SOP-ASO

文件号：第版页数1共5页XX医院检验科试剂标准操作规程XX医院检验科-SOP文件抗链球菌素O测定试剂（ASO）（免疫比浊法）文件编号：版本：生效日期：编写人日期审核人日期批准人日期本规程自年月日起实施，每年复审一次复审人：复审日期：文件分发部门和/或个人：医务科保管者院长办公室保管者院档案室保管者检验科主任临床化学检验室所有相关人员上岗前或文件有变动时均应及时阅读此文件并签字。文件号：第版页数2共5页XX医院检验科目录1.检测原理2.标本采集与处理2.1受检者的准备2.2静脉采血2.3抗凝剂2.4标本的处理及储存3.试剂3.1试剂及配套品3.1.1试剂3.1.2配套品3.2试剂稳定性4.校准4.1校准血清4.1.1校准血清的保存及稳定性4.2校准方式4.3校准间隔4.4校准血清的溯源性5.质控5.1质控品5.2质控规则6.仪器7.操作程序8.计算9.操作性能9.1精密度9.2准确度9.3分析灵敏度9.4可报告范围9.5干扰（分析特异性）10.方法学比对11参考区间12.临床意义13.注意事项14参考文献文件号：第版页数3共5页XX医院检验科1.检测原理660nm样本中ASO+包被SLO的胶乳-----------------大分子免疫复合物在660nm监测生成的复合物的浊度变化，与样本中ASO效价成正比。2.标本采集与处理2.1受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.2静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。2.3抗凝剂：最好不要使用血浆检测，不使用抗凝剂。2.4标本处理及储存：血清在2-8C下储存不超过一周或在-20C可保存2个月。3．试剂3.1试剂及配套品：3.1.1试剂：本科使用永和阳光（湖南）生物科技有限公司ASO试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：组成R1：缓冲液200mmol/L（PH=8.6）叠氮钠0.09%R2：包被SLO的胶乳2.5mg/dL叠氮钠0.09%3.1.2配套品：无3.2试剂稳定性：1．原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。2．试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。3．试剂R1颜色为无色，试剂R2颜色为乳白色，当试剂变色或出现沉淀，按照试剂失效处理。文件号：第版页数4共5页XX医院检验科4.校准4.1校准血清使用永和阳光（湖南）生物科技有限公司提供的多项免疫类标准液。其中包含ASO的定值。4.1.1校准血清的保存及稳定性：多项免疫类标准液储存在2-8℃至标签所示失效日期。第一次开启后，不要冷冻。在2-8℃下将瓶盖拧紧保存，标准品可以储存长达6个星期的时间。4.2校准方式：用去离子水将高值校准液按下表稀释，以水为零点，建立工作曲线。（建议使用多项免疫类高标）管号12345(原液：水)水1：31：12：1原液浓度0.0X/4X/22X/3X4.3校准间隔：建议每2周对试剂进行校准或者当符合以下条件时进行校准：1.试剂更换批号时进行校准2.当检测仪器进行大的维修保养更换检测相关部件时需要进行校准。4.4校准血清的溯源性：请参见《校准血清溯源文件》。5.质控5.1质控品：使用永和阳光（湖南）生物科技有限公司提供的多项免疫类质控，包括三个水平：多项免疫类质控（高值），多项免疫类质控（中值），多项免疫类质控（低值）。5.2质控规则：WESTGARD多规则质控，L-J质控图。6．仪器YY型号仪器。7．操作程序样品为血清。本法为两点速率法。参数见后附，附录A。试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。8．计算c＝ΧCO式中：c——测定血清ASO滴度，IU/mL；A测定——标本管吸光度；A标准——标准管吸光度；CO——校准液中ASO滴度，IU/mL；9．操作性能9.1精密度：A测定A标准文件号：第版页数5共5页XX医院检验科批内CV6%，批间CV10%。9.2准确度：测量结果在永和阳光多项免疫类质控血清靶值±2SD范围内。不同方法学试剂的质控结果之间会存在差异，使用时请确保质控选择与试剂的方法学保持一致。9.3分析灵敏度：血清与试剂用量之比为6:280:70时，试剂的分析灵敏度为1IU/mL，仪器上出现低于此浓度的值，结果按照1IU/dL处理。9.4分析测量范围：血清与试剂用量之比为6:280:70时，分析测量范围的上限为600IU/dL9.4可报告范围：当测定结果在分析测量范围以外时，稀释标本进行复查。要求稀释倍数≤8，以生理盐水进行稀释。报告结果为：稀释后的结果*稀释度。可报告范围：1~4800IU/dL9.5分析特异性（干扰）：若标本中含有以下浓度的干扰物，对检测结果无影响：乳糜＜0.3%、胆红素＜500uM、肝素钠＜100U/ml、血红蛋白＜5g/l、VC＜0.5g/l。10.方法学比较请参见《试剂方法学比对》11．参考区间：成人：0-180IU/mL，儿童0-250IU/mL。12．临床意义链球菌溶血素O（SLO）是链球菌的一种胞外产物，它能溶解细胞膜从而导致溶血。抗链球菌溶血素（ASO）是SLO的抗体。ASO测试能为早期的链球菌所导致的感染提供证据，主要应用于急性风湿热、链球菌感染后的血管球性肾炎、患有咽炎的个人以及其它急性感染。通常，与抗原对应的抗体在急性链球菌感染后三周左右达到峰值，并保持在峰值水平3-4个月，然后逐渐降低到正常水平。13．注意事项1.本品仅用于体外诊断。如与人体接触，应用大量水冲洗。2.如仪器内无指定波长，选择波长接近的数值输入。3.建议各实验室建立自己的正常值范围。4.不同批次的试剂请勿混用。5.试剂如需废弃，请用大量水稀释后再处理。14．参考文献1.Kameko.M.andKanai,M.:ModernMedicalLaboratory,16,732-735(1988).(inJapanese).2.JapaneseJournalofClinicalMedixine,Vol.53,Sup.Vol.2,121-125(1995).(inJapanese)3.中华人民共和国卫生部医政司编。全国临床检验操作规程（第三版）。