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第一章绪论答案一、名词解释1.临床检验生物化学(ClinicalBiochemistry):临床检验生物化学是在人体正常生物化学基础上，研究病理状态下生物化学改变，寻找这些改变的特征性标志并建立可靠实用检测方法，通过对这些特征性标志物的检测，为健康评估、疾病预防、诊断、治疗、病情和预后判断等提供生物化学信息和决策依据的一门学科。2.组合试验(profiletests):在循证检验医学基础上，将某些疾病或器官系统功能的有关检验项目，进行科学合理的组合，以便获取更全面完整的病理生物化学信息的方法。如了解肝脏功能的组合试验。二、问答题1.试述临床检验生物化学的研究领域。临床检验生物化学的学科领域主要包括以下三方面：1.揭示有关疾病的病理生物化学改变，从本质上阐明疾病发生、发展、转归的生物化学机制，为疾病的预防、诊断、疗效及预后评估，提供理论基础。2.在上述研究基础上，寻找具有疾病特异性的生物化学标志物，并建立特异度、灵敏度高，简便而高性价比的检测方法，从而在临床开展有关项目的检测，提供反映这些标志物改变的客观数据。3.将检测项目的数据，转化为预防、诊断和疗效及预后评价信息。2.试述临床检验生物化学在医学中的地位及应用。在医学中，临床生物化学是阐明疾病发生、发展及转归的分子机制，从本质上认识病变准确部位及具体环节，为寻找有效的预防和治疗靶点，疾病的诊断及病情和预后判断，提供理论基础的一门重要病理学学科。其在医学中的应用主要包括：1.揭示疾病发生的分子机制。2.通过对有关疾病生物化学改变的特征性生物标志检测方法的建立和实施，为判断有无及何种疾病提供客观依据。而动态观察这些标志物的改变，可对病情发展、转归、预后及治疗方案的制定和效果判断，提供依据。3.临床检验生物化学技术，涵盖了当前医学研究中常用的主要方法技术。因此，也是医学特别是临床医学各个领域研究的一门共同性工具学科。3.简述临床检验生物化学的进展及发展趋势。①分子诊断学迅速发展，代表了的发展方向；②深入寻找高诊断特异性和灵敏性的新生物化学标志，提高诊断性能；③检测技术和方法的更新完善，更加及时、准确地提供检验结果；④全程质量管理；⑤以循证检验医学为基础，科学评价有关检测项目的诊断性能，合理有效地开展临床生物化学检验。第二章生物化学检验中的诊断酶学参考答案一、单项选择题(A型题)1．A2．B3．B4．D5．B6．C7．B8．C9．B10．E11．D12．D13．B14．B15．A16．D17．B18．D19．E20．B21．C22．B23．A24．E25．E26．B27．A28．B29．C30．A31．D32．A33．C二、多项选择题(B型题)1．E2．D3．C4．A5．E6．B三、多项选择题(X型题)1．ABCD2．ABE3．ABDE4．ABCD5．ABC6．ABCD7．AD8．ABDE9．ABCD10．ACDE11．BCDE12．ABE13．AE四、名词解释1．酶是一种由活细胞产生，具有高度专一性、高度催化活性的物质，又称为生物催化剂，主要是蛋白质。2．血浆固有酶指属血浆蛋白的固有成分，在血浆中发挥特定催化作用的一类酶，也称血浆特异酶。3．酶失活至原来活性一半时所需时间称为酶的半寿期（t1/2）。半寿期可用来代表酶从血中清除的快慢。4．连续监测法是指每隔一定时间（2～60s），连续多次测定酶反应过程中某一反应产物或底物量随时间变化的数据，求出酶反应初速度，间接计算酶活性浓度的方法。5．在酶学分析中，作为试剂用于测定化合物浓度或酶活性浓度的酶称为工具酶。6．酶活性IU定义为：在特定条件下，1min能转化1mmol底物的酶量，即1IU=1mmol.min-1。目前国内外大多数临床实验室常省略国际二字，即将IU简写为U。7．同一种属中由不同基因或等位基因所编码的多肽链单体、纯聚体或杂化体，具有相同的催化作用，但其分子构成、空间构象、理化性质、生物学性质以及器官分布或细胞内定位不同的一组酶称为同工酶。