分子生物学练习题

2008级分子生物学练习题一、名词解释分子生物学干细胞人类基因组计划核酸的变性增色反应DNA的熔点核酸的复性分子杂交原位杂交Southern法反义核酸反义DNA(cDNA)核酶染色体常染色质异染色质核小体基因副密码子顺反子顺式排列反式排列基因组不连续基因内含子外显子基因家族假基因碱基互补配对原则反向重复序列(回文结构)遗传图谱转座子转座返座返座子重叠基因模糊基因细胞器基因质粒质粒的不相容性遗传重组Holliday模型分支迁移位点特异性重组转基因动物基因敲除基因治疗基因打靶半保留复制复制子单向复制双向复制半不连续复制VDJ重组冈崎片段端粒滚环复制逆转录同义突变错义突变无义突变移框突变聚合酶链反应(PCR)转录转录单位启动子终止子增强子转录因子转换颠换转录后加工RNA的剪接中部核心结构内部引导序列染色体的倒位翻译中心法则结构域遗传密码密码子的简并性密码子的摆动性密码子的偏爱性分子伴侣蛋白质靶向基因表达诱导酶组成酶顺式作用元件反式作用因子D-环复制操纵子诱导诱导物阻遏阻遏物前导区衰减子衰减作用时序调控顺式剪接反式剪接正调控负调控基因表达二、问答1、生物学的研究方向向哪两个方面发展?人类基因组计划最初是由谁提出的?它的首席执行科学家是谁?2、分子生物学与现代医药学研究的关系是什么?3、核酸的种类有哪两种?DNA的双螺旋结构是怎样的?4、决定DNA双螺旋结构的因素有哪些?5、化学法(Maxam-Gilbert)和末端终止法(Sanger)进行DNA测序的原理分别是什么?6、原核生物和真核生物RNA的种类分别是什么?答：原核生物：mRNA、tRNA、rRNA有：5S、16S、23S真核生物：mRNA、tRNA、rRNA有：5S、5.8S、18S、28S7、影响DNA的Tm值的因素是什么?影响DNA复性的因素是什么?核酸分子示交的种类有哪四种?8、原核生物和真核生物的细胞周期分别包括哪些时期?9、反义核酸的种类有哪五种?10（P25）染色质分为哪两种类型?构成染色质的基本结构单位是什么?根据DNA复性动力学将DNA序列分为哪四种类型?答：染色质分为常染色质和异染色质两种。构成染色质的基本单位是核小体。DNA序列分为单拷贝序列、低度重复序列、中度重复序列、高度重复序列。10、一个DNA分子上必需的三种特异核苷酸序列是什么?答：1.腺嘌呤脱氧核苷酸2.鸟嘌呤脱氧核苷酸3.胞嘧啶脱氧核苷酸4.胸腺嘧啶脱氧核苷酸11、（P69）转座子分为哪四种类型?它们的特点分别是什么?答：原核类转座子分为：1.IS（插入序列）。特点：两端有ITR，只编码转座酶；2.类转座子。特点：结构同IS，但不能独立存在，仅作为复合转座子的两端；3.复合转座子。特点：两端由IS或类IS构成，可编码抗性物质；4.TnA转座子家族。特点：两端为ITR，可编码转座酶、解离酶和抗性物质。它们共有的特点：1.两端有末端反向重复序列；2.转座后靶位点正向重复；3.编码与转座有关的蛋白；4.可以在基因组中移动。12、（P74）转座子的机制有哪三种类型?复制转位的转座模型(I)是什么?答：1.复制型转座子；2.非复制型转座子；3.保守型转座子。13、（P75）转座子的特征和遗传学效应是什么?答：1.转座引起插入突变；2.插入位点上出现新的基因；3.插入完成后原位点保持原有转座子；4.转座完成后，引起插入位点旁基因突变。14、（P82）质粒有哪几种类型？质粒复制方式有哪两种?如何进行质粒复制控制？质粒如何进行转移?答：质粒分为：F质粒；R质粒；col质粒；质粒噬菌体。复制方式有：严紧型质粒复制；松弛型质粒复制。由于质粒所编码的阻遏物结合到质粒的操纵基因上，抑制了复制，从而调控了拷贝数。质粒的转移过程：1.首先是供体细胞与受体细胞有效接合，形成供体和受体对；2.DNA转移的准备，质粒所编码的一种蛋白质与超螺旋DNA单链的缺口处5’末端结合，转移过程开始，这个缺口称为转移起始区；3.DNA的转移，DNA是以线状分子的形式进行转移，完成转移后在形成环状的DNA；4.形成有复制功能的质粒。15、（P88）遗传重组分为哪四种类型？它们的特点分别是什么?答：遗传重组分为：1.同源重组。特点：需要同源序列，需要重组蛋白A（RecA），不需要特异性蛋白2.位点特意重组。特点：不需要同源序列，不需要重组蛋白A（RecA），需要特异性蛋白3.等位基因间重组。