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微生物学基础知识微生物学基础知识微生物是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。(一般个体0.1mm)特点：个体微小、结构简单、进化地位低等微生物包括的种类：微生物包括的种类：n原核生物类：单细胞---细菌、放线菌、支原体、衣原体等n真核生物类：单细胞----酵母多细胞----霉菌、原生动物、藻类n非细胞类：病毒、类病毒、朊病毒微生物的五大共性：体积小、比面大（最基础特征）吸收多、转化快生长旺、繁殖快适应强、易变异分布广、种类多如何控制有害菌控制有害菌的措施杀灭抑制除菌消毒(部分杀灭)灭菌(彻底杀灭)防腐(抑制霉腐微生物)化疗(抑制宿主体内病原菌)杀菌溶菌注意以下三个概念的区别：n灭菌（sterilization）是指对所有微生物的杀灭作用，包括所有微生物的繁殖体和芽孢或孢子。n消毒（disinfection）是指对病原微生物繁殖体的杀灭作用，但不能杀死芽孢等全部微生物。n防腐（antisepsis）是指抑制霉腐微生物的生长繁殖，从而达到防止物品发生霉腐的措施。灭菌灭菌物理方法化学方法干热灭菌过滤灭菌射线灭菌湿热灭菌气体灭菌药液灭菌介绍几种常用的灭菌方法n干热灭菌法n湿热灭菌法n辐射灭菌法n过滤灭菌法n气体灭菌法干热灭菌法用于能耐受较高温度，却不宜被蒸汽穿透，或者易被湿热破坏的物品的物品的灭菌。由于空气热穿透力差，所以温度高，时间长。n焚烧法：是将被灭菌物品在火焰中燃烧，使所有的生物质碳化。简单、彻底。如接种环、镊子、传染病人衣物。n干燥热空气灭菌法：将物品放入烘箱内，然后升温至150℃—170℃，维持1—2小时。适用于玻璃、陶瓷和金属物品灭菌。湿热灭菌法湿热灭菌法：在饱和蒸汽、沸水或流通蒸汽中进行灭菌的方法。具有温度低、时间短、灭菌效果高的特点。原理：n蒸汽冷凝会放出潜热；n饱和水蒸汽穿透力强；n湿热易破坏细胞内蛋白质大分子的稳定性，主要破坏氢键结构。常压法n巴氏消毒法eg：牛奶n煮沸消毒法eg：饮用水n间歇灭菌法eg：塑料餐具加压法n常规加压蒸汽灭菌法条件：121℃（0.1MPa）15—20min115℃（0.1MPa）20-30min。适用：耐高温物品，玻璃仪器、含水或不含水的物品n连续加压蒸汽灭菌法（又称“连消法”）条件：135—140℃加热5秒—15秒，保温5-10分。影响湿热灭菌的因素n细菌的种类和数量不同细菌，同一细菌的不同发育阶段对热的抵抗力有所不同。多数细菌和真菌的营养体在60℃，5~10分钟即死亡；酵母菌和真菌的孢子稍耐热，80℃以上才会死亡；而细菌的芽孢一般在120℃，维持15分钟才能杀死。细菌数越少，灭菌时间越短。n药物性质与灭菌时间灭菌温度越高灭菌时间越短。但应根据被灭菌物的稳定性，应在达到有效灭菌的前提下尽可能降低灭菌温度或缩短灭菌时间n蒸汽的性质蒸汽有饱和蒸汽、湿饱和蒸汽和过热蒸汽。饱和蒸汽热含量较高，热穿透力较大，因此灭菌效力高。湿饱和蒸汽带有水分，热含量较低，穿透力差，灭菌效力较低。过热蒸汽温度高于饱和蒸汽，但穿透力差，灭菌效率低。n介质的性质制剂中含有营养物质，如糖类、蛋白质等，增强细菌的抗热性。细菌的生存能力也受介质pH值的影响。一般中性环境耐热性最大，碱性次之，酸性不利于细菌发育。辐射灭菌法n紫外线灭菌法nγ射线灭菌法紫外线灭菌法定义：是指用紫外线照射杀灭微生物的方法。原理：紫外线作用于生物体的DNA，促其形成胸腺嘧啶二聚体，造成菌体死亡。另外，它可使空气中氧形成臭氧（O3），臭氧也会与生物体的活性成分发生氧化反应，造成它们失活。适用范围：由于紫外线进行直线传播，可被不同的表面反射，穿透力微弱，但较易穿透清洁空气及纯净的水。因此只适用于物体表面、洁净室的空气及水的灭菌，而不适用于药液的灭菌、固体物质深部的灭菌。用紫外线灭菌时要注意以下问题n紫外线的杀菌力，随使用时间增加而减退。因此一般使用时间达到额定时间70％时应更换紫外线灯管，以保证杀菌效果。n紫外线的杀菌作用因菌种而异。n紫外线照射通常按相对湿度为60％的基础设计，室内湿度增加时，照射量应相应增加n紫外线灭菌效果与照射的时间长短有关。