粪便微生物学检验的标准操作程序

第三人民检验科微生物室作业指导书文件编号：WSW-SOP-07版本/修订号：第一版主题内容葡萄球菌属常规鉴定标准操作程序生效日期：20140701第1页共3页粪便微生物学检验的标准操作程序1检验目的做疾病的病原学诊断，查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系，指导临床治疗及预后和流行病学的调查。2原理正常人的肠道中栖居大量的不同种类的微生物，组成了微生态菌膜屏障。起着健康的作用，腹泻是因为病原细菌或病毒在肠道内繁殖的结果。3标本要求（1）标本类型：粪便。（2）标本采集：见标本采集手册（3）标本储存和运输：室温放置，室温运输并立即送检。（4）标本拒收状态：非无菌方式采集的标本或未按要求部位采取的标本。4容器和添加剂类型均使用灭菌器皿盛放标本5试剂（1）试剂名称：革兰氏染液、氧化酶试剂、3%触酶、血平板、中国蓝平板、SS平板、柯玛嘉平板、相关生化试剂等。6仪器设备：（1）接种针、接种环、酒精灯（2）梅里埃ATB药敏鉴定仪（3）显微镜、SPX-150B型生化培养箱、超净工作台、台式离心机、天平7校准程序(送市计量质量检测研究所校准)8标本的处理第三人民检验科微生物室作业指导书文件编号：WSW-SOP-07版本/修订号：第一版主题内容葡萄球菌属常规鉴定标准操作程序生效日期：20140701第2页共3页8.1沙门-志贺菌：取粪便少许，增菌后转种或将粪便直接接种SS及中国蓝或麦康凯、伊红美蓝平板，35℃、18-24h后进行鉴定。沙门氏菌增菌37℃,16-24h，转钟在平板上，增菌液：粪便等于10:1。志贺菌增菌37℃,4-6h，转种在平板上。注：伤寒病人在发病1—2周采取血液，发病2—3周采取粪便和尿液。8.2霍乱弧菌培养：标本接种于碱性蛋白胨水中，进行增菌，增菌培养孵育6—8h后，取表面菌膜移种于碱性琼脂平板/庆大霉素一亚碲酸钾平板上。8.3真菌培养：将标本接种于含氯霉素的沙氏琼脂及血琼脂平板上，置25-35℃和35℃孵育24—48h，来鉴定。9操作流程粪便或肛门试子分离培养增菌培养麦康凯或中国蓝亚硒酸增菌培养基GN增菌培养基（适用于沙门菌属）（适于志贺菌属）SS琼脂SS及麦康凯琼脂平板分离三糖或双糖铁培养基血清鉴定生化反应鉴定药物敏感性试验报告10质量控制：参加我科质量管理小组组织的各项质量控制活动第三人民检验科微生物室作业指导书文件编号：WSW-SOP-07版本/修订号：第一版主题内容葡萄球菌属常规鉴定标准操作程序生效日期：20140701第3页共3页11患者检验结果的可报告区间阴性：（1）.“未检出沙门菌属和志贺菌属”（2）.“未检出霍乱弧菌”阳性：根据细菌鉴定结果报告。