特点：不需要同源序列，不需要重组蛋白A（RecA），需要特异性蛋白4.异常重组。特点：不需要同源序列，不需要重组蛋白A（RecA），不确定特异性蛋白16、（P91）什么是Holliday模型?用模型Mesecson-Radding说明同源重组的过程?答：两条同源DNA分子彼此并排对齐，相互配对DNA中两个方向相同的单链在DNA内切酶的作用下,在相同位置上同时切开。在切口处发生链的交换，形成所谓的连接分子，也称Holliday结构：1.切断：两条配对的DNA双链间的同源链在相对应得位点断裂，切开后形成的切口使得游离末端可以移动；2.交叉：两条有切口的单链分别离开原来的互补链，并与另一条双链中的互补链配对，由DNA连接酶封闭切口，形成新的分子间的磷酸二酯键；3.分支迁移：重组位点可以沿双链向DNA分子任一方向迁移，迁移过程中原来的碱基对被解开在形成新的碱基对；4.Holliday交叉的上半部或下半部经过180°旋转形成一个交叉结构Holliday中间体；5.Holliday中间体的拆分：通过从中间体的中心切断，再重新连接，将Holliday交叉拆分成两个独立的DNA双链。17、（P92.3.4）RecBCD蛋白、RecA蛋白、RuvA、B、RuvC的功能分别是什么？答：RecBCD有DNA核酸内切酶活性，能使双链DNA造成切口，特别是chi为点附近，也具有依赖与ATP的单链和双链外切酶活性，所以又称为核酸外切酶V；RecA能结合双链DNA或单链DNA，可以离体促进各种DNA分子进行同源配对或分子入侵，能使单链DNA取代双链分子中的同源链；RuvA识别Holliday连接点结构，在交换点出与所有4条链结合，形成两个四聚体，将DNA像三明治一样夹住，同时促进RuvB的结合；RuvB有ATPase活性，为分支迁移提供动力，RuvA与RuvB结合成RuvAB才是活性形式，具有解旋酶的作用；RuvC是一种核酸内切酶，以二聚体形式特异地结合Holliday中间体，在重组中诱发Holliday中间体拆分，RuvC作用依赖于RuvA、RuvB。18、（P380）在基因敲除技术中，如何进行正筛选和负筛选？答：（我真的无能为力了）19、原核生物的DNA聚合酶分为哪三种类型？它们的功能分别是什么？20、真核生物的DNA聚合酶分为哪几种类型？DNA聚合酶α、δ的功能分别是什么？21、以大肠杆菌为例，说明原核生物DNA的复制过程？22、以SV40说明真核生物DNA的复制过程？23、什么是染色体的末端复制问题？如何避免染色体复制的末端引缩现象？24、避免DNA复制末端引缩现象的机制有哪几种？它们的内容分别是什么？25、根据对遗传信息的改变？将基因突变分为哪四种类型？26、诱发突变的化学诱变剂有哪四种类型？27、如何利用PCR技术进行定向诱变？28、转录的基本特征是什么？29、原核生物RNA聚合酶的组成是什么?各亚基的作用分别是什么？30、真核生物RNA的聚合酶有哪三种类型？它们的功能分别是什么？31、鉴定RNA聚合酶在DNA上的结合位点的方法有哪三种？32、原核生物启动子的结构可包括哪三部分？终止子有哪两种类型？ρ因子的功能是什么？33、真核生物RNA聚合酶Ⅱ的启动子可由哪几部分组成？增强子的性质有哪些？34、试述原核生物的转录过程。35、真核生物合成的转录因子分哪三种类型？36、RNA生物合成的抑制剂有哪三种类型？37、原核生物和真核生物转录后加工的主要内容分别是什么？38、试述rRNA、tRNA和mRNA转录后加工的过程。39、IF1、IF2、IF3，EF-Tu、EF-Ts、EF-G，RF1、RF2、RF3的功能分别是什么？40、起始密码子和终止密码子分别是什么？41、蛋白质的二级结构有哪三种？42、密码子有哪些性质？它的起始密码和终止密码分别是什么？43、原核生物和真核生物mRNA的特点分别是什么？核糖体的主要功能是什么？44、原核生物的起始因子、延伸因子、终止释放因子分别有哪些？它们的功能分别是怎样的？45、试述原核生物的蛋白质合成过程？46、hsp70和hsp60的功能分别是什么？47、试述由信号肽和导肽引导的蛋白质跨膜过程。48、简述胰岛素的分泌加工过程。49、试述乳糖操纵子的结构和调空机制。51、从概念、主要作用蛋白、转录影响、作用位点、消除作用因子五个方面比较乳糖操纵子的正、负调控。52、试述色氨酸操纵子的结构和调控机制。53、简述反式作用因子常见类型。