沉默;成纤维细胞摘要背景:人类白细胞抗原(humanleukocyteantigen,HLA)是人的主要组织相容性复合物,在移植排斥反应中起关键作用。降低HLA的表达,可以延长移植物的存活时间。目的:设计HLA-A2小干扰RNA,检测其对HLA-A2表达沉默的作用。方法:设计4种HLA-A2siRNA靶点序列构建其慢病毒表达体系,体外感染HLA-A过表达的293T细胞,观察4种靶点的敲减效率并筛选出有效靶点序列。体外培养人胚肺成纤维细胞,并用携带目的干扰序列的慢病毒感染人胚肺成纤维细胞,荧光显微镜下观察感染效率,应用Westernblot检测在人胚肺成纤维细胞中对HLA-A2表达沉默的作用。结果与结论:根据Genbank中HLA-A2的mRNA序列,设计合成了3个小干扰RNA,在体外能有效的沉默HLA-A2在293细胞中的表达,将基因序列亚克隆入干扰载体后感染人胚肺成纤维细胞,也能有效的沉默HLA-A2的表达,效率达80%左右。中国组织工程研究杂志出版内容重点:组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程