8．底物启动模式是指样品先与缺乏某种底物的试剂1预孵育一定时间后，再加入含这种底物的试剂2，启动样品中的待测酶的酶促反应。五、问答题1．V=Vm[s]/(Km+[s])=Vm*3Km/(Km+3Km)=3/4Vm=0.75Vm，即V/Vm=0.75。2．正常血浆中酶的动态变化特点：①正常血浆酶根据酶的来源及其在血浆中发挥催化功能的情况，可将血浆酶分成血浆特异酶和非血浆特异酶两大类，非血浆特异酶可进一步分为外分泌酶、细胞内酶和其他酶。②一般认为，血液中酶的清除方式与其他血浆蛋白质类似，但是具体清除途径尚未完全明了。血浆酶主要在血管内失活或分解，尿液则是小分子酶排出的途径。影响酶浓度的因素包括影响正常血浆酶含量的自身因素和生物学因素，前者主要有细胞内外酶浓度的差异、酶的相对分子量、酶的组织分布、酶在细胞内的定位和存在形式、酶的半寿期等；后者主要是性别、年龄、食与药物、运动、妊娠与分娩、体位改变、昼夜变化及家庭因素等。3．血浆酶的病理性变化主要包括酶合成异常、酶释放增加、酶清除异常等。酶合成异常包括合成减少和合成增多。酶从病变（或损伤）细胞中释放增加是疾病时大多数血清酶增高的主要机制。炎症、缺血、坏死、创伤和肿瘤等是细胞释放大分子酶蛋白的重要原因。此外，血液含抑制物、代谢紊乱、药物、遗传性酶缺陷等原因也可致酶活性下降。4．酶浓度测定方法分为绝对定量法和相对定量法两大类。绝对定量法是直接测定酶蛋白量或酶摩尔浓度。相对定量法是根据酶的催化活性或酶促反应速度来间接测定酶浓度的方法。目前临床上所用的方法多属相对定量法。5．在酶活性测定时，如果底物或产物不能直接测定或难于准确测定，可采用酶偶联法测定，即在反应体系中加入一个或几个工具酶，将待测酶生成的某一产物转化为新的可直接测定的产物，当加入酶的反应速度与待测酶反应速度达到平衡时，指示酶的反应速度即代表待测酶的活性。6．临床同工酶的分析方法有电泳法、免疫分析法、色谱法、动力学分析法、蛋白酶水解法。7．体液中酶浓度测定时，要控制的主要影响因素包括标本及标本采集和处理因素、试剂及方法学因素、仪器及操作因素，以及最适测定条件选择与条件的优化。8．测定酶浓度的样本来自不同的组织和器官，但以血清和血浆最为常用，特别是血清，既可避免抗凝剂的影响，又可防止抗凝时因振摇所致的溶血。临床酶学测定之前，标本的采集、处理与贮存应注意：防止溶血、合理使用抗凝剂、适宜的温度、减少副反应干扰。此外，采集各种体液样本的器皿质地和洁净度，采血部位，以及血清中过量的胆红素、脂质，样品制备过程中的振摇等，均影响酶活性测定。9．用自动生物化学分析仪测定酶活性，通常采用公式进行计算。当条件固定时，理论K值为常数。由于仪器等诸多因素的影响，在临床实际工作中，均需用校准物定期检查和校正实际测定K值。10．转氨酶的测定方法有许多种，以往多用比色法如赖氏法（Reitman-Frankel）、金氏法（King）和改良穆氏法（Mohun），其中以赖氏法最常用，由于此法操作简便、经济，一些小型实验室仍在使用。目前，国内外实验室多采用IFCC推荐的连续监测方法对ALT进行测定。ALT主要用于肝脏疾病的诊断。由于肝细胞中ALT浓度比血液高约7000倍，只要有1/1000肝细胞中的ALT进入血液就足以使血中ALT升高1倍，故此酶是反映肝损伤的一个很灵敏指标。但应特别注意的是，重症肝炎时由于大量肝细胞坏死，血中ALT可仅轻度增高，临终时常明显下降，但胆红素却进行性升高，出现所谓“酶胆分离”现象，常是肝坏死的前兆。11．CK的测定方法有比色法、紫外分光光度法和荧光法等。由于以磷酸肌酸为底物的逆向反应速度为正向反应速度的6倍，所以采用逆向反应进行测定较为普及。如肌酸显色法和酶偶联法，其中后者最常用，为国内外测定CK的参考方法。CK同工酶多用电泳和免疫抑制法测定，但两法均会受溶血和巨CK的干扰，免疫抑制法还会受到CK-BB的干扰。因此现在推荐用免疫化学方法直接测定CK-MBmass，可不受溶血和巨CK的干扰。