化学消毒剂作用机理抗生素抗菌四条途径破坏微生物细胞蛋白结构有机酸、碱、醇、酚类消毒剂阻碍细菌菌体蛋白的合成、抑制或杀灭细菌改变微生物细胞膜的通透性有机溶剂、表面活性剂类消毒剂改变细胞膜的通透性,抑制细菌细胞代谢破坏微生物细胞核酸结构苯胺类燃料(结晶紫、煌绿、孔雀绿)改变核酸结构,干扰核酸代谢而抑菌或杀菌破坏微生物的酶系统重金属盐类、氧化剂、烷化剂通过干扰细菌细胞壁黏肽成分的合成,从而抑制细菌生长繁殖外毒素内毒素化学性质蛋白质脂多糖来源某些G+分泌G-细胞壁成分耐热性通常不耐热极为耐热毒性强度强(往往致死)对宿主不致热弱(很少致死)常致宿主发热能否产生类毒素能用甲醛处理不能不能被甲醛处理成为类毒素革兰染色法步骤①结晶紫初染②碘液媒染③95%乙醇脱色④沙黄复染原理G+肽聚糖含量高,交联度大,当乙醇脱色时,肽聚糖因脱水孔径缩小,故结晶紫—碘复合物被阻留在细胞内,细胞仍呈紫色。G-肽聚层薄,交联松散,乙醇脱色,不能使其结构收缩,因其含脂量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,酒精将细胞脱色,细胞无色,沙黄复染后呈黄色。PSE肉DFD肉PalesoftexudativemuscleDeepfirmdrymuscle苍白、柔软、渗水的猪肉深色,质硬干燥的猪肉热力灭菌干热灭菌法A.焚烧法→耐热器皿、动物尸体、各种污染废弃物B.烧灼法→生物实验中的接种环、试管口、玻璃管口一些外科金属器械C.烘烤法→高温下不损坏、不变质不蒸发物品玻璃器皿、陶瓷器皿、金属制品湿热灭菌法A.煮沸消毒法→饮水,外科手术器械若在水中加入1%NaCO3或2%~5%石碳酸,可增加杀菌力加速芽孢的死亡防止金属器械生锈B.流通蒸汽灭菌法→易被高压灭菌破坏的物品的灭菌GF动物SPF动物英文名GermfreeanimalsSpecificpathogenfreeanimals中文名无菌动物无特定病原体动物定义是指正常的健康胎儿用无菌手术取出后,立即饲养在无任何微生物的环境中的动物是指不存在某些特定病原微生物和寄生虫的动物用途供作研究免疫、肿瘤、消化道微生物与动物营养的关系等之用广泛用于生产和科学研究之中科赫法则:A.特殊的病原菌应在同一疾病中查见,在健康者不存在。B.此病原菌能被分离培养而得到纯种C.此纯种培养物接种易感动物能导致同样病症D.自实验感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培养。C.巴氏灭菌法①低温巴氏灭菌法(63℃~65℃30分)②高温巴氏灭菌法(71℃~72℃15秒)③超高温巴氏灭菌法(132℃1~2秒)然后都要迅速降到10℃以下D.高压蒸汽灭菌法IgGIgA1.为单体Ig,存在于血浆中分泌性IgA2.出现稍迟,但含量最高,维持时间长1.由J链连接的二聚体和分泌成分组成3.在人和兔,IgG可通过胎盘2.由黏膜固有层的将细胞合成和分泌4.有抗细菌、抗病毒、抗外毒素等作用3.主要存在于胃肠道和支气管分泌液、初乳、唾液、泪液5.可与K细胞、巨噬细胞等结合4.是参与黏膜免疫的主要抗体(在局部感染中发挥重要作用)6.参与ⅡⅢ变态反应和自身免疫性疾病血清型IgA主要以单体形式存在于血液中IgMIgE1.由5个Ig单体组成,成为巨球蛋白1.为单体Ig,是血清中含量最少的Ig2.是体内最先产生的抗体,但维持时间短2.IgE的FC片段可与肥大细胞,嗜碱性粒细胞结合,引起I超敏反应3.在早期免疫防御中具有重要作用3.可增强抗体抗寄生虫和抗肿瘤作用4.主要存在于血液中,是一种高效能抗体(杀菌、溶菌、溶血、促进吞噬作用比IgG高)IgD5.参与ⅡⅢ变态反应和自身免疫性疾病为单体Ig,仅发现于人,其他动物未证实鞭毛芽孢湿热灭菌法优于干热灭菌法的原因:P74A.蛋白质在含有水分的环境中遇热,容易变性凝固。湿热灭菌时菌体蛋白质吸收水分,加速菌体蛋白的变性凝固,菌体死亡加快B.湿热传导快、穿透力强,可使灭菌物体内部温度加速上升C.湿热携带有较高的潜热影响热力灭菌的因素A.微生物的种类和数量B.温度与作用时间C.介质的性质D.PH值变态反应Ⅰ型变态反应过敏反应Ⅲ型变态反应免疫复合物型变态反应Ⅱ型变态反应细胞毒型变态反应Ⅳ型变态反应迟发型变态反应1.特殊鞭毛染色,光学显微镜下观察2.电子显微镜观察3.半固体穿刺培养有动力→有鞭毛无运动→无鞭毛4.功能①细菌运动器官②鞭毛有抗原性③与致病性有关1G+在一定环境条件下,菌体内部形成折光性强,不易着色。