高二生物选修学案班级姓名1专题2微生物的培养与应用一、高考考纲:A级要求(了解)1、了解有关培养基的基础知识,掌握无菌操作技术的有关内容。2.了解消毒和灭菌常用的方法及二者的区别。3.学会以大肠杆菌为材料进行微生物培养与分离纯化的方法。4、微生物的应用二、课题一、微生物实验室培养(一)、培养基1、成分?一般都含有(特殊):培养蓝藻的培养基的成分2、与无菌技术培养基分类:据物理状态:据化学成分:据用途分:【培养酵母菌和霉菌,可在培养基中加入青霉素或链霉素以抑制细菌的生长。】【培养基中加伊红—美蓝,鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有,菌落呈深紫色),3、【问题】1、氧气、二氧化碳一般属于培养基的成分吗?2、培养基中的有机碳源的主要作用?3、培养基中的有机氮源的主要作用?4、有机氮源一定是微生物的碳源,对吗?6.不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中,不正确的是()A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素B.碳源物质也是该微生物的能源物质C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D.水是该微生物的营养要素之一7.下列说法正确的是()A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B.培养基只有两类:液体培养基和固体培养基C.除水以外的无机物只能提供无机盐D.无机氮源不可能提供能量8.在缺乏氮源的培养基上,大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长;在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出()A.乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌B.固氮细菌、大肠杆菌、放线菌C.固氮细菌、霉菌、放线菌D.固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌9.有关培养基配置原则表述正确的是()A.任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子B.碳源和氮源必须具有一定比例,碳元素的含量最多,其次为氮元素C.微生物的生长除受营养因素影响外,还受到温度、pH、氧、渗透压等的影响D.营养物质的浓度越高越好高二生物选修学案班级姓名2(二).无菌技术1、无菌技术的内容(看书)2、消毒和灭菌的区别(各三字进行高度概括)3、实验室常用的消毒和灭菌方法(默写)(三)微生物培养的实验操作----纯化大肠杆菌1、配制培养基(1)当确定下培养的微生物种类后,配制前就需要考虑哪些问题?化学成分、营养物质的浓度和比例、pH(2)举例-----配制纯化大肠杆菌所需培养基a:配固体还是液体培养基?b:其碳源和氮源是有机物还是无机物?C:该培养基以及培养皿的灭菌方法依次?、d:倒平板过程(看书P17,讨论其问题)2、大肠杆菌纯化(理解纯化的含义:)(1)纯化方法(2)纯化过程(阅读教材)(四).菌种的保存对于频繁使用的菌种,温条件,将其保存在____________培养基上(五)例题1:下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的牛肉膏蛋白胨培养基的配方。成分牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂水用量5.0g10.0g5.0g20.0g1000mL(1)培养基的类型很多,但培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是________和________。培养基配制完成以后,一般还要调节pH并对培养基进行__________处理。(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是____________和______________两种。在接种过程中,接种针或涂布器的灭菌方法是______________。(3)假设某同学发现培养基上细菌数目过多地连成一片,可能的原因是什么?________________________________________________________________________。高二生物选修学案班级姓名3三、课题2土壤中分解尿素细菌的分离与计数【问题思考】下表为本课题使用的培养基,分析培养基配方,回答下面的问题。1、根据课题该培养基应该属于性培养基(选择、鉴定)2、看培养基平方,该培养基属于(固体、液体)培养基为什么?使用了作为3、该培养基为什么能分离出分解尿素的细菌4、该实验主要步骤A土壤取样(哪里取?)B样品的稀释(土壤中不同微生物的分离,采取的稀释度一般相同吗?C微生物的培养与观察(观察什么?为什么?)5、培养过程中培养基的PH是否有变化?如何观察出PH有变化?6、微生物的计数方法理解!7、如果某同学用上述培养基(但不加尿素)也在培养基上发现菌落产生,说明?【例题分析】在现代农业中,常在饲料中加入一定量的尿素去饲养牛等牲畜。因其有特殊的器官——瘤胃,在瘤胃中生活着多种微生物,其中许多微生物以尿素作唯一氮源。某一同学设计了如下实验,对能分解尿素的细菌进行分离和计数。1、哪里取样?2、制备分离培养基的基本要求?3、该实验同时也配制了牛肉膏蛋白胨培养基作为,那么在该培养基上菌落的数量和种类应该比分离培养基上。4、为什么每个稀释度下需要3培养基3份?________________________________________________________________________5、上述培养时,需要(有氧、无氧)条件?高二生物选修学案班级姓名4四、课题4分解纤维素的微生物的分离1、纤维素与纤维素酶纤维素由________三种元素组成,是一种糖。纤维素的基本组成单位是。