n紫外线灭菌照射的时间应视空间大小而定，而且距离不能太远，一般为30cm～1m左右。臭氧消毒法原理：臭氧（O3）在常温、常压下分子结构不稳定，很快自行分解成氧（O2）和单个氧原子（O），后者具有很强的活性，对细菌有极强的氧化作用，臭氧氧化分解了细菌内部氧化葡萄糖所必须的酶，从而破坏其细胞膜，将它杀死。多余的氧原子则会自行重新结合成为普通氧分子（O2），不存在任何有毒残留物，故称为无污染消毒剂。它不但对各种细菌（包括肝炎病毒、大肠埃希菌、绿脓杆菌及杂菌等）有极强的杀灭能力，而且对霉菌也很有效。过滤灭菌法是用过滤方法除去活的或死的微生物的方法，是一种机械除菌方法，这种机械叫除菌过滤器。主要用于对热不稳定的药物溶液、气体、水的灭菌。繁殖型细菌很少小于1μm的，芽孢大小为0.5μm或更小些。所以，对于以过筛作用滤过的滤器，其孔径大小必须小到足以阻止细菌和芽孢进入滤孔之内。常用除菌滤器有微孔薄膜器，折叠式纤维素滤棒，一般选用孔径0.22μm。高压蒸汽灭菌（热压灭菌）超过一个大气压时，水的沸点高于100℃，反之亦然。高压蒸汽灭菌就是通过加压提高蒸汽温度，灭菌效果最好。它简便、经济、可靠、无毒，是最可靠、应用最广泛的灭菌法。此法适用于耐高温和潮湿的物品。常用条件为：115.5℃、30min；121.5℃、20min；126.5℃、15min。注意事项a.必须完全排出灭菌器内的空气。否则会影响灭菌器内温度达到规定的要求。b.注意被灭菌物品的温度。灭菌器内温度与被灭菌物品的温度一般是一致的，但在蒸汽输入过快时，后者可能低于前者，所以升温时要有一定的预热时间。另外，降温过快易引起玻璃炸裂。因此，对于一种灭菌产品，应制定一固定的灭菌曲线（像冻干曲线一样）。c.定期检查灭菌器内温度的准确性。类别名称浓度消毒用途性质酚类甲酚皂（来办）3-5%地漏溶与水，呈碱性反应，有除垢作用，杀菌力强、有毒性，消毒手有麻木感醇类乙醇70－75％皮肤、工具、设备、容器能使蛋白质变性，有挥发性，无残留，作用时间短，对芽孢无效醛类甲醛每立方米用37－40％甲醛液8－9ml，加4－5g高锰酸钾熏蒸无菌室能破坏细菌繁殖体及许多芽孢、病毒、真菌；有挥发性，对眼睛及皮肤有刺激性。表面新洁尔灭0.1－0.2％皮肤、工具破坏细胞膜，使蛋白质氧化剂过氧乙酸0.5％皮肤消毒广谱杀菌剂，能杀死细菌繁殖体、芽孢、真菌与某些病毒；强氧化剂，20％时对皮肤、金属有较强腐蚀性。稀释液只能存放三天。活性剂（苯扎溴铵）设备、容器变性，对革兰氏阴性菌不敏感，具清洁与消毒双生作用，对皮肤刺激性少，遇合成洗涤剂活性减弱杜灭芬（消毒宁）0.05－01.％水溶液皮肤性质稳定，易溶于水，抗菌谱窄，遇合成洗涤剂活性减弱洗必泰0.02－0.05％皮肤对革兰氏阳、阴性菌有效，能快速杀灭繁殖体，无毒性，但不能与阴离子清洁剂等物质、升汞、肥皂合用选择消毒剂的原则n在使用条件下高效、低毒、无腐蚀性，无特殊的嗅味和颜色，不对设备、物料、产品产生污染n在有效抗菌浓度时，易溶或混溶于水，与其他消毒剂无配伍禁忌n对大幅度温度变化显示长效稳定性，贮存过程中稳定n消毒剂品种应定期更换，防止产生耐药菌株n价格便宜除热原技术热原是指注射后能引起人体特殊致热反应的物质。是微生物细胞壁破裂释放出的一种内毒素，是由磷脂、脂多糖和蛋白质组成的复合物。热原的危害人体被注入含有热原的注射液后，大约半小时就能产生发冷、寒战、体温升高、恶心呕吐等不良反应，严重者出现昏迷、虚脱，甚至有生命危险。热原的性质a耐热性：100℃加热不降解，在180℃3～4小时、200℃60min、250℃30～45min才能彻底破坏。b可滤过性：热原体积小（约1~5nm），可通过一般的滤器和微孔滤器。可被活性炭吸附而除去。c水溶性：热原溶于水d不挥发性：热原可随水蒸气进入注射用水中。e其他：可被强酸、强碱、强氧化剂、超声波破坏。除热原的方法a高温法适用于针筒、其它玻璃器皿。洗涤后，干热250℃、30min。b酸碱法适用于玻璃容器、用具。用洗液或稀NaOH液处理。c吸附法适用于注射液。常用的吸附剂有活性炭、白陶土等。d滤过法适用于注射液。滤过法包括交联葡聚糖凝胶滤过、反渗透法滤过、超滤法滤过。谢谢大家