PH胁迫下对玉米幼苗丙二醛含量的影响(摘要使用土培法,在不同PH值磷酸盐缓冲液处理下,对玉米幼苗膜脂过氧化产物丙二醛(MDA)的含量进行了测定。结果表明,对照组(水)丙二醛含量与PH值为6.5时丙二醛含量接近,低于PH6.5胁迫和高于PH6.5胁迫下,玉米幼苗丙二醛(MDA)的含量逐渐升高。关键词:玉米PH胁迫丙二醛EffectofPHMalondialdehydecontentinMaizeSeedlingsunderthestressofxingfen(Collegeoflifescienceandtechnology,YangtzeNormalUniversity2012LifeScience)Abstract:Usingsoilculturemethod,InphosphatebuffersolutionunderdifferentpHvalue,onMaizeSeedlinglipidperoxidationproductmalondialdehyde(MDA)contentweredetermined.Theresultsshowedthat,Thecontrolgroup(water)MDAcontentandpHvalueof6.5whenthecontentofMDAinclose,belowthePH6.5stressandhigherthanthatofMaizeSeedlingsunderPH6.5stress,malondialdehyde(MDA)contentincreasedgradually.Keywords:CornPHCoercionMDA玉米是世界上分布最广泛的粮食作物之一,种植面积仅次于小麦和水稻而居第三位。种植范围从北纬58°(加拿大和俄罗斯)至南纬40°(南美)。世界上整年每个月都有玉米成熟。中国年产玉米占世界第二位,我国各地均有栽培。全世界热带和温带地区广泛种植,为一重要谷物。[3]是中国北方和西南山区及其它旱谷地区人民的主要粮食之一。因此,提高玉米的产量和质量是非常有必要的。当植物在遭受到胁迫时,植物体内代谢失调,细胞内自由基产生和清除的动态平衡被打破,形成氧化胁迫。逆境下,植物组织中通过各种途径超氧阴离子自由基、羟基自由基、过氧化氢、单线态氧等,它们有很强的氧化能力,性质活泼,称为活性氧(ROS)。可能的机制是:ROS加速膜脂过氧化链式反应,自由基增多;而超氧化物歧化酶(SOD)等保护系统又被破坏,积累许多有害的过氧化产物,如丙二醛等。自由基破坏膜结构,损伤生物大分子,引起代谢絮乱,导致植物死亡。[1]现全球环境被破坏严重,水体污染严重,加之施肥和农药的使用,土壤的PH值改变,影响玉米的生长。本实验就是探究不同PH胁迫对玉米丙二醛含量的影响,为玉米的种植提供最适PH理论基础。1材料与方法1.1试验设计取5个同一型号的培养皿,其中装入相同量的细沙,向每一个培养皿中均匀播种15颗同种玉米种子。将5个培养皿至光照培养箱中25℃萌芽5d,每天用等量且充足的蒸馏水(pH约为6.5)浇灌。当玉米苗长到10cm左右,培养环境改为光周期为12h/12h,光照强度200-300μmol/(㎡•s),昼夜温度25±2℃和15±2℃,再不同的PH缓冲液处理幼苗。不同pH缓冲液是由Na2HPO4和NaH2PO4按比例调配而成,分别设五种pH梯度:蒸馏水、6.0、6.5、7.0、7.5。每天定时定量的用不同pH缓冲液分别处理幼苗,其中一个培养皿用等量蒸馏水处理作为对照。连续处理5d后测量MDA含量。1.2测定方法MDA含量测定采用硫代巴比妥酸(TBA)法[10]和采用双组分光光度法,[2]根据Lambert-Beer定律,通过代数方法可分别求出MDA和可溶性糖的含量。MAD含量(moL/g)=MAD浓度(mol/L)×提取液体积(ml)/植物组织鲜重(g)1.3数据分析所有试验数据均采用统计软件Excel进行相应分析处理。