VFA的测定方法及标准曲线

VFA的测定方法及标准曲线VFA测定的方法指标挥发性脂肪酸VFA，包含乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸、正戊酸检测方法液相色谱法分析仪器高效液相色谱仪，HPLC（Agilent1200,安捷伦科技有限公司，美国）检测条件流动相：0.05%稀磷酸，流速0.7mLmin-1；检测器：紫外检测器，波长=210nm；分析柱：ShodexRSpakKC-811有机酸专用分析柱（6μm,8×300mm）+KC-G保护住（10μm,6×50mm），柱温箱恒定55℃；进样：自动进样器进样，进样量20μL；定量：基于峰面积的外标法。样品处理：过0.45μm水相滤膜后转移至棕色自动进样瓶。注：乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸、正戊酸出峰时间分别为15.15、17.30、19.18、20.64、23.43、28.00min。实验仪器高效液相色谱仪（Agilent1200,）VFAs标准系列配置选取分析纯或色谱纯的乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸、正戊酸六种标准品。首先配置5g/L的标准储备液5g/L（5000mg/L）标准储备液（混标）配置方法（100mL备用）乙酸丙酸异丁酸正丁酸异戊酸正戊酸密度1.0490.9920.9480.9590.9260.939取用量（g）0.5g0.5g0.5g0.5g0.5g0.5g取用体积（mL）0.4770.5040.5270.5210.5400.533定容体积（mL）100mL100mL100mL100mL100mL100mL然后再配制VFAs标准系列VFAs标准系列配制编号V-ST1V-ST2V-ST3V-ST4V-ST5V-ST6V-ST7浓度(mg/L)025501002505001000储备液体积（mL）00.040.080.160.40.81.6去离子水体积（mL）07.967.927.847.67.26.4总体积（mL）8888888VFAs标线通过对标准样品的VFAs测定，做出VFAs的标准曲线。整理后的数据VFAs标线VST1VST2VST3VST4VST5VST6VST7浓度（mg/L）025501002505001000乙酸(峰面积)023.347.893.3234469.7931丙酸(峰面积)022.946.489.6225451.9890异丁酸(峰面积)019.19568.6125.2303.1599.41185正丁酸(峰面积)035.49443.8186.6216.8434.5867异戊酸(峰面积)021.095745.384.2216435.8884正戊酸(峰面积)022.050443.281.2194.8394.1787做出标准曲线y=1.0732x-0.8372R²=1-20002004006008001000120002004006008001000乙酸y=1.1223x-1.6887R²=0.9999-20002004006008001000120002004006008001000丙酸y=0.843x-2.0563R²=0.9997-200020040060080010001200050010001500异丁酸y=1.1587x-3.7808R²=0.9998-20002004006008001000120005001000正丁酸注：纵坐标为浓度（mg/L），横坐标为峰面积。y=1.132x+2.289R²=0.999902004006008001000120005001000异戊酸y=1.2741x-2.0857R²=1-20002004006008001000120005001000正戊酸