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安徽医科大学第一附属医院检验科作业指导书文件编号:AYL-S7-328版本:3.0页码:第1页共4页编写者：沈继录审核者：批准人：生效日期：2012.1.1文件发放范围：微生物组文件年度审核审核者：审核者：审核者：审核者：日期：日期：日期：日期：志贺菌属检验标准操作规程1．概述志贺菌属分为4个群（种）：A群为痢疾志贺菌，B群为福氏志贺菌，C群为鲍氏志贺菌，D群为宋内志贺菌。2.标本类型粪便、肛拭子标本。3.鉴定3.1形态与染色革兰阴性杆菌。3.2培养特性在麦康凯琼脂平板上35℃培养18～24小时，形成无色透明的小菌落。在SS琼脂平板上呈无色透明或半透明的较小菌落。3.3生化反应氧化酶试验阴性，发酵葡萄糖、甘露醇，不发酵乳糖、蔗糖，三糖铁琼脂（TSI）为K/A，甲基红和硝酸盐还原试验阳性，动力、VP、枸橼酸盐、脲酶、H2S和醋酸盐试验均阴性。3.4鉴别要点3.4.1本菌属特征在SS平板上无色透明或半透明的小菌落，TSI为K/A，发酵葡萄糖，不发酵乳糖，无动力，脲酶、H2S试验均阴性。符合上述特征者，可通过血清凝集试验作出诊断。如血清不凝集，应进一步鉴别。3.4.2志贺菌属种间鉴别见表1表1志贺菌属种间鉴别的关键性试验（阳性%）菌名半乳糖苷酶鸟氨酸甘露醇乳糖福氏志贺菌10951痢疾志贺菌30000鲍氏志贺菌102971宋内志贺菌9098992*注：*为迟发反应。安徽医科大学第一附属医院检验科作业指导书文件编号:AYL-S7-328版本:3.0页码:第2页共4页3.5操作步骤3.5.1观察菌落特征，挑取可疑菌落，做TSI试验。参见《三糖铁试验标准操作规程》。3.5.2血清学鉴定参见《志贺菌血清学检测标准操作规程》。3.5.3鉴定从SS琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。4.药敏参见《药物敏感性试验标准操作规程》。5.质量控制参见《质量管理程序》。6.检验结果解释与分析一般志贺菌不进入血液，所以只取粪便和肛拭子标本作培养。本菌大多数菌株对氯霉素、链霉素、氨苄西林耐药，多数菌株对卡那霉素、庆大霉素敏感。7.临床意义志贺菌属引起细菌性痢疾，表现为腹痛、发热、大量水样便，1-2日后转为少量腹泻（有里急后重现象），便中含有多量的血、黏液和白细胞。临床主要有两种类型：急性细菌性痢疾，又分典型和不典型两种，后者症状不典型，容易造成误诊和漏诊；慢性细菌性痢疾，常因急性菌痢治疗不彻底，造成反复发作、迁延不愈，病程超过2个月以上视为慢性菌痢。8.鉴定流程分离培养（SS、MAC）初步鉴定：TSI，KIA/MIU菌落观察：SS平板上呈无色透明或半透明较小菌落血清鉴定粪便、尿、残余食物增菌培养（GN肉汤）志贺菌属仪器或手工细菌鉴定安徽医科大学第一附属医院检验科作业指导书文件编号:AYL-S7-328版本:3.0页码:第3页共4页参考文献[1]中国合格评定国家认可委员会.CNAS-GL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南.2008[2]周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海：上海科学技术出版社，2007[3]叶应妩，王毓三，申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006[4]MurrayPR.ManualofCinicalMicrobilogy.9thed.Washington:ASMPress,2007[5]ISO15189：2007医学实验室-质量和能力认可准则.2007安徽医科大学第一附属医院检验科作业指导书文件编号:AYL-S7-328版本:3.0页码:第4页共4页文件更改记录修改后版本更改概述批准人生效日期3.0增加“文件更改记录”2012.1.1