2、结果与分析表一:数据处理记录图表二:不同pH缓冲液处理玉米幼苗丙二醛(MAD)含量柱状图蒸馏水PH=6.0PH=6.5PH=7.0PH=7.5532nm(OD值)0.1560.1930.1490.1950.439450nm(OD值)0.3310.3390.3170.3830.599CMDA(mol/l×10﹣6)0.8211.0550.7841.0432.496MDA的含量(mol/g×10﹣8)6.5688.4406.2728.04319.968从上图可以得出用蒸馏水,PH=6.0,PH=6.5,PH=7.0,缓冲液处理的玉米幼苗丙二醛(MAD)含量稍低一些,而PH=7.5的缓冲液处理的玉米幼苗丙二醛(MAD)含量陡然升高;用pH=6.5缓冲液处理的玉米幼苗与对照组用蒸馏水处理的玉米幼苗丙二醛(MAD)含量接近;PH=6.0和PH=7.0处理的玉米幼苗丙二醛(MAD)含量接近。3.讨论植物器官在逆境条件下或衰老时,往往发生膜脂过氧化作用,丙二醛(MAD)是其产物之一,通常将其作为膜脂过氧化指标,用于表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件反应的强弱。[4-7]本实验中,用pH=6.5缓冲液处理的玉米幼苗与对照组用蒸馏水处理的玉米幼苗丙二醛(MAD)含量接近,说明蒸馏水的PH值接近6.5,但PH=6.5丙二醛含量更低,可能适当改变土壤的PH值对玉米生长还有利,降低了植物丙二醛的含量。PH=6.0和PH=7.0处理的玉米幼苗丙二醛(MAD)含量接近,说明低酸和高碱对玉米的胁迫程度接近。用蒸馏水,PH=6.0,PH=6.5,PH=7.0,缓冲液处理的玉米幼苗丙二醛(MAD)含量稍低一些,而PH=7.5的缓冲液处理的玉米幼苗丙二醛(MAD)含量陡然升高;说明在PH=6.0,PH=6.5,PH=7.0,玉米在这些PH状况下能通过自身的调节,保持生长,但在PH=7.5的时候玉米的膜脂被破坏程度明显严重,可能长时间会使玉米不能维持生长而死亡。随低PH或高PH的胁迫加重,丙二醛含量逐渐升高,差异显著,说明随PH胁迫程度的增加,膜脂过氧化程度越来越严重,这与大多数研究结果一致。[8-9]再者,本实验在设置PH梯度时应在加几组,PH值范围太窄,导致实验结果对比度不够。还有组数太少,测量的结果说服力小。但是实验也有可取之处,酸碱有对比且使用单一变量。参考文献:[1]李合生.现代植物生理学.北京:高等教育出版社,2012::356.[2]张志良.瞿伟箐.李小芳.植物生理学实验指导.北京:高等教育出版社,2009.227-228.[3]玉蜀黍.中国植物志.[4]Bowlerc,MontaguMV,InzeD.Superoxidedismutaseandstreetolerance[J].Annu.Rev.Plantphysiol.,1992,43:83-116.[5]Apelk,HirtH.Reactiveoxygenspecies:metabolism,oxidativestreas,andsignaltransduction[J].AnnurevPlantbnwheatgenotoleranceiiol,2004,55:373--399.[6]DhandaS,SethiGS,BehlRK.Indicesofdroughttoleranceinwheatgenotypesatearlystagesofplantgrowth[J].JAgronCropSci,2004,190(1):6--12[7]ShinozakiK,Yamaguchi-ShinozakiK,SekiM.Regulatorynetworkofgeneexpressioninthedroughtandcoldstressresponses[J].CurrOpinPlantBiol,2003,6(5):410--417[8]LilleyJM.LudlowMM.Expressionofosmoticadijustmentanddehydrationindiversericelines[J].FieldCrop.RES,1996,48:185-197[9]RepeliinA.PharnThiAT.TashakorieA.etal.LeafmembraneLipidsanddroughttoleranceinyoungcoconutpalms(CocosnuciferaL)[J].EurJ.Agron.,1997,6:25-33.[10]赵世杰,许长成,邹琦,等。植物组织中丙二醛测定方法的改进。植物生理学通讯,1994,30(3):207-210.