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1《2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体》导学案主备人：汤玉玲审核人：高二生物组时间：2014-3-3学习目标：1理解和掌握动物细胞融合的原理、过程和意义。2列表比较动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同。3理解和掌握单克隆抗体制备的过程的步骤和应用。学习重难点：1.动物细胞融合的原理、过程和意义。2.单克隆抗体制备的过程的步骤和应用。学习过程一复习回顾1植物体细胞杂交的过程、原理、意义2抗体产生的过程及功能3瘤细胞的特点：二知识导航，精讲点拨（一）动物细胞融合1定义：融合后的细胞称为，是核细胞，遗传信息来自于2诱导的方法：物理方法：化学方法：生物方法：思考：①什么是灭活？为什么要灭活？②灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么？3动物细胞融合的过程：遗传物质不同的两个细胞灭活病毒诱导细胞膜、细胞质、细胞核分别发生融合杂种细胞分裂增殖2列表比较：植物体细胞杂交与动物体细胞融合的过程比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合融合原理过程诱导手段应用4动物细胞融合的意义：（二）单克隆抗体1抗体产生的免疫学原理：哺乳动物感染病原体，体内形成相应的B淋巴细胞，B淋巴细胞发挥免疫功能分泌抗体，凝聚或杀死病原体。2传统获得抗体的方法：抗原注射动物体相应的效应B细胞抗体从血清中分离抗体特点：3单克隆抗体的制备①质疑：B淋巴细胞的特点是一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体，想获得单一性抗体可以克隆单一B淋巴细胞形成细胞群即可产生出大量化学性质单一、特异性强的抗体。但是体外培养条件下，一个B淋巴细胞不可能无限增殖。瘤细胞的特点是可以无限增殖，但不产生抗体。如何让让B淋巴细胞获得无限增殖的能力？②制备过程：第一步：将特定抗原注射到小鼠体内；思考：为什么要用特定抗原免疫小鼠？第二步：从该小鼠脾脏中获得能够产生抗体的细胞，与小鼠的细胞用或聚乙二醇的诱导下融合；思考：诱导细胞融合后，培养液中有几种细胞？第三步：在特定的培养基中，筛选出细胞；原因：在选择培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有才能生长。思考：杂交瘤细胞有什么特点？是否是所有的杂交瘤细胞都产生同种抗体？3第四步：培养杂交瘤细胞，从中挑选出的细胞群，继续培养；第五步：将该杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠内增殖，然后再分离纯化单克隆抗体；提取单克隆抗体：从中提取。小结：1总结单克隆抗体的概念：2单克隆抗体有什么特点？3单克隆抗体制备的原理有：所运用的技术有：（三）单克隆抗体应用①诊断疾病：诊断和定位诊断；②用于治疗疾病和运载药物：运用制成＂生物导弹＂；③分离和纯化抗原分子巩固练习1动物细胞融合的目的中最重要的是（）A.克服远源杂交不亲和B.制备单克隆抗体C.培育新物种D.生产杂种细胞2科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A.经过免疫的B淋巴细胞B.不经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞D.不经过免疫的B淋巴细胞3单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞，在含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培养基（HAT）中无法生长；而小鼠脾细胞是正常细胞，在HAT培养基上可正常存活。用聚乙二醇诱导细胞融合后，经过数代培养，最终可在HAT培养基上存活并能产生单克隆抗体的细胞是（）A骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞B．脾细胞之间形成的融合细胞C．骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成的融合细胞D．脾细胞4用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（）A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D．筛选杂种瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体5动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）①诱导融合的方法完全相同②所用的技术手段不相同②所采用的原理完全相同④都能形成杂种细胞A.①②B.①③C.②④D.③④6“生物导弹”是指（）A.单克隆抗体B.杂交瘤细胞C.产生特定抗体的D.在单抗上连接抗癌药物7单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活．增殖的细胞是①B淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞4④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞A．①②③④B．①③⑤C．②④D．①③8两场筹备了10年的“太空结合”首次在神舟八号飞船上举行了,“新人”之一是小白鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,新人在“产房”——电融合仪内孕育新生命。160min后,中国首批“太空娃娃”终于顺利诞生。“太空娃娃”诞生和地面实验如图所示。请回答下列问题：(1)小白鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞能融合在一起,体现了细胞膜具有__________的特点。(2)若用于SARS的预防上,则宜采用_______细胞。科学工作者正在研究治疗癌症使用的生物导弹是_______。(3)B淋巴细胞和T淋巴细胞都是由________________细胞形成的。这种相同细胞的后代,在形态、结构和生理功能上产生稳定差异的过程,叫做(4)鼠的淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,在培养时通过_______________（有丝/减数）分裂方式大量繁殖。细胞中染色体数目与淋巴细胞相比有何特点？_____________；要观察融合后的细胞中的染色体形态、数目,可用一定浓度的_______________处理。(5)融合的细胞具有两种细胞的特性,即_________________和____________________。91975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请观察下图，回答问题：（1）单克隆抗体是指，其特点（2）1984年以来，科学家针对如右图所示的单克隆抗体来自，应用于人体，会作为产生，加速排斥反应，以及完整的抗体分子的相对分子质量过大，难以穿透肿瘤组织，达不到有效治疗的浓度等问题，制备出可用于肿瘤治疗的相对分子质量小的单克隆抗体。（3）制备单克隆抗体的B淋巴细胞一般从（器官）中采集。从下表看，用于筛选杂交瘤细胞的是特定的培养基。（4）大量制备单克隆抗体的方法主要有两种：①体外培养法，可获得10μg/mL的抗体；②动物体内诱生法可获得5~20mg/mL的抗体。你选择的方法及原因是培养基特殊成分主要作用次黄嘌呤骨髓瘤细胞不能利用氨基蝶嘌呤阻断DNA合成胸腺嘧啶核苷脾细胞用于合成DNA