RNA干扰技术的应用

1RNA干扰技术及其应用研究RNAInterferenceTechniqueandItsApplication陈若飞;畜牧与饲料科学,AnimalHusbandryandFeedScience,2009年05期摘要：RNA干涉作用,是生物界一种古老而且进化上高度保守的现象。是基因转录后沉默作用(PTGS)的重要机制之一。它能定向关闭生物体内某一基因,使其不发挥作用,同时不影响其他基因的功能,便于研究特定基因的功能。在后基因组时代的基因功能研究、基因治疗和药物开发中具有广阔的应用前景。RNAinterference(RNAi)isanancientandhighlyconservativephenomenonduringbiologicalevolution.Itisalsooneoftheimportantmechanismsofpost-transcriptionalgenesilencing(PTGS).Itcandirectionallycloseageneandpreventitsfunctionsinvivo,notaffectingthefunctionsofothergenesatthesametime.Thisispropitioustostudythefunctiondsofparticulargenes.Therefore,RNAihasbroadapplicationprospectsingenefunction,genetherapyanddrugdevelopmentinthepost-genomeera.2RNA干扰技术的应用现状及研究进展TheApplicationandtheResearchProgressofRNAInterferenceTechnique王春蕾;赵博;丛斌农业科技与装备,AgriculturalScience&TechnologyandEquipment,2009年03期摘要：RNA干扰是指外源双链RNA进入细胞以后引起的与其同源mRNA特异性降解的现象,它参与真核生物抵抗病毒侵染,阻断转座子的异常活动,调控基因表达,并广泛存在于生物界。通过介绍RNA干扰技术的发现过程,探讨该技术的作用机理和研究进展,进而提出该技术的未来发展方向。RNAinterference(RNAi)isallevolutionarilyconservedeukaryoticadaptiveresponsethatleadstothespecificdegradationoftargetmRNAspeciesinresponsetocellularexposuretohomologousdouble-strandedRNAmolecules.Itisanendogenouspathogenicnucleicacids,andregulatestheexpressionofprotein-codinggenes.ThisarticledealswiththediscoveryprocessofRNAinterferencetechniqueanditsactionmechanismandresearchprogressandfinallypointsoutitsdevelopingtrend.正文：RNA干扰(RNAinterference,RNAi)现象是一种进化上保守的抵御转基因或外来病毒侵犯的防御机制。将与靶基因的转录产物mRNA存在同源互补序列的双链RNA(doublestrandRNA,dsRNA)导入细胞后,能特异性地降解该mRNA,从而产生相应的功能表型缺失,这一过程属于转录后基因沉默机制(pos3RNA干扰与神经退行性疾病的治疗RNAinterferenceandthetherapyofneurodegenerativedisease金岚芸;林琳;中国临床康复,ChineseJournalofClinicalRehabilitation,2006年38期上海交通大学基础医学院神经生物实验室;上海交通大学基础医学院神经生物实验室上海市;摘要;目的:神经退行性病变是人类神经系统的严重疾病之一,对于神经退行性疾病的治疗目前尚无有效方法,本文探讨RNA干扰技术运用于该病动物模型中的有效性,从而为进一步运用于临床提供可能。资料来源:应用计算机检索PubMed1990-01/2006-03期间的有关神经退行性病变和RNA干扰的文献,检索词“RNAinterference,neurodegen-erativedisorders,functionalrecovery,mousemodel,transfection”,并限定文章语言种类为English。研究对象为进行RNA干扰治疗的各类型神经退行性病变的动物小鼠模型。资料选择:选取试验包括各类型神经退行性病变RNA干扰治疗组和对照组的脑内致病基因的表达,细胞组织形态学,行为学变化比较的相关文献,进行初审,删除明显不符合动物模型试验的研究,然后查找余下的文献全文,进一步判断是否为随机动物模型试验。纳入标准:①随机动物模型试验,无论是否为单盲、双盲、或非盲法。②平行对照组,即未进行RNA干扰治疗的神经退行性病变的小鼠动物模型或健康对照;治疗组为进行RNA干扰治疗的神经退行性病变的小鼠动物模型。排除标准:明显不随机的...正文：神经退行性病变表现为特定神经元群体的选择性死亡[1],阿尔茨海默病、帕金森氏病、亨廷顿氏病和脊髓侧索硬化等是人类目前常见的神经退行性疾病[1,2]神经退行性病变表现为特定神经元群体的选择性死亡[1],阿尔茨海默病、帕金森氏病、亨廷顿氏病和脊髓侧索硬化等是人类目前常见的神经退行性疾病[2]。目前,对于此类疾病的治疗尚无特效方法,已知许多神经退行性病变与某些基?4RNA干扰技术在胰腺癌基因治疗中的应用TheapplicationoftheRNAinterferencetechnologyinthetreatmentofpancreaticcancer'sgenetherapy国际消化病杂志,InternationalJournalofDigestiveDiseases,2007年04期摘要;RNA干扰(RNAi)是双链RNA(dsRNA)介导的、由特异性引起的转录后基因沉默现象。