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实验室常用溶液的配置Amp+/Kan+:贮存液浓度为50mg/mL称取500mg于10mL超纯水中溶解，抽滤后1mL分装到离心管中，于-30℃冻存X-gal：贮存浓度为20mg/mL称取20mgX-gal溶于1mL二甲基甲酰胺中，-30℃中用锡箔纸包裹后避光保存，不需要过滤除菌IPTG：贮存浓度为0.84mol/L称取2gIPTG溶于8mL超纯水中，用水定容到10mL，用0.22um的一次性滤过器过滤除菌，1mL分装到离心管中并于-30℃保存CaCl2：贮存浓度为1mol/L称取1.11gCaCl（或者CaCl:2H2O1.4698g）溶于8mL超纯水中，定容到10mL，用0,22um的一次性滤过器过滤除菌，1mL分装到离心管中，并于-30℃保存LB培养基：胰蛋白胨（Tyrtone）10g/L酵母提取物（YeastExtraction）5g/L氯化钠10/L根据经验用NaOH调节PH为7.2-7.6，然后高压蒸汽灭菌，注意及时从灭菌锅中取出无DNA酶的RNA酶：将胰RNA酶（RNA酶A）溶于10mmol/LTris-Cl（PH7.5）、15mmol/LNaCl中，配成10mg/mL的浓度，于100℃加热15min，缓慢冷却至室温，分装成小份保存于-20℃Bradford贮存液95%乙醇100mL88%磷酸200mLG2500.35g室温下可储存，一般4℃Bradford工作液Bradford贮存液30mL双蒸水425mL95%乙醇15mL88%磷酸30mL储存于4℃超声破碎缓冲液KCl300mM22.37gKH2PO450mM6.81gEDTA1mM0.292g(EDTA-2Na-2H2O)0.372g定容至1L，调pH至8.0包涵体洗涤液KCl300mM22.37gKH2PO450mM6.81gEDTA5mM1.46g(EDTA-2Na-2H2O)1.86g尿素2M120gTritonX-1000.5%5ml脱氧胆酸钠盐0.1%1g定容到1L调pH至8.0匀浆缓冲液（pH=7.5）成分：20mMHEPES0.002mol=0.476g加入0.952g1.5mMMgCl20.00015mol=0.0036g加入0.0072g0.2mMEDTA0.00002mol=0.00584g加入0.01168g0.1MNaCl0.01mol=0.58g加入1.16g0.5mM钒酸钠0.00005mol=0.0092g加入0.0184g加100mL水进行溶解，NaOH调pH至7.50.2mMDTT总体积500μL加入0.1μL0.4mMPMSF总体积500μL加入20μL1%SDS加入50μL10%SDS其中DTT和PMSF匀浆之前加入，SDS匀浆之后离心之前加入DTT配成1M母液，溶于0.01M乙酸钠（pH=5.2）中，过滤除菌PMSF配成10mM母液，溶于异丙醇10*PBSNaCl80.0669gKCl2.0129gNa2HPO414.1960gKH2PO42.4496g水定容至1L，使用时稀释10倍，用NaOH调pH至7.4Startwith800mLofdistilledwatertodissolveallsalts.AdjustthepHto7.4withHCl.Adddistilledwatertoatotalvolumeof1liter.Theresultant1xPBSshouldhaveafinalconcentrationof10mMPO43−,137mMNaCl,and2.7mMKClIfusedincellculturing,thesolutioncanbedispensedintoaliquotsandsterilizedbyautoclaving(20min,121°C,liquidcycle).Sterilizationmaynotbenecessarydependingonitsuse.PBScanbestoredatroomtemperatureorinthefridge.However,concentratedstocksolutionsmayprecipitatewhencooledandshouldbekeptatroomtemperatureuntilprecipitatehascompletelydissolvedbeforeuse.转膜缓冲液（含有SDS）1L剂量甘氨酸2.9gTris5.8gSDS0.37g甲醇200mL水800mL10×蛋白电泳缓冲液1L剂量Tris碱(Mr121.14)30.2g甘氨酸(Mr75.07)188gSDS(Mr288.38)10g加水至1L用时稀释10倍即可30％丙稀酰胺1L剂量丙烯酰胺290gN,N’-亚甲基双丙稀酰胺10g溶于600ml蒸馏水中，加热至37℃溶解，补足体积至1L，过滤，且pH不大于7.01MTris-Cl（pH6.8）60.55gTris碱溶解于400ml蒸馏水，溶解后调pH值，总体积为500ml1.5MTris-Cl（pH8.8）90.83gTris碱溶解于400ml蒸馏水，溶解后调pH值，总体积为500ml。