《农药生物测定》课后复习题

《农药生物活性测定》课后复习题1．简述农药生物测定的概念、意义。度量农药对生物群体、个体、活体组织或细胞产生效应大小的生物测定技术。通常采用不同药剂剂量或浓度对测定对象产生的效应强度，来评价两种或两种以上药剂的相对效力。2．简述农药生物测定的原理、原则。原理：研究药剂与生物的相关性原则控制影响因素尽可能一致：温度、湿度、光照等外界环境条件;农药的理化性状;供试生物的生理状态;处理方法及处理部位设立对照：空白对照、溶剂对照、标准药剂对照重复测定运用生物统计分析试验结果供试生物应尽量选择农作物害虫、病原菌和农田主要杂草3．何为高通量筛选，其组成部分有哪些？以玻璃片、膜片或培养板为载体，用高密度、微量自动化加样的方法，实现短时间内分析大量样本。高通量筛选方法通常一次可以测定384～1536个点，现在还有3456个点的超高通量筛选方法（ultra-high-throughputscreening,UHTS）。主要组成部分：自动化操作系统；高灵敏度检测系统；分子、细胞水平的高特异性体外筛选模型；被筛样品管理库（即样品库）；数据采集传输处理系统4．何为杀虫剂生物测定？度量杀虫剂对昆虫（包括螨类和昆虫纲以外的小动物）产生效应大小的农药生物测定。通过比较不同杀虫剂的剂量或浓度对供测昆虫产生效应强度的方法，来评价两种或两种以上杀虫剂的相对效力。5．什么是标准目标昆虫？简述目标昆虫室内饲养定向控制的条件？标准目标昆虫：是指被普遍采用的，具有一定代表性和经济意义，以及抗药力稳定均匀的农药杀虫毒力和毒效指示试虫群体。6．杀虫剂生物测定中移取试虫的方法有哪些？（1）一般移取法：对于活动强度不大或具有假死习性的试虫（棉铃虫等），可用镊子移取。体型小，软体或易碰伤的试虫（蚜虫、红蜘蛛等），用毛笔移取，注意刺吸式口器的口针。沾药未干的试虫，必须等药干后才能移取。（2）趋光法：利用昆虫的趋光性来移取试虫（如家蝇）。（3）吸虫法：适用于活动强度不大，微小的或易受机械伤害的目标昆虫（拟谷盗、米象等），用真空或喉管空气注射吸虫法移取。（4）自行迁移移虫法：利用试虫的自行迁移生活特性达到混匀移虫的目的。如蚜虫等。（5）麻醉法：对于飞翔或活动强度大的试虫，采用物理或化学方法进行麻醉处理。7．论述胃毒、触杀、熏蒸、内吸、忌避作用测定技术的基本原理及方法。一、胃毒作用测定技术的基本原理：通过试虫吞食带药食料，由消化道中毒致死，以测定胃毒毒力的杀虫剂生物测定技术。无限取食法：试虫可以无限制地取食含有杀虫剂的饲料，不计算实际吞食药量的用药方法。此法简单，但不能避免其他毒杀作用的干扰；药量不易掌握，有拒食效应时难获得满意结果。例如：1）饲料混药喂虫法2）培养基混药法3）毒饵法4）土壤混药法定量取食法：使供试昆虫按预定杀虫剂的剂量取食，或能准确地测出试虫取食后所吞食药量的用药方法。例如：叶片夹毒法）、液滴饲喂法、口腔注射法二、触杀作用测定技术原理：将药剂施于虫体的全部或局部（合适部位），使药剂经体壁进入虫体而发挥触杀作用。直接施药法：直接将药剂施加在昆虫体表（喷粉及喷雾法、浸渍法、浸玻片法）。局部施药法：将药剂均匀地施于虫体的合适部位，使其充分发挥触杀作用。由于药剂不接触昆虫的口器，可以避免胃毒作用的干扰（药膜法、点滴法）。三、熏蒸作用测定技术的基本原理：使药剂以气态经呼吸系统进入虫体，在作用部位产生毒力反应，以测定熏蒸毒力的杀虫剂生物测定。方法：温度25℃，相对湿度50%下进行的。熏蒸时间一股不超过5小时。试验昆虫最常用的是米象与杂拟谷盗成虫(羽化后2—3天)，也可以用黄粉甲幼虫或麦蛾幼虫(3龄左右)。四、内吸毒力测定技术的基本原理：使药剂经根、茎、叶或种子吸收和传导后，通过供试昆虫取食植物带毒组织或汁液产生中毒反应，以衡量内吸毒力的杀虫剂生物测定。直接测定法：将试虫置于经杀虫剂处理植株的未施药的部位，隔一定时间后，观察试虫中毒死亡情况，以判断内吸杀虫能力的方法。间接测定法：利用敏感水生昆虫（蚊幼虫）对受药植物浸出液的反应，来测定进入植物体内的内吸杀虫剂有效成分含量的方法8．