RNA干扰技术作为基因沉默的有效手段,在肿瘤治疗方面显示出良好的前景。现就RNA干扰的机制、双链RNA的设计、小干扰RNA(siRNA)的制备方法和RNA干扰技术在胰腺癌治疗研究中的应用进展作一综述。正文：干扰性核糖核酸普遍存在于人体细胞内,当外源性或内源性双链RNA(dsRNA)进入细胞后,识别含有其互补序列的mRNA并与之结合后,在酶的作用下降解mRNA,从而干扰相应基因表达。一些小干扰RNA(siRNA)能够高效特异性地阻断相应基因的表达,促进RNA降解,可在细胞内发挥基因敲除的作用,这5RNA干扰技术及其在眼科疾病中的应用RNAinterferencetechnologyanditsapplicationinoculardisorders陈春林;叶剑;眼科新进展,RecentAdvancesinOphthalmology,编辑部邮箱2008年01期摘要：RNA干扰技术为研究各种基因在眼科疾病中的作用提供了一种有效工具。我们对RNA干扰技术在探究眼科疾病的发病机制和治疗眼部疾病的潜在应用进展进行综述。正文：近年来的研究表明,一些小的双链RNA可以高效、特异的阻断体内基因表达,促使mRNA降解,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型,称为RNA干扰(RNAinterference,RNAi)。高效特异的阻断基因的表达是RNAi的一大特征。在线虫、果蝇体内,RNAi能达到基因敲除的效果,在小鼠和人的体外培养细胞6RNAi阻断人膀胱癌组织中成纤维细胞内透明质酸合成酶3的表达研究Inhibitionoftheexpressionofthehyaluronicacidsynthase3inthefibroblastsofhumanbladdertransitionalcellcarcinomatissuewithRNAinterferencetechnique杨为民;蔡建良;叶章群;杜广辉;胡志全临床外科杂志,JournalofClinicalSurgery,2006年06期;摘要：目的探讨RNA干扰技术阻断人膀胱移行细胞癌组织中成纤维细胞内透明质酸合成酶3(hyaluronicacidsynthase3,HAS3)的表达与膀胱移行细胞癌生物学行为之间的关系。方法设计、体外化学合成HAS3mRNA序列特异性、非特异性小干涉双链RNA(smallinterferencingRNA,siRNA),分别与脂质体LipofectamineTM2000结合后转染体外培养的人膀胱移行细胞癌组织中的成纤维细胞。实验分为A、B、C、D四组:孵育48h后,取各组细胞培养液进行放免法透明质酸浓度测定、免疫细胞化学染色了解透明质酸的合成、RT-PCR法检测HAS3mRNA的表达。结果与A组相比,D组细胞HAS3mRNA表达减少了78.2%,HA染色明显变淡,细胞培养液中HA浓度下降了60.3%(P0.01);B、C组mRNA表达分别减少了4.7%、5.4%,HA染色几乎无变化,HA浓度分别下降了5.2%、5.8%(P0.05)。结论RNA干扰技术可以显著地减少膀胱移行细胞癌组织中成纤维细胞的HAS3的表达,从而大幅度地降低该细胞内透明质酸的合成。正文：恶性肿瘤组织中透明质酸(hyaluronicacid,HA)浓度的升高与肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移密切相关[1]。如能有效地降低恶性肿瘤组织中HA的生成,将可能抑制肿瘤的发生和发展。我们应用RNA干扰技术(RNAinterference,RNAi),成功地抑制了人膀胱移行细胞癌组织中成纤维细胞内透明质酸?7利用RNA干扰技术抑制Galectin-3的表达对人大肠癌细胞系LOVO增殖和凋亡的影响InfluencesofinhibitingGalectin-3byRNAinterferencetechniqueontheproliferationandapoptosisofhumancolorectalcancercellsLOVO程变巧;耿炎;武金宝;姜泊中国组织工程研究与临床康复,JournalofClinicalRehabilitativeTissueEngineeringResearch,2007年16期摘要：观察Galectin-3表达与肿瘤细胞增殖和凋亡的关系,探讨利用RNA干扰技术作为肿瘤基因治疗的方法。方法:实验于2005-06/2006-12在南方医院消化研究所完成。从PubMed的序列号NM-002306中按照引物设计软件设计并化学合成4条Galectin-3小干扰片断,从中选出有效的干扰片断,并顺势转染大肠癌细胞系LOVO(为Galectin-3siRNA组),用未转染细胞做为正常对照,以转染阴性干扰片断作为空白对照,免疫印记法验证干扰结果,MTT方法观察干扰后24,48和72h各组细胞增殖吸光度(A值),流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果:①用顺势转染的方法成功转染了Gal-3siRNA片断,转染后72h收集细胞并提取细胞浆蛋白,免疫印记法验证结果显示Galectin-3siRNA组灰度值(55.790)与正常对照(97.234)及空白对照的灰度值(90.459)相比,galectin-3表达明显减弱(P0.05)。②细胞增殖情况:干扰后24,48和72hGalectin-3siRNA组细胞继续生长,但细胞生长减慢,A值低于正常对照和空白对照(24h:1.018±0.002,1.478±0...正文：国内大肠癌发病率逐年增高,且死亡率在所有消化道肿瘤中上升最快。大肠癌环绕肠1周约需要1.5年,快的增长率是导致其生存率降低的主要原因之一。抑制癌的增殖促进其凋亡可达到降低死亡率的目的,有效地敲除与癌有关的基因的