圆形或卵圆形休眠体结构2未形成芽孢,可繁殖叫繁殖体3芽孢形成后,细菌失去繁殖能力4一个细菌只形成一个芽孢5分类:中央芽孢、偏端芽孢、末端芽孢荚膜1大多菌多糖,少数菌多肽,极少数菌二者均有2作用:①抗吞噬作用②抗有害物质损伤作用③营养贮存场所菌毛1菌毛蛋白具有抗原性2与细菌运动有关3光镜下看不到,必须用电镜观察4分类:普通菌毛、性菌毛凝集实验平板凝集实验实验器材:(1)布氏杆菌平板凝集抗原及阳性血清(2)待检血清(3)生理盐水、毛细吸管、载玻片实验步骤:(1)取洁净玻片一张,用记号笔划分为3格(2)分别在每格中滴加一滴布氏杆菌平板凝集抗原(3)第一格滴加一滴布氏杆菌阳性血清第二格滴加待检血清第三格滴加生理盐水火柴棒混匀,静置2~3min后观察结果结果判定:1st格出现颗粒状或片状凝集物3rd格无凝集物2nd格根据凝集物形成情况判定++++出现大的凝集块,液体完全+++有明显凝集块,液体几乎完全透明(75%凝集)++可见凝集片,液体不慎透明(50%凝集)+液体浑浊,有小的颗粒状物(25%凝集)-液体均匀,浑浊无凝集物沉淀试验实验器材:(1)优质琼脂粉(2)传染性法氏囊诊断血清,阳性抗原(3)传染性法氏囊待测抗原(取疑似传染性法氏囊病鸡的法氏囊组织匀浆后(4)制成组织悬液为待测抗原)(5)PH为7.4生理盐水(禽类血清用8%盐水)(6)培养皿、打孔器(直径4~6mm孔径)、酒精灯、恒温箱实验原理”(1)可溶性抗原(如细菌的外毒素、内毒素、菌体裂解液,病毒、组织浸出液等)与相应的抗体结合,在适量电解质存在下,经过一定时间形成肉眼可见的沉淀物成为沉淀反应(2)琼扩试验原理琼脂在高温时能溶于水,冷却后凝胶的孔径约为85nm,因此可允许各种抗原、抗体在琼脂凝胶中自由扩散(3)抗原抗体在琼脂凝胶中扩散,由近及远形成浓度梯度,当抗原抗体比例适当时相遇,即会发生结合反应,形成肉眼可见的沉淀线实验步骤:(1)制板优质琼脂加入生理盐水煮沸完全溶解注入平皿(厚度2~3mm),冷却后备用(2)打孔琼脂凝胶板上打梅花孔(中央孔径4mm,外周孔径3mm,孔间距3mm),用针头将孔内琼脂挑出(3)封底将打好孔的平皿在酒精灯上通过数次,使孔细菌生化试验(糖发酵试验)实验器材:(1)培养基:糖发酵管培养基(2)菌种:大肠杆菌、沙门杆菌、斜面培养基(3)其他实验原理:(1)细菌具有分解某些糖的特定酶不同细菌酶的种类、特点不同分解糖的结果不同有的产酸产气有的产酸不产气无分解能力者则无这些产物这些结果可通过A培养基中指示剂颜色变化B.发酵管内是否产生气泡来判断实验步骤:(1)将大肠杆菌、沙门杆菌分别穿刺接种于:葡萄糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、发酵管培养基内(2)标记菌种及发酵管名称(3)置37℃恒温培养24h观察结果实验结果细菌的分离培养(平板划线分离法)实验器材恒温培养箱、接种环、火柴、酒精灯、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌混合菌液琼脂平板实验步骤首先将各种固体培养基融化后制成平板,并用记号笔标明培养基名称。然后在无菌条件下划线:(1)左手持皿左手拇指、食指、中指将皿盖揭开20°左右(方便划线为准)(2)右手持接种环无菌操作取少许菌涂于培养基边缘然后将接种环上多余菌在火焰中烧毁待接种环冷却后再涂菌的地方轻轻接触,开始划线(3)划线前先将接种环轻轻弯曲(这样易和平皿内琼脂平行,不致划破培养基)(4)划线中不宜过多重复旧线,以免形成菌苔药物敏感试验(纸片法)实验材料(1)大肠杆菌肉汤培养物1管(实验用菌种)(2)灭菌棉签1包(3)各种药敏片,含各种抗生素的市售产品(4)培养基平板:普通牛肉膏蛋白胨固体培养基实验步骤:(1)无菌棉拭子蘸少量待测菌液,均匀涂布平板,待稍干后用无菌镊子将各种药敏片分别贴在平板培养基表面(平板4~6个,相互间应有一定距离15mm)(2)置37℃培养18~24h观察结果结果判定正常菌群与菌群失调正常菌群概念正常动物和人的体内及体表常有一类微生物或微生物群存在,但不引起致病现象,这一类微生物就是正常菌群(又称固有菌群)正常菌群生理作用1.拮抗作用2.营养作用3.合成维生素4.免疫作用菌群失调概念指正常微生物之间及正常微生物之间宿主之间的微生态平衡,在外环境影响下,又生理性组合变成病理性组合的状态菌群失调原因1.抗菌药物2.宿主患病3.环境改变4.外科手术影响拓展菌群平衡:正常情况下,正常菌群与宿主、环境间处于协调共处状态,维持着一定的生态平衡,对动物是有利的。动物微生态制剂:是指利用动物体内正常微生物成员或促进物质经特殊加工工艺而制成的活菌制剂。(具有补充、调整或维持动物肠道内微生态平衡,达到防治疾病、促进健康或增重(产)的目的)