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专题二细胞工程——.动物细胞工程2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体一、预习目标预习动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程，了解单克隆抗体在医学实践中的应用，并说其应用实例。“二、预习内容㈠、动物细胞融合1、概念：_______或_______动物细胞结合形一个细胞的过程，也称细胞杂交。2、结果：形成___________。3、过程：两个或多个细胞PEG灭活的病毒或___________________________________。4、意义：克服了___________的不亲和性，成为研究___________、___________、肿瘤和_______________培育的重要手段。㈡、单克隆抗体1、抗体⑴产生细胞：_________________。⑵成分：__________。⑶特点：从__________中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。2、单克隆抗体的制备(1)过程⑵杂交瘤细胞的特点：____________________、____________________。⑶单克隆抗体的优点：____________、____________、____________。㈢、单克隆抗体的应用1、作为诊断试剂，具有__________、__________、__________、__________的优点。2、用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗_______、可制成___________。三、提出疑惑同学们，通过你的自主学习，你还有哪些疑惑，请把它填在下面的表格中疑惑点疑惑内容给小鼠注射特定的抗原蛋白培养骨髓瘤细胞→从________中分离B淋巴细胞→骨髓瘤细胞灭活病毒融合未融合细胞____________________选择培养基_____________克隆检测小鼠体内培养体外培养→__________抗体课内探究学案一、学习目标1、掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。2、简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。3、了解单克隆抗体在医学实践中的应用，并说其应用实例。学习重难点：单克隆抗体的制备二、学习过程(一)动物细胞的融合探究一：动物细胞的融合1、植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别（学生填下表）植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞膜的流动性融合过程先使细胞分散开诱导方法电激、振动、离心、聚乙二醇结果应用培育植物新品种意义相同点原生质体融合原理相同；原生质体融合的方法相似2植物体细胞杂交和动物细胞融合的主要区别是什么？3、为什么可以使用灭活的病毒促进动物细胞融合？4、不灭活的病毒能作为诱导剂吗？知识阅读：阅读课本P52中的小字，了解一下动物细胞融合技术的发展简史。（二）单克隆抗体探究二：单克隆抗体制备的原理1、传统的抗体生产方法及缺陷是什么？抗体是从何来的？2、B淋巴细胞有什么特点？3、若要想获得大量的单一抗体，如何做呢？4、在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的，那么，怎样解决这一问题的呢？5、小结以下内容：◆利用____________________产生特异性抗体的功能。◆利用____________________无限增殖的特性。◆利用____________________技术将两种细胞融合获得杂交瘤细胞。◆利用____________________技术大量培养杂交瘤细胞。探究三：单克隆抗体制备的过程1、如何获得B淋巴细胞？2、如果把B淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在一起时，会有几种融合方式（类型）？3、选择杂交瘤细胞的两步筛选的目的各是什么？4、如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？（教师讲解为主）融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞就是杂交瘤细胞，但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔不超过一个细胞，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，那么上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行3～4次，直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。探究四：单克隆抗体的应用1、单克隆抗体的应用有哪些？2、生物导弹的组成及优点（三）反思总结(四)当堂检测1、基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞()A．AAaaB．AaBbC．AabbD．BBbb2、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是()①诱导融合的方法完全相同②所用的技术手段不相同③所采用的原理完全相同④都能形成杂种细胞A.①②B.①③C.②④D.③④3、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是()A、可以制成诊断盒．用于疾病的珍断B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C、可以利用基因工程技术生产D、可以在生物体内生产，不能体外生产4、“生物导弹”是指()A、单克隆抗体B、带有特定药物的单克隆抗体C、杂交细胞D、B淋巴细胞