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1“十一五”863计划现代农业技术领域“农业动物分子与细胞工程育种”重点项目课题申请指南一、指南说明“农业动物分子与细胞工程育种”重点项目以优异基因资源为基础，利用分子标记辅助选择、品种分子设计、转基因、胚胎及配子工程、体细胞克隆等分子与细胞工程技术，对畜禽重要经济性状进行精准选择，并实施快速扩繁，培育新品种（系）。充分利用畜禽分子与细胞工程育种技术，发挥我国丰富的畜禽地方优良品种资源优势，加快培育我国自主品牌畜禽品种，是提升我国畜禽种业的自主创新能力和国际竞争力的重要途径。此次发布的是现代农业技术领域“农业动物分子与细胞工程育种”重点项目申请指南，拟支持“农业动物分子与细胞工程育种”方面的11个研究课题，包括：（1）我国地方畜禽品种优良特性的分子遗传评估及综合利用技术；（2）基于高密度SNP的标记辅助选择技术；（3）家畜卵泡高效诱导发育技术研究与应用；（4）家畜精子快速低损伤分离技术研究与应用；（5）家畜胚胎干细胞技术研究；（6）体细胞高效实用化克隆技术研究；（7）胚胎高效分割保存与胚胎质量分子标识技术的研究；（8）猪分子细胞工程育种技术创新与优势性状新品系培育；（9）鸡分子细胞工程育种技术创新与优势性状新品系培育；（10）牛分子细胞工程育种技术创新与优势性状新品系培育；（11）羊分子细胞工程育种技术创新与优势性状新品系培育。本项目拟安排总经费9700万元，其中国拨经费7200万元，地方2与单位配套2500万元。课题实施期限为2008年6月至2010年10月。二、指南内容课题1.我国地方畜禽品种优良特性的分子遗传评估及综合利用技术研究目标：在过去多年对我国动物遗传资源的调查和初步遗传分析的基础上，综合利用现代分子遗传学技术，进一步对我国地方畜禽品种中的主要优良特性进行分子遗传评估，建立利用这些优良特性的育种技术方案，为充分有效利用我国优良地方畜禽品种资源奠定基础。主要研究内容：（1）挖掘我国地方畜禽品种中与繁殖、肉质和抗病相关的关键基因以及功能突变位点或紧密连锁的分子标记；（2）对可能影响畜禽重要经济性状的功能基因或分子标记进行遗传效应评估，并研制分子诊断试剂盒。（3）研究综合应用多个功能基因或标记以及多种分子育种技术，建立平衡育种技术体系。主要考核指标：鉴定和克隆遗传效应高于遗传方差10%以上的与肉质和抗病有关的功能基因10～15个；研发相应的分子诊断试剂盒20个以上；提出利用分子标记进行畜禽重要经济性状遗传改良的分子育种方案；申报发明专利5～10项；发表高水平研究论文15～20篇，其中，SCI/EI论文10篇。经费来源及构成：本课题拟安排国拨经费450万元，地方配套或单位自筹140万元。3课题２.基于高密度SNP的标记辅助选择技术研究目标：高密度SNP选择育种技术是当前世界畜禽分子育种的热点之一。建立基于覆盖整个基因组的高密度SNP标记的畜禽标记辅助选择（基因组选择，genomicselection）技术平台，提出基于基因组选择的优化育种方案，并在育种群体中加以实施。主要研究内容：（1）建立利用SNP芯片的高通量SNP检测技术平台；（2）研究SNP标记及其单倍型遗传效应的估计方法，并对我国畜禽群体中SNP标记影响主要经济性状的遗传效应进行估计；（3）研究在我国主要畜禽中进行高密度SNP选择的优化育种方案并加以实施利用。主要考核指标：（1）建立利用SNP芯片的高通量SNP检测技术平台；（2）提出在我国主要畜禽群体中进行基因组选择所需的适宜SNP标记，并估计出这些标记及其单倍型对主要经济性状的遗传效应；（3）提出在我国主要畜禽中实施基因组选择的优化育种方案。（4）申报发明专利5～10项；发表高水平研究论文15～20篇，其中，SCI/EI论文10篇。经费来源及构成：本课题拟安排国拨经费550万元，地方配套或单位自筹140万元。课题３.