人体不能直接利用纤维素作为能源物质,是因为人体的消化道内,根本原因是?2、土壤中分解纤维素的微生物,在生态系统中属于。3.纤维素酶是一种________,一般认为它至少包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三种组分。作用机理:纤维素――→C1酶+Cx酶____________――→葡萄糖苷酶________。4、纤维素分解菌的筛选(阅读教材)【习题巩固】1、大肠杆菌和圆褐固氮菌混合在一起,采用下列哪组培养基可将它们分离A.加食盐的培养基和牛肉膏蛋白胨培养基B.伊红美蓝培养基和无氮培养基C.斜面培养基和液体培养基D.加青霉素的培养基和液体培养基2.鉴别培养基是据微生物的代谢特点在培养基中加入一些物质配制而成的,这些物质是A.指示剂或化学药品B.青霉素或琼脂C.高浓度食盐D.维生素或指示剂3.产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是A.一个细菌、液体培养基B.许多细菌、液体培养基C.一个细菌、固体培养基D.许多细菌、固体培养基4.在做分离分解尿素的细菌实验时,A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因不是()A.由于土样不同B.由于培养基污染C.由于操作失误D.没设置对照5.下列有关配制培养基的叙述中,正确的是()A.制作固体培养基必须加入琼脂B.加入青霉素可得到乳酸菌C.培养自生固氮菌不需要氮源D.发酵工程一般用固体培养基6.纤维素、纤维素酶和控制纤维素酶合成的物质,它们的基本组成单位依次是()A.葡萄糖、葡萄糖和氨基酸B.葡萄糖、氨基酸和核苷酸C.氨基酸、氨基酸和核苷酸D.淀粉、蛋白质和核酸7、实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应,用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条平行线与含链霉素的带接触),将平板置于37℃条件下恒温培养3天,结果如下图所示,从实验结果看,以下关于链霉素的叙述不正确的A.它能阻止结核杆菌生长B.它对结核杆菌比对霍乱菌更有效C.它对结核杆菌比对伤寒菌更有效D.它可以用于治病伤寒病人高二生物选修学案班级姓名58.下列关于细菌的叙述,错误的是()A.硝化细菌能以NH3作为氮源和能源物质B.某些细菌可以利用光能固定CO2合成有机物C.生长因子是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质D.含伊红和美蓝试剂的培养基不能用来鉴别牛奶中的大肠杆菌二、简答题9.某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉,分别为细菌培养提供了____________和__________。除此之外,培养基还必须含有的基本成分是__________和____________。(2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是_____________________________________。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于__________中培养,培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。(4)培养20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有________种细菌。一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越________。(5)如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐______________________________细菌,这种培养基被称为__________。10.自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯,然后进行数量测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验,请回答有关问题。步骤如下:A.制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。B.为了得到更加准确的结果,你选用____________(稀释混合平板法、稀释涂布平板法)接种样品。C.适宜温度下培养。结果分析:(1)测定的大肠杆菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确可信的是()A.一个平板,统计的菌落数是23高二生物选修学案班级姓名6B.两个平板,统计的菌落数是22和26,取平均值24C.三个平板,统计的菌落数分别是21、5和52,取平均值26D.四个平板,统计的菌落数分别是21、30、24和25,取平均值25(2)一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4,那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL)________________________。(3)用这种方法测定密度,实际活菌数量要比测得的数量________,因为________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)某同学在测定大肠杆菌的密度时发现,在培养基上还有其他杂菌的菌落,能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了?为什么?________________________________________________________________________________________________________________________________________________。