[医学微生物学]球菌.

医学微生物学Medicalmicrobiology第九章球菌coccus指个体形状呈球形或椭圆形的一大类细菌。对人类有致病性的球菌。包括四个属：葡萄球菌属：G＋球菌链球菌属：G＋球菌肠球菌属：G＋球菌奈瑟菌属：G－球菌脑膜炎,淋病奈瑟菌。化脓性球菌（pyogeniccoccus）第一节葡萄球菌属（staphylococcus）圆形葡萄样排列AB广泛分布,人体正常菌群,皮肤,鼻咽部。医务人员带菌率70%,交叉感染。分类：色素,凝固酶金黄色葡萄球菌;凝固酶阳性葡萄球菌（S.aureus）致病菌。凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）白色,柠檬色。表皮葡萄球菌;腐生葡萄球菌。三种葡萄球菌鉴别的主要性状主要性状金黄色葡萄球菌表皮/腐生性葡色素金黄色白色/柠檬色血浆凝固酶＋－甘露醇发酵＋－溶血性＋－耐热核酸酶活性＋－磷壁酸核糖醇型＋－磷壁酸甘油型－＋蛋白A（SPA）＋－致病性强无或弱一、金黄色葡萄球菌（S.aureus）（一）生物学性状1.形态与染色球形,无鞭毛,无芽胞,1um。葡萄串状,革兰染色阳性（G＋）。AB2.培养特性易培养:兼性厌氧,肉汤或普通平板。混浊;菌落圆形,光滑,不透明凸起。产色素:金黄色血平板产生溶血环。金葡菌落:金黄色透明β溶血。3.生化反应多数菌分解葡萄糖,麦芽糖和蔗糖。产酸不产气。致病性球菌分解甘露醇。过氧化氢酶阳性（与链球菌鉴别）。含青霉素或溶菌酶培养基形成L型。4.抗原构造(1)葡萄球菌A蛋白：细胞壁表面蛋白质，完全抗原。(2)荚膜多糖：有利于细菌粘附(3)多糖抗原：存在于细胞壁，有群特异性。SPAcapsuleteichoicacidpeptidoglycan(1)staphylococcalproteinASPA：细胞壁表面蛋白质,完全抗原。(2)荚膜多糖：利于细菌粘附。(3)多糖抗原:群特异性。5.SPA的生物活性：SPA与IgG的FC端结合,形成免疫复合物：抗吞噬；促进细胞分裂；引起超敏反应；损伤血小板。SPA的用途：多种微生物抗原检测,肿瘤试验治疗。6.抵抗力无芽胞菌最强。耐干燥;浓汁中存活2-3个月；耐热;加热60℃1hr或80℃30’；耐盐;15%Nacl;对青,庆,红,金霉素敏感;龙胆紫超敏感。易产生耐药性,耐青率达90%。耐甲氧西林金葡菌,院内感染常见菌。耐药机制:细胞壁成分改变;质粒传播。（二）致病性与免疫性金黄色葡萄球菌毒力强,侵入机体后,在宿主体内增殖,扩散;产生侵袭性酶和毒素,引起宿主疾病。金黄色葡萄球菌的致病物质:①酶；②毒素；③细菌的表面结构蛋白。凝固酶（coagulase）概念:含抗凝剂的血浆发生凝固的酶。游离凝固酶（freecoagulas）结合凝固酶（boundcoagulase）意义:葡萄球菌致病性的重要指标。致病机理:抵抗细胞吞噬;保护病菌不受杀菌物质破坏;使感染局限化;形成血栓。纤维蛋白溶酶:葡激酶,纤维蛋白原成为蛋白酶,溶解纤维蛋白。耐热核酸酶:降解DNA和RNA,致病性指标。透明质酸酶:扩散因子,溶解细胞间质,促进致病菌扩散。脂酶:分解血浆和机体各部位表面的脂肪。触酶:分解H2O2。②毒素葡萄球菌溶素毒性休克综合征毒素-1杀白细胞素肠毒素表皮剥脱毒素③表面结构或蛋白如粘附素,荚膜,胞壁肽聚糖和SPA等。1.葡萄球菌溶素（staphylolysin）外毒素,细胞毒性,多种哺乳动物红细胞溶血;杀伤WBC,PC,肝细胞,皮肤细胞,嵌入细胞膜疏水区导致细胞溶解。2.杀白细胞素（leukocidin）靶细胞是中性粒细胞和巨噬细胞,与细胞膜受体结合,膜通透性增高,胞浆颗粒排出死亡。3.毒性休克综合征毒素-1（TSST-1）外毒素,引起发热,休克;增加对内毒素的敏感性；多器官系统功能紊乱;毒性休克综合征（TSS）。4.表皮剥脱毒素（exfoliativetoxin）表皮溶解毒素,质粒编码,皮肤弥漫性红斑,水泡,表皮大面积脱落,烫伤样综合症或剥脱性皮炎,。