一氧化氮供体对肺癌的作用一、立题依据与研究意义一氧化氮(nitricoxide,NO)是由一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)催化L-精氨酸脱胍基而生成,是近年来才发现的生物活性物质,参与机体的许多重要生理过程,且NO与消化系统的疾病(如肿瘤)日益受到关注。已知,活化的巨噬细胞有杀伤肿瘤细胞的作用越来越多的证据表明,NO是活化的巨噬细胞杀伤肿瘤细胞时产生的毒性效应因子之一。Hibbs首先发现,活化巨噬细胞产生的NO具有抑制生长和细胞毒性作用,能抑制与巨噬细胞共同培养的肿瘤细胞的许多代谢活动,如线粒体呼吸、DNA复制等,导致瘤细胞内铁元素大量丧失,细胞死亡。本实验的研究可有效控制肺癌的生长和转移。二、实验方案(一)实验设计的目标:专家已证明一氧化氮对癌细胞有抑制作用,通过本实验可以进一步验证这一现象,并扩大了肺癌的治疗途径。(二)实验设计:实验对象:小鼠实验原理:硝酸酯类,此类药称为NO供体。该机制产生的NO称外源性NO,常用药物有硝酸甘油、硝酸异山犁酯,此类药物需经细胞代谢才能生成NO,连续使用数小时,或数天可出现耐受现象。活化巨噬细胞产生的NO具有抑制生长和细胞毒性作用,能抑制与巨噬细胞共同培养的肿瘤细胞的许多代谢活动,如线粒体呼吸、DNA复制等,导致瘤细胞内铁元素大量丧失,细胞死亡。实验步骤:1、挑选四只体型相似、健康状态良好的雄鼠标号ABCD。2、并分别在他们皮下接种Lewis肺癌细胞,使他们患上肺癌。3、A鼠用生理盐水(对照组)灌胃、BCD鼠分别用硝酸甘油处理高浓度组、硝酸甘油处理中浓度组、硝酸甘油处理低浓度组,处理组以不同浓度硝酸甘油溶液(1.6,0.5,016g/L)灌胃0.4mL/(只·d)。4、连续10d,于21d处死,对血中硝酸盐含量和生化指标以及各主要脏器重量进行测定,并观察原位瘤质量和肺转移情况结果。三、可行性分析1、小白鼠容易得到。2、实验过程中所需药品如硝酸甘油价格便宜,易得。3、Lewis肺癌细胞可由中大医院提供。4、操作方法简单易行四、创新性分析以往的实验只研究一氧化氮大对癌细胞杀伤效果,本实验通过对硝酸甘油浓度的控制来研究其对癌细胞迁移的影响,故有一定的创新性。五、预期进展硝酸甘油作为一氧化氮供体胃肠道给药在一定剂量可以抑制肿瘤转移,同时对动物生理机能无明显影响,即一定含量的一氢化氧能够抑制肿瘤转移。六、完成实验的条件仪器设备:注射器、导管、量筒、滴管等。实验动物:4只健康雄鼠药品:Lewis肺癌细胞、硝酸甘油