微生物病理技能训练教程

0目录第一部分微生物病理基础知识...............................................................................11－1鞭毛菌亚门及其所致病害的特点...............................................................11－2接合菌亚门及其所致病害的特点...............................................................21－3子囊菌亚门及其所致病害的特点...............................................................31－4担子菌亚门及其所致病害的特点.................................................................61－5半知菌亚门及其所致病害的特点...................................................................7第二部分微生物病理实验基本操作.........................................................................92－1植物病理徒手制片技术.............................................................................92－2培养基的配制和灭菌...................................................................................112－3植物病原菌的分离和培养.......................................................................142－4真菌孢子的萌发...........................................................................................172－5植物病原物的接种.......................................................................................192－6植物病原生物绘图技术.................................................................................21第三部分微生物病理技能训练.................................................................................22实训一植物病原细菌观察...................................................................................22实训二鞭毛菌亚门真菌及其所致病害症状观察..................................................25实训三接合菌亚门真菌及其所致病害症状观察...............................................28实训四子囊菌亚门真菌及其所致病害症状观......................................................29实训五担子菌亚门真菌及其所致病害症状观察...............................................34实训六半知菌亚门真菌及其所致病害症状观察................................................37微生物病理技能训练教程1微生物病理技能训练教程第一部分微生物病理基础知识1－1鞭毛菌亚门及其所致病害的特点1、鞭毛菌亚门的主要特点(1)鞭毛菌亚门真菌的共同特征是无性产生具1-2根鞭毛的游动孢子，因此通常称作鞭毛菌。(2)鞭毛菌有性产生休眠孢子囊和卵孢子。(3)鞭毛菌营养体从原质团到无隔菌丝体，属低等真菌。(4)鞭毛菌大多具有水生习性，因此只有在高湿、多雨、低洼积水和通风透光不好的条件下，侵染植物导致病害。(5)鞭毛菌繁殖时，有的整个营养体全部转变为繁殖体，称为整体产果，如壶菌；有的只是营养体的一部分转变为营养体，称为分体产果。(6)游动孢子囊形态多样，均可释放游动孢子。(7)游动孢子具1-2根鞭毛。鞭毛有茸鞭和尾鞭两种。每个游动孢子具单鞭或双鞭两种类型。(8)鞭毛(Flagellum)的结构是9+2型。既鞭杆是由9根纤丝组成一个圆筒型体，圆筒型体中心还有2根纤丝。纤丝之间填充有胶质鞘。共31条亚纤丝。2、鞭毛菌亚门的致病特点(1)常见症状：腐烂、斑点、猝倒、流胶。(2)果实上腐烂使果变褐色、呈软腐状，病部长出白色绵毛状或灰白色霜状霉层。(3)茎基和根部被害使皮层变褐色腐烂。(4)叶上斑点，若由疫霉引起，病斑较大，暗褐色圆形水渍病斑；若由霜霉引起，病斑较小，黄色至褐色，边缘不明显，病斑受叶脉限制呈多角形，后期在病斑上长出白色至灰白色霜状霉层。(5)病菌以卵孢子越冬，由孢子囊和游动孢子引起初侵染和再侵染，借雨水和气流传播。(6)潜伏期短，可多次再侵染，一般在低温多雨潮湿多雾、昼夜温差大的气候条件下，病害容易发生。3、与园艺植物有关的鞭毛菌微生物病理技能训练教程2(1)根肿菌属（Plasmodiophora）由根肿菌属的病菌引起的，在病组织内这些呈鱼卵状排列的是病菌的休眠孢子囊。休眠孢子囊在寄主细胞内分散呈鱼卵块状，萌发时产生前端有2根鞭毛长短不一的游动孢子。