5.肠毒素（enterotoxin）耐热蛋白质,耐蛋白酶。食物中毒,刺激呕吐中枢,引起呕吐;气雾剂吸入可致多器官损伤,休克死亡,生物武器。肠毒素是超抗原（superantigen）,有丝分裂原作用,刺激淋巴细胞增殖,不经过递呈细胞处理;非特异激活T淋巴细胞,释放过量淋巴因子引起疾病。所致疾病化脓性感染和毒素性疾病局部感染:皮肤软组织:毛囊炎,疖,痈,伤口化脓。特点是病灶局限,浓汁粘稠,黄色。全身感染:细菌沿血流和淋巴扩散,引发败血症,脓毒血症;肝,肾,肺,脾,脑脓肿。脏器感染:肺炎,胸膜炎,中耳炎,脑膜炎,心包炎,心内膜炎。毒素性疾病外毒素引起的中毒性疾病食物中毒1-6hr,恶心,呕吐,腹泻。假膜性肠炎,菌群失调。烫伤样皮肤综合征,红斑,起皱,大庖,表皮脱落,病死率20%。毒性休克综合征TSS,突发高热,呕吐,腹泻,低血压,休克,心肾衰竭,病死率高。与艰难梭菌引起假膜性肠炎,持续腹泻。免疫性皮肤黏膜有效阻挡金葡菌感染,天然免疫力,皮肤黏膜受伤,伤口。患有慢性消耗性疾病,结核病,肿瘤,糖尿病患者易发生感染。感染后能获得一定的免疫力,不强,不持久。幼猫试验标本脓汁,血液,剩余食物,呕吐物分离培养血浆凝固酶发酵甘露醇耐热核酸酶直接涂片镜检革兰阳性葡萄球菌生长现象色素,溶血生化反应毒素检查药敏实验动物实验：对食物中毒患者（三）微生物学检查法防注意消毒隔离注意个人卫生防止医源性感染防止耐药性产生治抗菌素药敏试验自身菌苗疗法四、防治原则二、凝固酶阴性葡萄球菌Coagulasenegativestaphylococcus,CNSCNS已成为医源性感染常见重要病原菌,耐药菌株日益增多;当机体免疫功能低下或细菌进入非正常寄居部位,引发感染,各类感染中仅次于大肠埃希菌,居病原菌的第2位。泌尿系感染细菌性心内膜炎败血症术后及植入医用器械引起的感染第二节链球菌属（Streptococcus）概述1.概念G＋,排列呈双或链状排列的球菌。2.分类1)溶血现象分类接种血琼脂培养基,按溶血现象分3类:①甲(α)型溶血；②乙(β)型溶血；③丙(γ)型溶血。三种溶血现象溶血环现象名称类别致病性草绿色溶血环溶血甲型溶血性链球菌条件致病菌透明溶血环溶血乙型溶血性链球菌致病力强不产生溶血环γ溶血丙型链球菌不溶血无致病性乙型（β）溶血性链球菌2）抗原结构分类据链球菌细胞壁C多糖抗原结构不同,分为20个血清群。对人致病的菌株,90%属A群。A群根据其M抗原不同,分成100多个型。3）生化反应分类对一些不具有群特异性的链球菌（如肺炎链球菌和草绿色链球菌等）,需用生化反应,药物敏感和对氧的需要分类。对氧的需要分类分为：需氧、厌氧微需氧链球菌医学常见链球菌链球菌血清群溶血诊断要点引起常见疾病化脓性链球菌A群β溶血;杆菌肽敏感皮肤感染,咽炎,风湿热,肾炎无乳链球菌B群β溶血;杆菌肽不敏感;水解马尿酸盐新生儿败血症,脑膜炎牛链球菌D群不溶血;不耐6.5%NaCl败血症,心内膜炎肺炎链球菌---α溶血:胆盐敏感肺炎,脑膜,心内膜炎草绿色链球菌---α或不溶血:胆盐不敏感龋齿,心内膜炎一、A群（化脓性）链球菌链球菌的代表种,致病性强,对人致病的链球菌90%属A群。1.形态与染色球形或椭圆形,链状排列,G+,无芽胞,无鞭毛,有透明质酸荚膜。(一)生物学性状2.培养特性营养要求高:血平板或含血清培养基；液体培养:沉淀生长；血平板小菌落,灰白色,表面光滑,不同菌株溶血不一,多数产透明溶血环（β溶血现象）。3.生化反应分解葡萄糖,产酸不产气。不分解菊糖,不被胆汁溶解（用于鉴别甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌）。链球菌不产过氧化氢酶,与葡萄球菌鉴别。4.抗原结构分20个群,A群致病菌（溶血性链球菌或化脓性链球菌）根据蛋白抗原进一步分类M抗原荚膜细胞壁蛋白质多糖肽聚糖细胞膜细胞质1）多糖抗原（C抗原）群特异性抗原，细胞壁的多糖组分。