中药化学实验

目录实验一黄藤中掌叶防己碱的提取、氢化、和鉴定...............................................................11、巴马汀的提取..............................................................................................................12、巴马汀粗品的精制......................................................................................................23、巴马汀氢化物的制备..................................................................................................34、鉴定..............................................................................................................................4实验二大黄中大黄素的提取、分离和鉴定.............................................................................51、大黄粉酸水解..............................................................................................................52、总羟基蒽醌苷元的提取..............................................................................................63、PH梯度萃取................................................................................................................74、柱色谱精制大黄素......................................................................................................9实验三槐类中芦丁的提取、分离与鉴定................................................................................101、芦丁的提取.................................................................................................................102、芦丁的精制和酸水解.................................................................................................113、槲皮素五乙酰化物的制备.........................................................................................124、糖鉴定.........................................................................................................................135、芦丁、槲皮素的鉴定.................................................................................................141实验一黄藤中掌叶防己碱的提取、氢化、和鉴定(一)巴马汀的提取一、实验目的1、掌握渗漉提取方法2、得到巴马汀粗品3、学习生物碱的定性鉴别方法二、实验原理黄藤中巴马汀（掌叶防己碱，Palmatine）的含量为4%，是季铵型生物碱，可溶于水、醇中，盐酸盐的溶解度低，有机酸盐的溶解度高，因此，用1%的醋酸溶液渗漉提取巴马汀。用盐析的方法，使巴马汀在水中溶解度降低而沉淀出来。NH3OH3OOCH3OCH3+OH_Palmatine三、实验方法50g黄藤粉25ml1%HAc湿润15min500ml1%HAc渗漉（1-2d/s）渗漉液10ml渗漉液其余渗漉液10%NaCl，搅拌溶解沉淀反应40%NaOH调pH10，静置，抽滤巴马汀粗品2反应试剂：碘化铋钾碘-碘化钾沉淀鞣酸硅钨酸苦味酸(1)碘化铋钾试剂：取滤液1ml，加入试剂1~2滴，如有砖红色沉淀产生，可能存在生物碱。(2)碘-碘化钾试剂：取滤液1ml，加入试剂1~2滴，如有红棕色沉淀产生，可能存在生物碱。(3)硅钨酸试剂：取滤液1ml，加入试剂1~2滴，如有浅黄色或类白色沉淀产生，可能存在生物碱。(4)苦味酸试剂：取滤液1ml，加碱调中性，加入试剂1~2滴，如有黄色沉淀产生，可能存在生物碱。(5)鞣酸试剂：取滤液1ml，加碱调中性，加入试剂1~2滴，如有白色沉淀产生，可能存在生物碱。四、实验注意事项1、湿润目的：避免干药材吸水后溶胀，在渗漉筒中膨胀而使渗漉液难流出；方法：溶剂量为药材的1/2，放置15分钟；程度：湿润后的药材手握成团，放开后松散。