休眠孢子囊对不适宜的环境适应性强，能在土中存活多年，是病菌的初侵染源。（2）腐霉属（Pythium）①腐霉是低等的鞭毛菌，无性繁殖在菌丝顶端形成孢子囊，孢子囊近球形或不规则形，成熟后一般不脱落，萌发时产生游动孢子。②有性繁殖在藏卵器内形成一个卵孢子。③如引起黄瓜、茄子等幼苗瘁倒病的病菌，都属于腐霉属。(3)疫霉属（Phytophthora）①孢子囊在孢囊梗上，孢囊梗无限生长。②孢子囊卵圆形，成熟时脱落，萌发时产生游动孢子，或直接萌发长出芽管。③有性生殖在藏卵器内形成一个卵孢子。(4)霜霉科（Peronosporaaceae）①高等的鞭毛菌，都是植物体上的活体寄生菌，菌丝蔓延在寄生的细胞间，以吸器伸入寄主的细胞内吸收养分。②孢囊梗有限生长，呈树枝状分枝。③孢子囊在孢囊梗上形成，孢子囊卵圆形，顶端乳头状突起，萌发产生游动孢子，或直接长出芽管。④有性生殖形成卵孢子。(5)白锈菌属(Albugo)①活体寄生物，菌丝在寄主细胞间蔓延，以吸器伸入寄主细胞内吸收营养。②孢囊梗不分枝，短棍棒状，密集在寄主表下，排列成栅栏状，每一孢囊梗顶端串生孢子囊。③孢子囊椭圆形，成熟后寄主表皮散出如白锈粉。④卵孢子壁厚，表面有瘤状突起。1－2接合菌亚门及其所致病害的特点1、接合菌亚门的主要特点（1）菌丝体无隔多核，细胞壁由甲壳质组成。（2）无性生殖形成孢子囊，产生不能游动的孢囊孢子。微生物病理技能训练教程3（3）有性生殖形成接合孢子。2、接合菌亚门的致病特点其多为腐生菌，广泛分布于土壤和粪肥中，少数为弱寄生菌，可引起果实贮藏期腐烂。已知接合菌亚门分2个纲、7个目、约600个种。与园艺植物病害有关的是接合菌纲、毛霉目、根霉属。3、与园艺植物有关的接合菌根霉菌（Rhizopus）（1）菌丝发达，分布在基物上和基物内，有匍匐丝和假根。（2）孢囊梗从匍匐丝上长出，顶端形成孢子囊，内生孢囊孢子，孢子囊壁破散出孢囊孢子。（3）有性生殖形成接合孢子（不常见）。（4）黑根霉引起贮藏甘薯软腐病。1－3子囊菌亚门及其所致病害的特点1、子囊菌亚门的主要特点（1）营养体全世界发现32,000种，占真菌的1/3，都是高等真菌，寄生，形态千差万别，但共同点是形成子囊。子囊(Ascus)，子囊孢子(Ascospore)。简单的仅为单细胞，但大多数有发达的菌丝体，菌丝有隔，每个细胞有一个、二个、多个核，壁以几丁质为主，营养体可以形成厚垣孢子。有的菌丝可以直接形成粉孢子，芽孢子。很多可以形成营养菌丝的组织体。（2）子囊菌的无性繁殖产生分生孢子或孢子器，非常发达，形状多样，圆形，卵形，棒形，丝状，镰刀形(新月形)，蜡肠形，有单孢，双孢，多孢。有的有色，有的无色。分生孢子梗：可以分枝或不分枝，散生，丛生，束生，(孢梗束Coremium)，有的分生孢子梗着生在简单的分生孢子痤上(Sporodochium)，有的形成在分生孢子盘上(Acervulus)，有的形成分生孢子器上(Pycnidium)。分生孢子作用：在一个生长季可以反复发生，是再侵染的来源，“可以远距离传播”，有的高等子囊菌在一生中仅发生无性，无有性。（3）子囊菌的有性繁殖微生物病理技能训练教程4①子囊：子囊形状有圆形，椭圆形或棒状。子囊壁有的单层壁，有的双层壁,有的囊壁成熟后溶解，有的不溶，有的子囊顶有孔口，有的无孔口。子囊有的单个散生，有的多个并列，有的丛生。子囊之间的有的有侧丝。②子囊孢子（Ascospore）：形态多种多样，圆形，椭圆形，丝状，单胞，双胞，多胞，无色或有色。在子囊内排列的有散生，单列，双列，并列，螺旋形排列。③子囊果（Ascocarp）：在子囊外部具一菌组织包被的壳，这种类型的子实体称子囊果。子囊果的类型A、闭囊壳—完全封闭呈球形。B、子囊壳—球形或瓶状，顶端有孔口。C、子囊盘—盘状或杯状，顶端开口大。D、子囊座—子囊着生在子座的空腔内。2、与园艺植物有关的子囊菌(1)外囊菌属（Taphrina）无子囊果，子囊平行排列在寄主表面呈栅状。无性繁殖是子囊孢子在子囊内芽殖产生芽孢子，芽孢子还可继续芽殖。常见病状：畸形，叶片皱缩、果实膨大等。(2)白粉菌目(Eryshiphales)①白粉菌目的真菌一般称作白粉菌，引致各种植物白粉病(Powderymildew)。②菌丝白色，大都表生，产生吸器吸取植物营养。③主要寄生在叶片上，有的发生在新梢或芽上。在病部形成白粉或小黑点。④无性世代：非常发达，由菌丝形成分生孢子梗和分生孢子。分生孢子链生或单生，不断产生。形成白粉。⑤有性世代：寄生后期在菌丝的上部形成闭囊壳(小黑点)，有附属丝，便于传播。闭囊壳内有一个或多个子囊，子囊内有2-8个子囊孢子，子囊孢子单孢无色。⑥寄生专化性：专性寄生，有生理小种，寄主有8435种。有的白粉菌只有一种寄主，而一种寄主可寄生多种白粉菌。如：桑树有桑表白粉，桑里白粉。柞树有七种白粉病。⑦白粉病发生的条件：对温度要求不严格，干旱地区、潮湿地区都可发生，白粉菌的孢子在水中反而不易发芽或破裂，在潮湿的空气中易发芽，该孢子渗透压很高，36-68个大气压，因此很易吸收周围的空气中的水分。⑧白粉菌分属依据：闭囊壳附属丝的形状和壳内子囊的数目。白粉菌（闭壳菌）：菌丝以吸器吸收营养；子囊着生在闭囊壳内，外部有附着丝；菌丝分化成分生孢子梗，顶端串生分生孢子，呈白粉状故名白粉菌。微生物病理技能训练教程5(3)核菌①主要特点A、这类真菌种类多，形态变化大，子囊着生在具有孔口的子囊壳内。B、子囊壳散生或聚生在寄主的组织中，子囊内具8个子囊孢子。C、病害流行是分生孢子多次再侵染。D、病害症状：引起树皮腐烂、溃疡、瘤肿和枝枯；侵害果实引起腐烂和轮纹等症状。②主要种类A、小丛壳属Glomerella子囊壳小，球形，半埋生在子座内；子囊棍棒状，无侧丝；子囊孢子单孢无色，长椭圆形，稍弯曲。有性世代在自然界很少发生，无性世代为炭疽菌属(Colletotrichum)。如棉花炭疽病G.gossypii，苹果梨炭疽病G.cingulata。B、黑