2）表面抗原或称蛋白质抗原:壁外的菌毛样结构含M蛋白,位于C抗原外层,具型特异性,有近100种血清型。M抗原与致病性有关。3）P抗原或称核蛋白抗原:无特异性。5.抵抗力不耐热:60℃灭活；干燥尘埃中生存数月；常用消毒剂敏感;乙型链球菌对青霉素,红霉素,四环素,杆菌肽和磺胺药敏感,不产生耐药。A群链球菌有较强的侵袭力,产生多种外毒素和胞外酶。1.致病物质细胞壁成分,粘附素;外毒素;侵袭酶。（二）致病性与免疫性1)细胞壁成分(1)粘附素,包括：①脂磷壁酸LTA与细胞膜有高度亲和力,与M蛋白构成菌毛样结构,在呼吸道黏膜细胞膜黏定植。②F蛋白细胞壁成分,结合区暴露在菌体表面,是纤维粘连蛋白的受体。利于细菌定植和繁殖。脂磷壁酸(2)M蛋白（Mprotein）A群链球菌主要致病因子,抗吞噬和抗细胞内杀菌作用;与心肌和肾小球基底膜共同抗原。(3)肽聚糖A群链球菌肽聚糖有致热,溶解血小板,提高血管通透性和诱发实验性关节炎等作用。2）外毒素类(1)致热外毒素（pyrogenicexotoxin）猩红热的主要毒性物质。致热外毒素抗原性强,有超抗原作用;家兔注射致热致死。(2)链球菌溶素（streptolysin）链球菌溶素O:含SH基蛋白,氧化失活,杀伤白细胞,PC,神经细胞,巨噬细胞心肌细胞,抗原性强,产SLO抗体,≥400。链球菌溶素S:小分子糖肽,无抗原性。3）侵袭性酶（invasiveenzyme）（1）透明质酸酶:分解透明质酸,利于病菌扩散。（2）链激酶SK:激活纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶,溶解血块或阻止血浆凝固,使病菌扩散。（3）链道酶SD链球菌DNA酶,降解DNA,使脓液稀薄,促进病菌扩散。2.所致疾病A群链球菌引起的疾病约占人类链球菌感染的90%淋巴管炎,淋巴结炎,蜂窝组织炎,咽炎扁桃体炎。猩红热,毒素休克综合症(3)超敏反应性(1)化脓性感染(2)中毒性疾病风湿热急性肾小球肾炎ABAB3.免疫性产生多种抗体,对同型链球菌的再感染有免疫力,型间无交叉,易反复感染。抗M蛋白抗体有保护作用,不同型M蛋白均可诱生γ-干扰素,增强吞噬。猩红热患者可建立牢固的同型抗毒素免疫。标本:直接涂片镜检革兰阳性链球菌分离培养脓汁，血液，咽喉拭子与金葡菌的鉴别与肺炎链球菌的鉴别典型链球菌形态典型的链球菌菌落必要时做:生化反应或药敏实验等(三)微生物学检查法血清学检查SLO检测病人血清中ASO。1.病人血清1滴,SLO1滴;2.加入SLO乳胶试剂;3.病人血清ASO剩余与乳胶SLO反应,结果:效价≥400单位阳性意义:活动性风湿热,肾小球肾炎辅助诊断。飞沫传播,呼吸道感染;扁桃体炎,咽喉炎应及时彻底治疗,防止发生急性肾炎和风湿热。治疗首选青霉素G；配合使用长效青霉素治疗或预防。(四)防治原则二、其他链球菌（一）甲型溶血性链球菌:也称草绿色链球菌。条件致病菌：1.龋齿（dentalcaries）:常由变异链球菌引起,分解蔗糖产生葡聚糖,黏附菌群形成菌斑,发酵糖产酸,釉质脱钙。2.亚急性细菌性心内膜炎SBE先心患者口腔手术。（二）B族链球菌无乳链球菌寄居于阴道和直肠,鼻咽部,皮肤感染,心内膜炎,产后感染,新生儿败血症和脑膜炎。（三）D族链球菌（条件致病菌）包括粪链球菌,牛链球菌和马链球菌。正常寄居在皮肤,呼吸道,消化道和泌尿生殖道。偶可引起泌尿道感染,腹部化脓性感染,败血症和心内膜炎。第三节肺炎链球菌S.pneumoniae在自然界广泛分布,常寄居于正常人的鼻咽腔中,形成带菌状态;在机体抵抗力下降时引起疾病。引起大叶性肺炎,占细菌性肺炎的80%。1.形态与染色G＋,双球菌,矛头状,平面相对,尖面背。有厚荚膜,无芽胞,无鞭毛。一、生物学性状2.培养特性营养要求高:血琼脂培养基,菌落与甲链相似,脐状。自溶酶,液体培养基先浑浊后变清;生化反应：分解葡萄糖,乳糖和菊糖;胆汁可溶菌。抵抗力:较弱热,紫外线,消毒剂,肥皂。3.抗原结构(1)荚膜多糖抗原型