搜索
分析系统对活化部分凝血活酶时间测定结果的影响李雪莲江苏省连云港市第四人民医院检验科，江苏连云港222000摘要：目的探讨不同检测系统对活化部分凝血活酶时间（APTT）检测结果的影响。方法用鞣花酸和白陶土两种活化剂作为试剂分别在LG-PABER-1型血凝分析仪和SysmexCA-500全自动血凝分析仪两种血凝仪上进行检测APTT。结果①在LG血凝仪上对41例标本进行APTT测定结果显示，白陶土测得结果大于鞣花酸测得结果（P0.05）。②以鞣花酸为活化剂对41例标本进行APTT测定结果显示，LG血凝仪上测得结果大于Sysmex血凝仪的分析结果（P0.05）。③在LG和Sysmex血凝仪上运用各自配套试剂对43例标本进行APTT测定结果显示，LG血凝仪上测得结果大于Sysmex血凝仪的分析结果（P0.05）。④在LG和Sysmex血凝仪上运用各自配套试剂（放置不同时间试剂的混合试剂）对42例标本进行APTT测定结果显示，各仪器混合2试剂与混合1试剂两组数据间存在统计学差异（P0.05）。结论不同检测系统对APTT检测结果存在影响；不同仪器，不同试剂及不同试剂在不同仪器上检测APTT结果存在差异。建议不同的实验室应根据自己的活化剂和仪器建立自己的参考范围。关键词：分析体系；活化部分凝血活酶时间；活化剂；影响因素EffectsofDifferentAnalysisSystemsonActivatedPartialThromboplastinTime(APTT)TestLIXue-lian(DepartmentofClinicalLaboratory,theFourthPeople’sHospitalofLianyungang,JiangsuLianyungang,222000,China)Abstract:ObjectiveToinvestigatetheinfluenceofdifferentanalysissystemsonactivatedpartialthromboplastintime（APTT）test．MethodsTheAPTTlevelofplasmawasdeterminedbyellagicacidandkaolininbloodclottinganalyzersbetweenLG-PABER-1analyzerandSysmexCA-500analyzer.Results①TheAPTTlevelsof41casesspecimenweretestedbyellagicacidandkaolininLG-PABER-1bloodclottinganalyzer．Resultofkaolingroupwasmuchhigherthanresultofellagicacidgroup(P0.05)．②TheAPTTlevelsof41casesspecimenweretestedbythesameellagicacidwiththesamecalciumchlorideinLGbloodclottinganalyzerandSysmexanalyzer．LGanalyzer’sresultwasmuchhigherthanSysmexanalyzer’s(P0.05)．③TheAPTTlevelsof43casesspecimenweretestedbyeveryanalyzer’sreagentinLGbloodclottinganalyzerandSysmexanalyzer．LGanalyzer’sresultwasmuchhigherthanSysmexanalyzer’s(P0.05)．④TheAPTTlevelsof42casesspecimenweretestedbyeveryanalyzer’sreagentthatwasamixliquid,wasuseddifferenttimeinLGbloodclottinganalyzerandSysmexanalyzer．Theresultwasthattherewasmarkeddifferencebetweenmix2reagentandmix1reagentinLGanalyzerandSysmexanalyzereachother(P0.05)．ConclusionsTheAPTTlevelwasdifferentwhenindifferentialbloodclottinganalyzer，whenbydifferentialactivator．Referencerangemustbeenestablishedhimselfbydifferentialanalyzerandactivatorindifferentiallaboratory．Keywords：analysissystem;activatedpartialthromboplastintime（APTT）；activator；influencingfactor临床实验室检测活化部分凝血活酶时间（APTT）作为评价凝血功能的一项重要指标，APTT也是术前检查的重要指标之一。它是一项反映内源性凝血因子缺乏的主要指标。其反映凝血因子（Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ）、共同途径中凝血酶原、纤维蛋白原和因子Ⅴ、Ⅹ的水平[1]。目前APTT检测试剂盒已普遍使用，且方法成熟。检测方法多已仪器化，可运用半自动和全自动血凝分析仪进行检测。然而由仪器和试剂组成的不同检测体系对APTT检测结果有何影响，又有何关系？笔者对此进行了探讨，现将研究的结果介绍如下。1材料与方法1.1材料1.1.1样本的采集与处理：选取临床作凝血功能检测的无黄疸、无溶血、无脂血标本。标本为静脉血置于含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸钠抗凝剂（1份抗凝剂+9份全血）的硅化玻璃真空采血管中，轻轻颠倒混匀，3000rpm离心15min，收集上层液（黄色血浆）备用。