大肠埃希氏菌CMCC44752肺炎克雷伯氏菌CMCC46117大肠埃希氏菌ATCC35218金黄色葡萄球菌ATCC29213金黄色葡萄球ATCC25923大肠埃希氏菌ATCC25922大肠埃希代菌ATCC44102金黄色葡萄球菌ATCC26113FDA/PI染色操作步骤1、溶液配制(1)0.65mol/L甘露醇配制:称1.1841g甘露醇加入10mL蒸馏水。(2)5mg/mLFDA配制:称25mgFDA加入1mL丙酮酸溶解,再加入4mL甘露醇,摇匀,避光4℃保存。(3)2mg/mLPI配制:称2mgPI加入1mL甘露醇,摇匀,4℃保存。2、染色(1)从冰箱中取出FDA及PI,复温摇匀,FDA尽量避光。(2)取羊膜放置于有0.5ml生理盐水的EP管中,加入8μLPI和10μLFDA,后用0.6ml生理盐水冲洗管壁,室温放置15min.,要求尽量避光;(3)1.5mlPBS冲洗,取出羊膜,置于载玻片上,用镊子整平,滴加少量PBS,盖上盖玻片。3、镜检(1)染色完成后,将片子放于小盒中避光,迅速送去检验。(2)由于荧光显微镜是倒置显微镜,所以,盖玻片面要朝下放置。