加约14.5ml浓盐酸，再调整到500ml体积1MDTT用20mL0.01mol/L乙酸钠溶液（pH=5.2）溶解3.09gDTT，过滤除菌后分装考马斯亮蓝R-250染液在90mL甲醇：水（1:1）和10mL冰乙酸混合液中溶解0.25g考马斯亮蓝R-250，过滤后室温保存蛋白酶K（20mg/mL）灭菌的50mMTris（pH8.0），1.5mM乙酸钙溶解，配置成浓度为20mg/mL的溶液，-20℃保存流式缓冲液PBS+5%FBS+0.02%sodiumazideWater45mL20%叠氮钠50μL10*PBS5mLFBS2.5mL文献常见配方：PBS+0.5-1%BSA（5-10%FBS）+0.1%sodiumazide酸酐称取50g重铬酸钾（KCrO4）溶于80mL双蒸水中，90℃中溶解2h，每半小时搅拌促进溶解，溶解完成后，加入1000mL硫酸，分装于2个瓶子中。注意使用过程中，如果其中一瓶的效果不好，不要混合使用。使用5次，就要重配。滴管酸酐中浸泡24h，自来水冲洗至无明显可见颜色，自来水正反面各20遍，双蒸水正反面各20遍，复印纸中包裹，烘干，加棉花塞和胶头，单独包装，灭菌，烘干。双抗（青霉素和链霉素）0.8g链霉素和80WU青霉素，一起溶于8mlPBS，单位分别为10^5ug/ml和10^5U/ml，然后稀释10倍，分别为10^4ug/ml和10^4U/ml，使用时，按照1%加入，分别为100ug/ml与100U/ml培养基I2%FCS，1%双抗，128uL/40mL肝素钠，RPMI1640培养基II0.1%FCS，1%双抗，128uL/40mL肝素钠，RPMI1640完全培养基10%FCS（5%FCS+5%鱼血清），1%双抗LPS称取2mgLPS溶于1mLPBS中，0.22μm滤膜过滤，硅化离心管，-20℃保存1*Turk染液GentianVioler（结晶紫）50mgAceticAcid（冰乙酸）5mLWater495mL1%巴比妥钠1g巴比妥钠溶于100mL的PBS中，充分混匀，避光保存（80ug/g用量）诱导小鼠腹腔巨噬细胞所需溶液硫代硫酸盐肉汤培养基(Thioglycollatebroth)：称取3g，加入到100ml纯水中，高温121℃灭菌15min，然后冷却到室温，再重复2次，进行老化操作。此时已经溶解，呈现透明溶液。冲洗液：RPMI1640+1%双抗培养基：RPMI1640+10%FBS+1%双抗氯化铵红细胞裂解液（10×的储存液）参考流式中文网80.2gNH4Cl(1.5M)8.4gNaHCO3(100mM)3.7gEDTA二钠(10mM)加水至900ml，然后用1M的HCl或1M的NaOH调节pH值至7.4。最后加水至1升。该10*的储存液可在4℃保存6个月。工作液的配制：在使用前蒸馏水稀释10倍即可。（1份储存液加上9份水）。工作液用来裂解红细胞。不能以10*的浓度储存，否则会形成碳酸铵而失效。ACK裂解液参考文献Dynamicvariationincyclingofhematopoieticstemcellsinsteadystateandinflammation,JEM,2011ACK(Ammonium-Chloride-Potassium)LysingBufferAmmoniumChloride150mMMw53.5PotassiumBicarbonate10mMMw100.1EDTA0.1mMMw372.0ACKLysisBuffer(1L)ComponentAmountFinalConcentrationNH4Cl8.3g0.15MKHCO31.0g10mMEDTA200ul0.5M0.1mMaddddH2Oto800ml,adjustpHto7.2-7.4,finalizevolumeto1LwithddH20RedBloodCellLysisUsingACKLysingBuffer1)CollectwholebloodbyvenipunctureinEDTA-treatedcollectiontubes.2)Pipette1mLEDTA-treatedwholebloodintoatubecontaining10-20mLofACKLysingBufferatroomtemperature.3)AllowthebloodsampleplusACKLysingBuffertoincubateatroomtemperaturefor3–5minutes.Lysisoftheredcellsshouldbeevidentduringthisincubation.4)Collectthewhitebloodcellsbycentrifugationat300xgfor5minutesatroomtemperature.5)Aspiratethesupernatant,leavingapproximately50uLtoavoiddisturbingthepellet.6)Gentlymixthecellsandtheremainingfluid,thenadd5mLcoldphosphatebufferedsaline.7)Mixthecellsandphosphatebufferedsaline,andthencollectthecellsbycentrifugationat300xgfor5minutesat2-8°C.8)Aspiratethesupernatantandresuspendthecellsinphosphatebufferedsaline,supplementedwithcarrierproteinifdesired,at2-8°C.9)Thecellsarereadyforfurtheranalysis.