1.1.2主要仪器与试剂：仪器1为LG-PABER-1型血凝分析仪（北京世帝科学仪器公司），配套试剂为上海太阳生物技术有限公司提供，活化剂为白陶土，批号为311023。仪器2为SysmexCA-500全自动血凝分析仪（希森美康上海公司），配套试剂为上海太阳生物技术有限公司提供，活化剂为鞣花酸，批号为892019。1.2方法1.2.1在LG-PABER-1血凝仪上分别运用鞣花酸和白陶土为活化剂对41例临床标本进行APTT测定。1.2.2在LG-PABER-1和SysmexCA-500血凝仪上运用鞣花酸为活化剂对41例临床标本进行APTT测定。1.2.3在LG-PABER-1和SysmexCA-500血凝仪上运用各自配套试剂对43例临床标本进行APTT测定。1.2.4在LG-PABER-1和SysmexCA-500血凝仪上运用各自配套试剂（放置不同时间试剂的混合试剂）对42例临床标本进行APTT测定。1.3统计学方法计量资料以均数±标准差（±s）表示，所有数据由Excel行基本运算，导入Stata9.2统计软件包，组间均数比较运用t检验进行分析，结果以P0.05为有统计学差异。2结果2.1在LG-PABER-1血凝仪上分别运用鞣花酸和白陶土为活化剂对41例临床标本进行APTT测定结果显示，鞣花酸测得APTT为26.1±4.5秒，白陶土测得APTT为38.8±6.1秒，两组数据间存在统计学差异（P0.05），白陶土测得结果大于鞣花酸测得结果。2.2在LG-PABER-1和SysmexCA-500血凝仪上运用鞣花酸为活化剂对41例临床标本进行APTT测定结果显示，LG-PABER-1测得APTT为26.1±4.4秒，SysmexCA-500测得APTT为23.9±4.8秒，两组数据间存在统计学差异（P0.05），LG-PABER-1血凝仪上测得结果大于SysmexCA-500血凝仪的分析结果。2.3在LG-PABER-1和SysmexCA-500血凝仪上运用各自配套试剂对43例临床标本进行APTT测定结果显示，LG-PABER-1测得APTT为39.3±6.2秒，SysmexCA-500测得APTT为26.8±6.7秒，两组数据间存在统计学差异（P0.05），LG-PABER-1血凝仪上测得结果大于SysmexCA-500血凝仪的分析结果。2.4在LG-PABER-1和SysmexCA-500血凝仪上运用各自配套试剂（放置不同时间试剂的混合试剂）对42例临床标本进行APTT测定结果显示，两台血凝仪各自的混合2试剂与混合1试剂两组数据间存在统计学差异（P0.05）。详见表1。表1不同时间混合试剂在两台血凝仪上测定APTT结果（n=42,±s）仪器APTT(S)LG-PABER-1混合1混合2SysmexCA-500混合1混合232.5±6.538.3±8.625.9±5.729.4±6.9混合2与混合1两组数据比较P0.05。3讨论APTT是检测内源凝血系统诸凝血因子缺陷和相关抑制物的筛选试验，也是当前用于凝血因子、肝素抗凝治疗以及狼疮抗凝物质检测的主要手段。另外在DIC早期的诊断，术前检查等方面也有着广泛的用途。APTT检测原理是将磷脂（部分凝血活酶）和活化剂加到血浆中，经过孵育一定时间（活化时间），再加入适当浓度的钙离子，测定纤维蛋白形成的时间，即为活化部分凝血活酶时间。在APTT血凝检测过程中，结果受到多方面因素影响，不同的部分凝血活酶、不同的活化剂[2,3]和不同的活化时间[4]对各种凝血因子缺陷、对肝素和对狼疮抗凝物质的敏感性相差很大[5]。探索有效控制影响APTT实验结果因素的系列方法，使实验检验操作中可以有效控制影响，临床可获得有效可信的结果，有助于实验工作者对APTT试验进行全程质量控制和标准化操作而获得有效的实验结果；有助于临床医生对血栓前状态，血栓性疾病患者的体内血凝状态做出正确评价，有利于患者得到及时有效的诊断与治疗[5]。作者通过在同一仪器上运用不同活化剂剂对同一批标本进行检测APTT，结果发现运用鞣花酸和白陶土为活化剂测定APTT结果存在很大差异（P0.05）。白陶土时间长于鞣花酸，原因分析为白陶土不溶于水，使试剂成为混悬液，它以细小颗粒存在，可影响小铁珠在槽内的运动，摩擦力增加，阻力增大，粘度增加，振幅变小来得快，所需时间短；极小颗粒的白陶土表面积大，易激活因子Ⅺ、Ⅻ，使它与脑磷脂和Ca2+参与下，很快包绕纤维蛋白而凝固。鞣花酸溶于水，以离子形式存在，是透明的液体，该试剂用于全自动血凝仪，它的血浆凝固时间几乎不受试剂本身的影响[6]。因此，同一份标本用两种活化剂进行检测，白陶土所需时间滞后于鞣花酸若干秒。在运用鞣花酸为活化剂在不同仪器上进行APTT检测结果也存在一定的差异（0.05）。其原因为两种仪器检测原理的差异，LG-PABER-1血凝仪是利用磁感应原理的凝血检测法，即在待检样品中加入一磁性小铁珠，测试槽两侧独立的线圈交替产生电磁场，使槽内小铁珠在恒定的血浆粘度中保持恒定的摆幅运动；采用电磁式感应器，测定小铁珠的不同振荡幅度，根据检测项目不同，仪器可产生不同的磁场强度，由于是感应磁珠的相对运动，所以不受原血浆粘度的影响。当血浆凝固时，其粘稠度增加，小铁珠摆幅逐渐变小至原振幅的50%时，计算机系统根据小铁珠振幅可精确测试血浆凝固时间[7]。而Symex-CA-500血凝仪原理为按一定比例混合后的样本与试剂由于发生散射光的光强与凝集的程度有一定的关系，通过光电转换把这微小的变化转化成电信号并加以放大。以时间为X轴，光强为Y轴记下光强的变化曲线。理论上我们把光强的变化接近恒定时定义为100%，并称之为百分活动度。通过微处理器记录下这一变化曲线，与预先描绘好的标准曲线加以比较，从而换算出各个项目的数值[8]。说明利用光强度与磁珠振幅两种原理检测APTT存在差异，本文研究表明光强度检测法敏感于磁珠振幅法。不同仪器不同试剂试验结果也存在一定的差异（0.05）。试剂放置时间不同而混合试剂对结果也有影响，存在一定差异（0.05）