f建立孕中期产前筛查孕妇血清ADAM12-S中位数倍数参考区间的初步研究

·论著·建立孕中期产前筛查孕妇血清ADAM12-S中位数倍数参考区间的初步研究魏魏梁飞李晓泽魏岳峰胡志鹏段国和南洋【摘要】目的建立孕中期唐氏筛查孕妇血清解整合素金属蛋白酶12分泌型（adisintegrinandmetalloprotease,ADAM12-S)中位数倍数的参考区间。方法随机选择2008-2010年在本院自愿参加孕中期唐氏综合征(DS)产前筛查并经随访证实分娩健康儿的孕妇孕16-20周血清样本285份,用时间分辨荧光免疫分析法检测血清ADAM12-S浓度。用SPSS15.0软件构建ADAM12-S与孕周间的回归关系,选最优模型计算中位浓度,得到ADAM12-S中位数倍数(multipleofthemedian,MoM)值。探讨经校正后的ADAM12-SMoM值与孕妇的孕周、体重及年龄的相关性，选取最优模型求出经孕周及年龄校正后的MoM值。将ADAM12-S初始浓度与消除孕周及年龄影响后的最终MoM值进行曲线拟合,选取最优模型最终得到ADAM12-S初始浓度与校正后MoM值的关系方程，最终得出正常人群的MoM值参考范围。同时选择发生宫内呼吸窘迫、先兆子痫、早产的孕妇，测定其孕中期ADAM12-S浓度并转化成MoM值。利用正常人群的ADAM12-SMoM值参考范围预测发生宫内呼吸窘迫、先兆子痫、早产的灵敏度和特异性。结果ADAM12-S中位数(Y)与孕周(t)呈正相关,经曲线模型拟合后的方程为：Y=e(5.9668+0.0626*t)。ADAM12-SMoM值中位数(Y)与孕妇年龄位数（z）呈负相关，经线性模型拟合后的方程为:Y=－0.0317*z+1.8613；ADAM12-SMoM值中位数(Y)与体重中位数(w)存在负相关，但在回归分析中所有模型的回归系数不具有统计学意义。ADAM12-S初始浓度(x)与孕周、年龄校正后的最终MoM值(Y)的关系方程：Y=0.000723*x+0.1351。应用ADAM12-S初始浓度与经孕周和年龄校正后最终MoM值的关系方程求得正常人群ADAM12-S初始浓度转化为最终MoM值，根据最终MoM值求的正常人群的MoM值的参考值范围为（0.53，1.55）。根据正常孕妇ADAM12-S参考范围，预测宫内呼吸窘迫孕妇有较高的灵敏度和特异性，分别为84.3%和80.9%，预测先兆先兆子痫和早产的特异性高，均为80.4%，但灵敏度低分别为13.1%和10%。结论根据ADAM12-S初始浓度（x）与最终MoM值的关系方程的建立,初步探索正常人群ADAM12-SMoM值参考范围，对临床开展利用ADAM12-S筛查不良妊娠的研究有重要意义。【主题词】解整合素金属蛋白酶12分泌型；不良妊娠PreliminarystudyofestablishingthereferenceintervalvalueofthemedianofADAM12-SinsecondtrimesterWEIWei,LIANGFei,LIXiao-ze，WEIYue-feng,HUZhi-peng,DUANGuo-he，NANYang.MaternalandChildHealthHospital,Changzhi，Shanxi046011,ChinaCorrespondingauthor:Weiwei,Email:[e-mail]【Abstract】ObjectiveToestablishthereferencevalueofthemultipleofthemedian(MoM)valuesofadisintegrinandmetalloprotease12secretingtype(ADAM12-S)inthesecondtrimesterserumscreeningforDown’ssyndrome.MethodsTheparticipantsinthisstudywere285nomalpregnantwomenat16to20weeksgestationfrom2008to2010.TheconcentrationofADAM12-Swasdeterminedbytimeresolvedfluorescenceimmunoassay(TRFIA).TheregressiverelationshipbetweenconcentrationofADAM12-SandgestationalagewasanalyzedwithSPSS15.0softwareandthentheoptimalregressionmodelwasusedtocaculatetheMoMvalueofADAM12-S.WeanalyzethecorrelationgestationagebetweentheMoMvalueandtheageaswellasbodyweightofparturients,finallytheMoMvaluewasadjustedonthebasisofthegestationalageandageparturients.ThecurvefittingofADAM12-SconcentrationandtheadjustedMoMvaluewereconductedandthemodelwasoptimizedfortheequationbyeliminatingtheinfluenceofgestationalageandageofparturients,thewegettheADAM12-S'referencerangeofnormalpregantwomen.WeanalyzetheADAM12-Sconcentrationofpregnantwomenofsecondtrimesterwithpreeclampsia、prematuredeliveryandintrauterinerespiratorydistress,whichwereconvertedintoMoMvalue.AccodingtoADAM12-S'referencerange,wecaculatethesensitivityandspecificityofpredictingadversepregnancyreferredtoabove.ResultApositivecorrelationbetweentheMoMvalueofADAM12-S(Y)andgestationalage(t)wasshown,andtheequationwasY=e(5.9668+0.0626*t),whileanegativecorrelationbetweenMoMvalueofADAM12-S(Y)andthemedianofparturients’age(z)wasfound,andtheequationwasY=-0.0317*z+1.8613.AnegativecorrelationbetweentheMOMvalueofADAM12-S(Y)andbodyweight(w)wasfound,butnostatisticalsignificancewasshowninregressiveanalysis.TheequationofconcentrationofADAM12-S(Y)andthefinallyadjustedMoMvalue(x)wasY=0.00007228*+0.1351，andtheinitialMoMvaluewasconvertedintofinalMoMvalueaccordingtowhichweestabishedthereferenceintervalsoftheMoMvalue:(0.53,1.55).AccordingtotheADAM12-Sreferencerange,Thesensitivityandspecificityofpredictingtrauterinerespiratorydistressis84.3%and80.9%.,Thesensitivityandspecificityofpredictingpreeclampsiais13.1%and80.4%,Thesensitivityandspecificityofpredictingprematuredeliveryis10%and80.4%.ConclusionAccordingtotheequationbetweentheinitialconcentrationofADAM12-SconcentrationandtheadjustedMoMvalueestablished,weanlaysethereferencerangeoftheMoMvaluewhichshouldbeconsiderablyimportantforscreeningadversepregnancyinsecondtrimesterinprimaryclinicalhospitalfornewborn.【Keywords】ADAM12-S;adversepregnancyADAM12是ADAM家族成员之一，有两种形式：一种是膜结合形式，称为ADAM12-L；另一种为分泌形式，称为ADAM12-S。ADAM-12S参与调解蛋白水解、细胞粘连、细胞融合、信号转导等一系列过程[1]。它由胎盘滋养层细胞产生，在胎盘中呈高水平表达并能在进入血循环时检测到，但在羊水和其它体液中检测不到[2]。ADAM12结合并分解胰岛素样生长因子结合蛋白-3（IGFBP-3）、IGFBP-5而影响IGF的生物利用度，因而有可能在胎盘的生长和功能中起重要作用[3]。目前ADAM12-S作为一项新的指标被建议纳入染色体异常疾病的筛查项目中。有报道证实，ADAM12-S在孕中期是一种有效的筛查指标,尤其结合三联筛查将大大提高唐氏综合症的检出率,提高诊断准确率[4]。同时，研究证实，该标记物也可以用于先兆子痫、胎儿生长受限和早产的早期检测。本研究通过建立孕中期产前筛查孕妇血清中ADAM12-S初始浓度与最终MoM值关系方程，对正常孕妇孕中期ADAM12-SMoM值参考范围进行了初步探讨，同时选择发生宫内呼吸窘迫、先兆子痫、早产的孕妇，测定其孕中期ADAM12-S，分析ADAM12-S在预测孕妇发生不良妊娠中的作用。1资料与方法1.1研究对象山西省长治地区2008-2010年在本院遗传室自愿参加孕期中期常规三联产前筛查、随访分娩健康儿的妊娠16~20周的孕妇285例，发生早产的孕妇30例、先兆子痫30例，宫内呼吸窘迫32例。年龄19-37岁，平均25.7岁,汉族，无糖尿病病史和吸烟史，无唐氏等缺陷儿妊娠史及家族史。孕妇筛查资料保存完整。孕周计算方法：若月经规律则按末次月经时间推算；若月经不规律则按照早期B超测量胎儿头臀长推算。1.2标本贮存采集空腹静脉血于不含任何抗凝剂的采血管内（EDTA抗凝剂对ADAM12的检测影响很大[5]），在2h内以1500*g离心分离血清置-70℃保存。血清标本均室温下复融1次,且为非高脂或高胆红素血清标本。1.3ADAM12-S检测方法试剂盒及1420型时间分辨荧光免疫分析仪购自芬兰Wallac公司,按照试剂盒说明书进行操作。1.4统计学分析用SPSS15.0统计软件,通过分析血清ADAM12-S中位浓度与孕龄间的回归关系，综合比较曲线拟合模型回归系数P值、校正的拟合优度AdjR,选取最优模型计算ADAM12-S中位浓度,从而得到ADAM12-S中位数倍数(multipleofthemedian,MoM)值。探讨MoM值与孕周年龄的关系，选取最优模型求出经孕周及年龄校正后的MoM值。将ADAM12-S初始浓度与经孕周、年龄校正后的MoM值进行曲线拟合，选取最优模型得到ADAM12-S初始浓度与校正后MoM值的关系方程。最后求出孕中期正常孕妇ADAM12-SMoM值的参考范围。选择发生宫内呼吸窘迫、先兆子痫、早产的孕妇