简述叶片夹毒法的基本原理和实验方法。基本原理是用两张叶片，中间均匀地放入一定量的杀虫剂饲喂目标昆虫，然后由被吞服的叶片面积，计算出吞服的药量。1、夹毒叶片的制备2、饲喂方法3、结果检查4、致死中量的计算9．何为杀菌剂生物测定。利用病原菌或感菌生物体对杀菌剂的反应，来确定杀菌剂效力(毒力,药效)的农药生物测定。10．简述菌种保存的方法？1）传代培养保藏法：是将菌株定期的移植到新鲜的培养基上进行培养保存的方法。是最基本的保藏法。2）液体石蜡覆盖保藏法：是传代培养保藏法的一种改进，利用在斜面上加注灭菌的液体石蜡使培养物隔绝空气，同时防止培养基干涸而达到延长保藏时间的目的。本法适用于霉菌、酵母菌、放线菌和好气细菌的保存。3）水保藏法：将细菌或真菌悬浮在无菌水中在室温下保存菌种的方法。4）冷冻保藏法：通过冷冻使细胞停止活动进行保存的方法。ⅰ）、低温冰箱保藏法（冷冻法）：将菌体移入分散剂中，保存在低温冰箱内。ⅱ）、液氮保藏法：将菌种用液氮进行超低温（-196℃）处理保存。本法适用范围最广，适于绝大多数微生物、病毒、人类和动植物组织、原代及传代细胞、杂交瘤、体外质粒、重组DNA、单细胞藻株、原生动物等。5）干燥保藏法：将细菌或真菌干燥，停止代谢活动，然后进行冷冻或冷藏的保存方法。6）冷冻干燥保藏法：将细胞冷冻使代谢活动完全停止，然后在真空下通过冰的升华除去水分并在真空状态下保存。为防止冷冻干燥过程中细胞受到损伤，要在菌体内加入适当的保护剂，然后进行冷冻干燥。7）寄主保藏法：霜霉菌、锈菌、白粉菌等专性寄生菌的保存，一般是在植株幼苗上接种使其发病，隔一定时间后，取其孢子再接种到新的植物幼苗上，如此反复进行菌种保存。8）基因工程菌的保藏：基因工程菌最好应保藏在含低浓度选择剂的培养基中。例如，质粒pBR322。它除了能将外源DNA输入E．coli细胞外，还赋予E．coli细胞Ampr和Tetr。如果在培养基中加入Amp和Tet，则培养时可选择出含pBR322质粒的细胞。11．简述孢子萌发试验法、生长速率测定法、附着法、稀释法和抑菌圈测定法的基本原理和测定方法？一、孢子萌发试验法的基本原理：通过药剂与病菌孢子接触后，根据抑制病菌孢子萌发的多少来判定药剂效力的杀菌剂生物测定方法。可用于杀菌剂的筛选，药剂抗雨水冲刷的测定，也可用于杀菌剂作用方式的测定。二、生长速率测定法的基本原理：利用病菌在含有不同浓度药剂的培养基上生长速度的快慢，来判定药剂毒力大小的杀菌剂生物测定方法。适用于不产孢子或产生孢子缓慢，而菌丝生长迅速、整齐、平伏于培养基上呈放射状生长的病菌。三、附着法的基本原理：将病菌孢子附着于灭菌的种子、滤纸片、果皮或其它保护材料上，使其接触药剂，在一定条件下培养一定时间后观察有无菌丝生长，以比较药剂效果。常用于杀真菌剂的生物测定。四、稀释法的基本原理：又称最低抑制浓度测定法。通过测定能完全抑制病菌生长的药剂最低浓度，来衡量药剂毒力的杀菌剂生物测定方法。此法可用于多种化合物对真菌、细菌和酵母药效筛选的毒力测定。五、抑菌圈测定法的基本原理：通过药剂在含菌培养基平面上水平扩散，形成大小不同的抑菌圈来比较毒力的杀菌剂生物测定方法。12．简述温室盆栽试验中接菌施药方法及药效调查方法？接菌方法：喷洒法：是将病原菌的孢子制成孢子悬浮液喷洒于植物表面。喷粉法：是直接用孢子粉（用滑石粉稀释）喷撒于植物叶片上。涂抹法：是用手指或纱布将孢子悬浮液涂抹于叶片表面，或在孢子悬浮液中加适量金刚砂，用手指涂抹于叶片表面。注射法：是将病原菌孢子悬浮液用注射针注入寄主的生长点或幼嫩部分。针刺法：用灭菌的针刺伤寄主组织，然后将病菌接种在伤口内。拌种法：将病原菌的孢子拌在植物种子中。浸种法：将孢子悬浮液与种子浸泡在一起，然后播种。土壤接种法：将病菌在播种前或播种时拌在土壤中。蘸根接种法：将幼苗的根部稍加损伤，在孢子或菌丝体悬浮液中浸过以后移植。