家畜卵泡高效诱导发育技术研究与应用研究目标：根据动物繁殖内分泌及发育生物学最新理论，应用卵泡诱导发育、胚胎体外生产等技术充分发挥良种家畜的繁殖潜力，4迅速提高群体中优良基因比例，缩短世代间隔，快速培养新品种，并实现优秀遗传资源经济、有效的保存和利用。主要研究内容：（1）建立家畜卵泡高效诱导发育、排卵技术；（2）建立家畜有腔卵泡卵母细胞体外成熟技术；（3）研究家畜腔前卵泡体外培养技术；（4）建立家畜ICSI等多种体外胚胎生产技术。主要考核指标：（1）将牛、羊生殖激素诱导排卵效率提高30％～50％，可用胚胎率提高30％；（2）初步建立腔前卵泡体外培养技术；完善牛、羊、猪有腔卵泡培养体系，卵子成熟效率达80％～90％；（3）IVF胚胎囊胚率30％～50％，猪ICSI胚胎囊胚率达35％以上；（4）申报发明专利3～5项；发表高水平研究论文15～20篇，其中，SCI/EI论文10篇。经费来源及构成：本课题拟安排国拨经费600万元，地方配套或单位自筹140万元。课题４.家畜精子快速低损伤分离技术研究与应用研究目标：通过控制畜禽出生后代性别比例，大量繁殖种畜，大幅度提高选种强度,加快育种进程。本课题旨在通过开展性别控制关键技术研究，为成倍地提高畜群繁殖效率、加快优良种畜的扩繁速度提供先进的繁育技术体系。主要研究内容：（1）探讨分离过程对精子细胞器的损伤；（2）建立牛、羊、猪XY精子高效无损分离技术；（3）建立精子高效冷冻保存技术、低剂量输精技术；（4）建立高效胚胎性别鉴别等性别控制技术。5主要考核指标：（1）分离速度提高30％左右；分离精子的体外存活时间延长1～2天；（2）在保证受胎率前提下，输精剂量降到普通精液的1/5～1/10，妊娠率50％以上；（3）筛选出3～5种新型抗冻剂和配方，并建立冷冻解冻程序，冷冻解冻活率达到40％～50％以上，受胎率达50％以上；（4）胚胎性别鉴定准确率100％，鉴别后胚胎移植成功率45％以上；（5）申报发明专利3～5项，发表高水平研究论文10～15篇，其中，SCI/EI论文5篇。经费来源及构成：本课题拟安排国拨经费550万元，地方配套或单位自筹230万元。课题５.家畜胚胎干细胞技术研究研究目标：通过研究完善牛、羊、猪胚胎干细胞分离技术，开展胚胎干细胞克隆、嵌合动物和转基因动物研究，探索建立牛、羊、猪的诱导多能性干细胞（inducedpluripotentstemcell，iPS细胞）技术体系，提高牛、羊、猪干细胞技术总体效率。主要研究内容：（1）研究和探索牛、羊、猪胚胎干细胞分离过程中胚胎细胞种类选择、饲养层处理和无血清培养体系的优化等方法；（2）建立羊、猪胚胎干细胞高效分离、培养技术；（3）建立适用于牛、羊、猪的iPS细胞技术体系。主要考核指标：（1）筛选出最佳的牛、羊、猪胚胎干细胞克隆技术体系；（2）获得2～3株胚胎干细胞系，并传代培养至20代以上；（3）初步摸索出将牛、羊、猪体细胞重编程为iPS细胞技术体系；（4）申报6发明专利5～10项，发表高水平研究论文20～25篇，其中，SCI/EI论文15篇。经费来源及构成：本课题拟安排国拨经费500万元，地方配套或单位自筹140万元。课题６.体细胞高效克隆技术研究研究目标：本课题通过研究完善牛、猪体细胞克隆技术，开展体细胞克隆牛、猪及其后代安全性和生产性能评价，提高体细胞克隆技术总体效率，为体细胞克隆技术在生产中应用，实现优秀个体无性繁殖提供关键技术。主要研究内容：（1）研究和探索牛、猪体细胞克隆过程中核供体细胞种类选择、核供体细胞处理、卵母细胞去核、融合和激活的新方法；（2）研究体细胞克隆牛、猪及其后代的安全性、生长发育规律、生产性能，并进行病理学评估；（3）建立牛、猪核移植技术体系。主要考核指标：（1）筛选5～10种最适合作为牛、猪体细胞克隆核供体细胞种类，建立牛体细胞克隆技术体系，牛、猪体细胞克隆胚胎妊娠率提高10％～20％，后代成活率提高20％～30％；（2）建立我国体细胞克隆牛、猪生产性能安全评价方法，并应用于评价体细胞克隆牛、猪；（3）获得3～5头在全国排名前列的种用奶牛公牛克隆后代；（4）获得3～5头种用性能优异的种公猪体细胞克隆后代；（5）申报发明专利5～10项，发表高水平研究论文10～15篇，其中，SCI/EI论文7篇。