乙型病毒性肝炎的实验室诊断

乙型病毒性肝炎的实验室诊断乙肝作为一种全世界广泛传播的疾病，严重威胁人体的健康，愈来愈受到重视。不少人士定期参加体检以了解自己的身体状况，及早发现乙肝的存在。乙肝的实验室检测作为目前国内最为常用的检验项目，主要涉及乙肝的生物化学检测、乙肝“两对半”的检测和基因诊断。第一节乙肝的生物化学检测一、乙肝生物化学检测的简介当患者感染乙肝病毒之后，一些生化指标会发生改变。与病毒性肝炎密切相关的生化指标包括：丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、白蛋白、胆红素、胆碱酯酶、甲胎蛋白以及凝血因子。其中，丙氨酸转氨酶（ALT）又最为重要，常与乙肝“两对半”和基因诊断联合检测，指导临床用药。二、丙氨酸转氨酶（ALT）检测的临床意义丙氨酸转氨酶对于病毒性肝炎的特异性不高，但却是反映肝损伤的灵敏指标。当患者感染乙肝病毒，发生急性肝损伤时，血清中的丙氨酸转氨酶可在临床症状出现之前升高，且急性肝炎时丙氨酸转氨酶的高低与病情状况平行，因此是病情恢复的较好指标。通常，当急性肝炎时，AST/ALT1；肝硬化时，AST/ALT≥2；肝癌时，AST/ALT≥3。第二节乙肝“两对半”检测一、乙肝“两对半”的简介当生化检查肝功能指标异常，怀疑为乙肝病毒感染时，可以进行乙肝“两对半”的检查。乙肝“两对半”包括：乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝表面抗体（HBsAb）、乙肝e抗原（HBeAg）、乙肝e抗体（HBeAb）以及乙肝核心抗体（HBcAb），因为乙肝核心抗原没有检验，所以叫做乙肝“两对半”。乙肝表面抗原（HBsAg）：乙肝表面抗原又称为“澳抗”，是“澳大利亚抗原”的简称，因为最早发现于澳大利亚，故以此命名。它是患者血清中首先出现的血清标志物，可用于乙肝的早期诊断。乙肝表面抗体（HBsAb）:乙肝表面抗体是一种保护性抗体，表明人体对乙肝病毒具有抵抗能力，是人体感染或者接种乙肝疫苗的标志。该指标阳性提示乙肝病毒感染后的恢复期。乙肝疫苗接种后，该指标也为阳性，是衡量疫苗接种后是否具有预防效果的主要指标。乙肝e抗原（HBeAg）：它的出现说明病毒正在复制，此时的患者具有传染性。因此该指标强阳性，须受到患者和医务人员重视并采取相关医疗措施。乙肝e抗体（HBeAb）：它的出现对于患者来说是好消息，说明乙肝患者的病情相对好转，是治疗慢性乙肝的近期目标。乙肝核心抗体（HBcAb）：乙肝核心抗体阳性提示患者新近感染乙肝病毒或者既往感染过乙肝病毒。该抗体包括IgG和IgM。IgM在血清中出现较早，是新近感染的标志。IgG则随着病情的进展逐步产生，可在患者体内持续存在很长时间，是既往感染的标志。二、乙肝“两对半”的临床意义乙肝“两对半”的组合，随着乙肝病毒感染的时期不同和患者自身的免疫状态的差异，产生相应的动态变化。随着病情的发展，常见组合如下：1、HBsAg+、HBsAb-、HBeAg+、HBeAb-、HBcAb-：该时期为乙肝病毒的潜伏期或者急性乙肝的早起。2、HBsAg+、HBsAb-、HBeAg+、HBeAb-、HBcAb+：即为人们所熟知的乙肝“大三阳”，该时期病毒复制活跃，传染性强。3、HBsAg+、HBsAb-、HBeAg-、HBeAb+、HBcAb+：即为乙肝“小三阳”，该时期的急性乙肝病毒感染者趋向恢复，但仍具有传染性。4、HBsAg-、HBsAb+、HBeAg-、HBeAb+、HBcAb+：该时期为急性乙肝病毒感染后的恢复期，因为产生了乙肝表面抗体，故具有免疫力。5、HBsAg-、HBsAb+、HBeAg-、HBeAb-、HBcAb+：该时期为乙肝的恢复期，因为产生了乙肝表面抗体，故具有免疫力。6、HBsAg-、HBsAb-、HBeAg-、HBeAb-、HBcAb+：该组合提示患者既往感染、水平较低的慢性感染或者无症状携带者。7、HBsAg-、HBsAb+、HBeAg-、HBeAb-、HBcAb-：提示患者成功接种过乙肝疫苗或者乙肝已经恢复并且具有免疫力。第三节乙肝的基因诊断一、乙肝基因诊断的简介乙肝的基因诊断，是指运用分子生物学的技术和理论，定量检测患者体内的乙肝病毒DNA。乙肝基因诊断常用的生物学技术包括聚合酶链反应、反向斑点杂交和生物芯片技术。以聚合酶链反应为例，通过扩增并检测乙肝病毒DNA的一段特异DNA序列而达到乙肝诊断的目的，极大的提高了乙肝病毒感染诊断灵敏度和特异性，已成为实验室检测乙肝病毒的一种不可或缺的方法。运用基因诊断技术，可以进行乙肝病毒DNA的检测、乙肝病毒基因型的检测和乙肝病毒耐药突变的检测。二、乙肝基因诊断的临床意义1、乙肝病毒DNA的检测：可以用于可以判断受检者是否感染乙肝病毒，何时开始抗病毒治疗以及判断抗病毒治疗的疗效。乙肝病毒DNA的存在，是患者感染乙肝病毒最直接的证据。通过检测乙肝病毒DNA、乙肝“两对半”和丙氨酸转氨酶（ALT），可以指导临床用药：乙肝e抗原阳性，乙肝病毒DNA载量105拷贝/ml，丙氨酸转氨酶2×ULN；乙肝e抗原阴性，乙肝病毒DNA载量104拷贝/ml，丙氨酸转氨酶2×ULN；乙肝病毒DNA持续阳性，年龄大于40岁，丙氨酸转氨酶大于正常上限。以上情况，应给予抗病毒治疗。乙肝病毒DNA和丙氨酸转氨酶的动态监测，可以评估乙肝抗病毒治疗的疗效。当乙肝病毒DNA低于检测下限，丙氨酸转氨酶处于正常范围时，到达治疗终点。2、乙肝病毒基因型的检测：乙肝病毒DNA的基因型一般包括八种：A,B,C,D,E,F,G,H。一种抗病毒药物是否有效、病毒的毒性大小与否都和基因型有关。一般基因型为A的患者用干扰素治疗的疗效好于基因型为D的患者，B型好于C型，A和D型好于B和C型。因此检测患者的基因型，可以评估药物的疗效。同时，基因型为C的患者比基因型为B的患者，有更为常见的肝功能异常，更加严重的临床表现和组织学损伤。3、乙肝病毒耐药突变的检测：乙肝病毒DNA中，有一段基因称为P基因，该段基因有可能发生基因突变。一些抗病毒药物在使用的过程中可促进该段基因突变发生，而使病毒对该药物产生耐受。因此，通过乙肝病毒耐药突变的检测，使用乙肝病毒较为敏感的药物，可以指导临床的治疗。