CK同工酶亚型（CK-MM亚型和CK-MB亚型）多用琼脂糖凝胶高压电泳和等电聚焦电泳等。CK及其同工酶和亚型是目前临床上测定次数最多的酶，主要用于心肌、骨骼肌和脑疾患的诊断和鉴别诊断及预后判断。12．ACP的测定多是利用磷酸苯二钠法和磷酸对硝基酚法等在酸性条件下测定ACP。国外多推荐使用磷酸百里酚酞为底物的比色法，因为前列腺ACP对此底物亲合力高，测定结果基本能反映ACP含量高低。不同方法参考值也不同。此外还可通过用L-酒石酸这类抑制剂鉴别和估量PAP活性。由于ACP不稳定，酶活性测定困难，目前已发展一些免疫学方法特异而灵敏地测定ACP特别是PAP。总ACP升高可作为前列腺癌、骨疾病或网状内皮系统疾病的诊断指标。13．临床上测定血液AMY主要用于诊断急性胰腺炎，常在腹痛后2～3h开始升高（也有延至12h后升高者），多在12～24h达峰值，2～5d恢复正常。峰值一般为4ULN～6ULN，最高可达40倍。此值愈高，急性胰腺炎的可能性就愈大，但高低和疾病预后关系不大，但若持续性升高达数周，常提示胰腺炎有反复，或有并发症发生。尿AMY约于发病后12～24h开始升高，下降也比血液AMY慢，因此在急性胰腺炎后期测定尿AMY更有价值。唾液腺疾病如腮腺炎患者血AMY也可升高，但临床表现迥异，且主要为S-AMY升高，有别于胰腺炎以P-AMY升高为主。第三章血浆蛋白质与含氮化合物的生物化学检验参考答案一、单选题1E2B3C4E5D6A7B8A9D10A11C12D13B14D15A16B17E18C19C20E二、B型题（配伍题）1A2E3D4A5E6C7B8C9E10B三、多选题1ABCD2AC3ABCE4ABCD5ACD6ABDE7ACDE8BDE9ABCD10ABDE11BDE12ABCDE13BCD14ABC15ABCDE16ABCDE17ACDE18ABC19ABCDE20ABE四、名词解释1．血浆蛋白质它是指血浆和组织液中蛋白质，是血浆固体成份中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化合物。2．急性时相反应蛋白在急性炎症性疾病如手术、创伤、心肌梗死、感染、肿瘤等，AAT、AAG、Hp、Cp、CRP，以及α1-抗糜蛋白酶、血红素结合蛋白、C4、C3、纤维蛋白原等，这些血浆蛋白浓度显著升高或升高；而血浆PA、ALB、TRF则出现相应的低下。这些血浆蛋白质统称为急性时相反应蛋白，这种现象称为急性时相反应。3．氨基酸代谢库食物蛋白质经过消化而被吸收的氨基酸（外源性氨基酸）与体内组织蛋白质降解产生的氨基酸（内源性氨基酸）混在一起，分布在体内各处，参与代谢，称为氨基酸代谢库。4．氨基酸血症与氨基酸尿症参与氨基酸代谢的酶缺乏出现在代谢途径的起点时，其作用的氨基酸将在血循环中增加，成为氨基酸血症。这种氨基酸如从尿中排出，则称为氨基酸尿症。5．PKU即苯丙酮酸尿症，是由于苯丙氨酸羟化酶先天性缺乏所致，属常染色体隐性遗传，因患儿尿液中排出大量苯丙酮酸等代谢产物而得名。6．痛风痛风是一组疾病，由遗传性和（或）获得性的尿酸排泄减少和（或）嘌呤代谢障碍，导致高尿酸血症及尿酸盐结晶形成和沉积，从而引起特征性急性关节炎、痛风石、间质性肾炎，严重者呈关节畸形及功能障碍；常伴尿酸性尿路结石。仅有高尿酸血症，即使合并尿酸性结石也不称之为痛风。五、问答题1．简述血浆蛋白质的功能。血浆蛋白质具有多方面的功能，可概括为：①维持血浆胶体渗透压，这是清蛋白的主要功能；②作为激素、维生素、脂类、代谢产物、离子、药物等的载体；③作为pH缓冲系统的一部分；④营养作用，修补组织蛋白；⑤抑制组织蛋白酶；⑥一些酶在血浆中起催化作用；⑦参与凝血与纤维蛋白溶解；⑧作为免疫球蛋白与补体等免疫分子，组成体液免疫防御系统。2．试述测定血清铜蓝蛋白的方法及参考值和临床意义。铜蓝蛋白在血清中含量铰低。一般采用免疫透射比浊法测定，参考值为0.21~0.53g/L。另外，还可采用醋酸纤维薄膜电泳法测定，其参考值为0.4g/L。增高：见于结核、矽肺、甲状腺功能亢进、恶性肿瘤(白血病等)、妊娠