2、装筒方法：（1）两层小纱布湿润后盖于渗漉筒小孔上，避免紧、大；（2）湿润后的药粉均匀地倒入渗漉筒里，避免松紧不匀；（3）药粉上盖一层滤纸，压上瓶盖，以防药粉翻出，影响提取得率；（4）渗漉筒下端活塞打开，加提取溶剂至满，排出气泡；（5）将活塞关闭5-10分钟，浸泡药粉，再打开渗漉；（6）保持液面高于药粉。3、判断提取完毕的方法（1）渗漉液颜色很浅；（2）渗漉液沉淀反应呈阴性；（3）渗漉液为药粉体积的10倍时，基本渗漉完毕。4、盐析量：固体，为渗漉液体积的10%量。5、调PH：调至PH10，由于有有机酸共存，放置后又回到PH9。6、抽滤：放置一天以上再抽滤，尽量将上清液倒去，否则影响抽滤时间。37、干燥：抽滤物放入小干燥皿中，写上姓名、班级，统一干燥。8、称重，计算粗制率。五、思考题1、还可用什么方法提取黄藤中生物碱？请设计提取流程。2、渗漉用的酸水，除醋酸外，还可用什么酸水？3、分离黄藤中的季铵型生物碱，除盐析外还可用什么方法？请设计分离流程。(2)巴马汀粗品的精制一、实验目的1、学习结晶方法2、得到氯化巴马汀精品二、实验原理利用混合物中各化合物对某种溶剂溶解度的差别，而使单一成分以结晶状态析出的方法。巴马汀的盐酸盐在水和醇中溶解度小，易析出黄色针状结晶（m.p.206℃）。三、实验方法4巴马汀粗品40ml80%EtOH，加热溶解15min,趁热抽滤滤渣滤液20ml80%EtOH加热溶解，趁热抽滤重复数次至滤液无色滤液6mol.LHCl调PH2，放置析晶，抽滤氯化巴马汀四、注意事项1、含巴马汀粗品的滤纸撕碎后同巴马汀放入圆底烧瓶中加热溶解；2、80%EtOH溶剂量以巴马汀粗品量定，3g巴马汀粗品约75ml80%EtOH，溶剂量多，则不易析晶；溶剂量少，则结晶杂质多。3、滤液要趁热抽滤；4、滤液调PH前若有析晶，需加热溶解；5、待析晶溶液，应将瓶壁边有沉淀的部分溶解；6、析晶时间应为一天以上。五、促进析晶的方法1、将瓶盖打开，挥去部分溶剂；2、用玻棒擦瓶壁，加速析晶；3、加晶种加速析晶；4、延长放置时间或低温放置。六、思考题1、为什么用HCl调PH值？2、如何判断结晶的纯度？3、滤液有析晶时调PH前，会出现什么结果？（4）鉴定一、实验目的51、学习生物碱的TLC检识方法2、巴马汀、四氢巴马汀的定性鉴别（TLC、m.p.）二、实验原理用硅胶板进行巴马汀、四氢巴马汀的TLC检识，选用氨薰的方法避免生物碱在硅胶板上易拖尾的现象。三、实验方法1、TLC点板→氨缸中放5min→展开槽展开→取出察看（可见光、荧光、显色剂）样品：巴马汀、四氢巴马汀的样品及对照品，用乙醇溶解展开剂：氯仿-甲醇（9：1）显色剂：碘化铋钾2、m..p.：显微熔点仪，记录初始熔化时温度及完全溶化时温度。四、注意事项1、氨水有刺激性，操作时注意；2、熔点测定时，样品量要少。五、思考题1、生物碱在硅胶板上展开为什么会拖尾？2、避免生物碱在硅胶板上拖尾的方法有哪些？3、如何选择生物碱TLC展开剂？4、本实验在可见光和荧光下检识有什么现象？为什么？5、熔点测定时，样品量多会对测定结果有什么影响？6、从鉴定结果如何判断样品的纯度？实验二大黄中大黄素的提取、分离和鉴定（1）酸水解一、实验目的1、学习酸水解的方法2、得到大黄粉酸水解药渣二、实验原理大黄中蒽醌类化合物有结合态和游离态两种形式存在，为得到游离蒽醌类化合物，先酸水解，使蒽醌类化合物以苷元的形式游离出来。6三、方法10g大黄粉20%H2SO4直火回流加热1小时，抽滤滤渣水洗中性，干燥滤饼四、注意事项1、药粉在水洗中性过程中尽量避免损失；2、药渣干燥前要松散；3、水解液酸性强，避免用手直接接触。五、思考题1、酸水加热为什么要用回流装置？2、要得到大黄中的蒽醌苷元，还有什么办法？（2）总羟基蒽醌苷元的提取一、实验目的1、学习连续回流提取方法2、得到大黄中总羟基蒽醌苷元提取物二、实验原理OOOHOHCOOHOOOHOHCH2OHOOOHOHCH3OHOOOHOHCH3OCH3OOOHOHH3CABCD7苷元为亲脂性成分，用乙醚提取。三、实验方法滤饼置索氏提取器中，加150mlEt2O,提2.5hr（提取液无色）Et2O液（大黄中总羟基蒽醌苷元）四、注意事项1、纸筒的包法：原则是药粉不漏出2、提取器的装法（1）纸筒的高度不超过侧管的高度；（2）药粉的高度不超过虹吸管的高度；（3）线头在管内，保持提取器闭封。3、溶剂的倒法50ml由提取器上端倒入，浸泡药粉；100ml倒入平底烧瓶中。4、温度的控制溶剂蒸气至冷凝管第二个球处，水浴温度约60℃。5、实验室禁止明火，实验过程中保持通风，尽量避免乙醚挥出。6、平底烧瓶要干燥。五、思考题1、同回流提取相比，该方法的优点？2、还可选用哪些溶剂提取？3、若平底烧瓶中有水，将会有什么结果？4、为什么温度控制在溶剂蒸气至冷凝管第二个球处？（3）PH梯度萃取一、实验目的1、学习PH梯度萃取的方法和原理2、得到大黄素粗品二、实验原理依据大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的酸性强弱不同，采用强弱不同的碱水萃取，得到大黄素。三、实验方法81、分离方法乙醚液（T）↓120ml(40mlX3)2.5%NaHCO3↓-------------------------↓乙醚液（1）NaHCO3液↓120ml(40mlX3)2.5%Na2CO3↓--------------------------↓乙醚液（2）Na2CO3液↓120ml(40mlX3)2.5%Na2CO3↓调pH3↓－－－－－－－－↓沉淀Na2CO3液乙醚层（3）↓100ml(25mlX4)0.5%NaOH↓－－－－－－↓NaOH乙醚层（4）2、TLC跟踪检查硅胶-CMC-Na展开剂：Pet-EtOAc(7:3)样品：乙醚液（T，1-4）四、注意事项1、分液漏斗使用前检查是否漏。2、乙醚提取液倒入分液漏斗中，若有沉淀留在瓶中，用待萃取的碱液洗后再倒入分液漏斗中，直至沉淀全部被溶解。3、产生乳化层，解决的方法是：（1）轻摇；（2）长时间静置；（3）用电吹风加热（4）玻棒搅动（5）抽滤4、待完全静置分层后放出水层。五、思考题1、萃