根部切伤接种法：是移植铲或其他器具在植株的附近插入土壤中，使植株的根部部分受到损伤，然后将孢子或菌丝体的悬浮液灌注在根部附近的土壤中，最好从移植铲插入的空隙中灌入。施药方法：1)测定药剂的保护效果：先喷药，后接菌。2)测定药剂的治疗效果：先接菌，待病菌入侵后（1-2天）再施药。3)测定药剂的内吸作用：先喷药，后接菌。4)测定药剂的持效期：一次施药后，间隔1天，2天，4天，6天，8天或更长时间分期接种病原菌。5)测定抗雨淋作用：先喷药，用喷雾装置降水淋洗一定时间以模拟降雨，然后接菌。效果调查：1）调查发病普遍率：以病害发生的普遍与否表示药剂的效果，计算调查总株（或总叶）数中发病百分率。适用于某些土壤和种子传染的苗期病害，也适用于全株性病害。2)计数法：适用于叶斑类病害。调查每一叶上的病斑数,求得平均每叶病斑数,并以此比较发病情况,计算防治效果。3）分级计数法：将病害分级调查后，计算病情指数及防治效果。13．什么是除草剂生物测定？度量除草剂对杂草生物效应大小和对作物安全性的农药生物测定。通常采用不同剂量的除草剂对供试杂草（或作物）产生效应强度的相对比较方法，以评价一种或多种除草剂的相对效力（或安全性）。14．简述除草剂生物测定的分类及原理（除草剂生物活性测定参数有哪些）。一、整株水平测定（1）植株生长量：通过植物地上部分的生长量或形态特征变化的大小，来测定除草剂效力高低。以鲜重或株高为指标。（2）症状：有些除草剂可引起试材的典型症状，可以利用此种反应来鉴定除草剂。二、组织或器官水平测定种子发芽：通过种子萌发率或对胚芽、胚根伸长长度的受抑制程度，来测定除草剂效力。三、细胞或细胞器水平、酶水平测定1）生理生化指标：通过对植物生理过程（二氧化碳交换量、水分消耗、黄化反应、根系活力）的抑制效应，来测定除草剂的活性和效力。2）植物的部分细胞或细胞器：如愈伤组织、线粒体、叶绿体等。3）藻类的应用：浊度计测定生长量、分光光度计测定叶绿素含量、氧气释放、抑制面积的测定、直观观察4）新化合物的高通量筛选15．简述除草剂生物测定的测定方法。种子发芽测定法、植株生长量测定法、生理生化指标测定法、症状鉴定法、愈伤组织鉴定法16．列举至少5种抑制光合作用除草剂的生物测定方法。去胚乳小麦幼苗法、番茄水培法、浮萍法、圆叶片漂浮法、叶片内叶绿素荧光测定法光合速率测定法、叶圆片亚硝酸还原酶活性测定法、离体叶绿体测定法17．何为植物激素的生物测定？利用敏感植物某些性状反应作指标，对生理活性物质进行定性或定量的农药生物测定。18．简述植物激素生物测定技术的分类，各常用测定方法的基本原理。生长素的生物测定方法：燕麦弯曲法、小麦胚芽鞘伸长法、绿豆生根法赤霉素的生物测定方法：水稻幼苗叶鞘伸长“点滴”法、大麦胚乳法矮生玉米叶鞘法细胞分裂素的生物测定法：萝卜子叶增重法苋红素合成法组织培养鉴定法小麦叶片保绿法脱落酸的生物测定：小麦胚芽鞘伸长法棉花外植体脱落法乙烯的生物测定法：乙烯可抑制黄化豌豆幼苗下胚轴的伸长；使下胚轴细胞横向扩大，下胚轴短粗；偏向上生长，从而使下胚轴横向生长。黄化幼苗对乙烯的这三种反应被称为“三重反应”。19．如何利用豌豆、绿豆、萝卜、棉花、燕麦来鉴别生长素、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸和乙烯？（或者：大麦、小麦、绿豆、豌豆、萝卜）生长素：绿豆生根法、赤霉素：矮生豌豆下胚轴试法、大麦胚乳法细胞分裂素：萝卜子叶增重法、脱落酸：棉花外植体脱落法、小麦胚芽鞘伸长法乙烯：黄化豌豆幼苗、20．论述农药对非靶标生物的毒性类型及测定技术。1）急性毒性：急性毒性是指机体(人或实验动物)一次(或24小时内多次)接触外来化合物之后所引起的中毒效应，甚至引起死亡。2）亚急性（subacutetoxicity）或亚慢性(subchronictoxicity)毒性：化学物对生物体多次重复作用后，所产生的毒性。是指实验动物连续多日接触较大剂量的外来化合物所出现的中毒效应。所谓较大剂量，是指小于急性LD50的剂量。两者的区别在于给药剂量和给药期限的不同，亚急性给药期限一般