经费来源及构成：本课题拟安排国拨经费950万元，地方配套或7单位自筹160万元。课题7.胚胎高效分割保存与胚胎质量分子标识技术的研究研究目标：本课题拟通过调控胚胎发育潜能关键因子的发现及表观遗传调控网络的识别、建立评价胚胎质量的分子标识、研发更先进的胚胎生产技术体系。主要研究内容：（1）研究胚胎（含卵母细胞）高效保存技术；（2）建立新型胚胎切割技术；（3）研究胚胎质量评价的分子标识。（4）调控染色质重塑关键因子的分离鉴定及其对胚胎发育潜能的影响。主要考核指标：（1）分离鉴定出2种调控精子染色质重塑的关键因子，开发促胚胎发育试剂盒；（2）分离鉴定出3～5个适合于评价胚胎质量的分子标识；（3）家畜卵母细胞冷冻解冻存活率达50％～80％，冷冻胚胎切割成功率95％以上，切割后半胚移植成功率45％以上；（4）申报发明专利5～10项；发表高水平研究论文15～20篇，其中，SCI/EI论文10篇。经费来源及构成：本课题拟安排国拨经费200万元，地方配套或单位自筹50万元。课题8.猪分子细胞工程育种技术创新与优势性状新品系培育研究目标：利用先进的分子育种技术，与常规育种技术相结合，培育高产、优质、抗病的瘦肉型猪新品系，满足我国养猪业快速、可持续发展的需要。8主要研究内容：（1）父系新品系选育：将分子标记辅助选择、标记辅助导入、DNA分子诊断等分子育种技术融入常规育种技术，培育优质父系猪新品系；（2）母系新品系选育：充分利用我国现有猪种资源，通过分子育种手段，重点提高繁殖力、肉质、抗病性，培育出能普遍推广的母系新品系。（3）优质猪配套系选育：通过配合力测定结合分子手段，筛选具有自主品牌的优质猪配套系。主要考核指标：（1）培育抗应激瘦肉型猪父系1~2个，后备猪达100kg体重日龄为150天以下，饲料转化率2.4，活体背膘厚11mm以下，没有应激基因。（2）培育高产、肉质优良的瘦肉型猪母系2~3个，后备猪达100kg体重日龄为155天以下，饲料转化率2.5，活体背膘厚13mm以下，初产母猪产仔数10.5头以上，经产母猪产仔数11.5头以上。③培育具有自主品牌的优质猪配套组合1个，并形成完整的良种繁育体系。商品猪群100kg体重日龄为165天以下，饲料转化率2.7，活体背膘厚15mm以下，大理石花纹明显，肌内脂肪含量2.5%以上，肉色鲜红。④申报发明专利3～5项；发表高水平研究论文15～20篇，其中，SCI/EI论文5篇。经费来源及构成：本课题拟安排国拨经费1150万元，地方配套或单位自筹500万元。课题9.鸡分子细胞工程育种技术创新与优势性状新品系培育研究目的：利用我国丰富的鸡品种资源，采用先进的分子与细胞育种技术对蛋鸡、肉鸡进行选育提高，培育突出性状新品种（系）。9主要研究内容：1、蛋鸡新品系选育：（1）利用标记辅助选择、标记辅助导入及基因组选择等分子育种手段，对已有蛋鸡品系进一步选育提高；（2）结合利用我国现有地方遗传资源和引进的优秀商业品种，培育出优质、有特色及有市场竞争力的蛋鸡新品系，重点开发优质节粮型蛋鸡。2、优质肉鸡新品系选育：利用我国现有肉鸡品种（系），通过分子与细胞育种手段，重点提高肉质、饲料转化率和种鸡繁殖率，培育出能普遍推广的优质肉鸡新品种(配套系)。主要考核指标：（1）培育蛋鸡新品系3~5个，节粮型蛋鸡料蛋比2:1，适应性强，产蛋期死亡率降低1.5个百分点；（2）培育肉鸡新品系4~6个，质量性状稳定，IMF和IMP含量提高8%～10%，死亡率降低1个百分点，有色羽高效型56日龄饲料转化率达到2.1以下。（3）申报发明专利3～5项；发表高水平研究论文15～20篇，其中，SCI/EI论文5篇。经费来源及构成：本课题拟安排国拨经费850万元，地方配套或单位自筹400万元。课题10.牛分子细胞工程育种技术创新与优势性状新品系培育研究目标：在现有奶牛、肉牛主要经济性状遗传标记研究的基础上，