LC-2010AHT型高效液相色谱仪验证方案

第1页技术标准分发部门制造总监□动力设备部□片剂车间□包装车间□质量受权人□物流部□提取车间□研发部□质量管理部□QA部门□眼用制剂车间□财务部□生产技术部□中心化验室□胶囊、颗粒剂车间□办公室□LC-2010AHT型高效液相色谱仪验证方案文件编号：复印件编号：验证部门：地点：起草人：日期：验证领导小组会签项目负责人：日期：质量管理部负责人：日期：生产技术部负责人：日期：制造总监：日期：验证记载批准日期执行日期010203LC-2010AHT型高效液相色谱仪验证方案STP-VP第2页目录：1、概述2、验证目的3、验证范围4、验证人员5、仪器描述6、验证条件7、验证内容与方法8、验证数据分析9、验证结论与偏差说明10、再验证11、附件LC-2010AHT型高效液相色谱仪验证方案STP-VP第3页1、概述本品为岛津公司生产的产品，为了确保使用该仪器检测数据真实可靠，确认该仪器的各项指标能达到该仪器所设计的性能指标，计划对该仪器进行必要的验证。2、验证目的按照GMP的要求，需要对该仪器进行安装确认、运行确认、性能确认、以确定目前的实验室环境能满足该仪器的正常操作和使用，以确认高效液相色谱仪的运行、性能确认符合相应的要求，是否可满足验证所接收标准和日常分析测试工作的需要。3、验证范围本方案适用于LC-2010AHT型高效液相色谱仪的验证。4、验证人员4.1验证工作小组4.1.1负责验证方案的制定并组织实施。4.1.2负责收集验证、试验记录，并对结果进行分析，起草验证报告。4.1.3负责验证的准备工作4.1.4负责根据本验证方案进行具体的实施。4.2动力设备部4.2.1负责验证所需仪器、设备的安装、调试及矫正。4.2.2负责量具的检验及校正。4.3验证工作人员名单部门姓名职务备注中心化验室中心化验室中心化验室动力设备部5、仪器描述5.1仪器型号：设备编号：5.2仪器组成本品是根据质量控制的目的和要求购置的精密仪器，主要用于样品的含量测定、鉴别、LC-2010AHT型高效液相色谱仪验证方案STP-VP第4页有关物质的检查等，该仪器由输液泵、在线脱气机、自动进样器、紫外检测器、柱温箱及ClassVP色谱工作站、电脑、打印机等组成。6、验证条件6.1验证前必须对设备所用仪表进行校验，且在有效期内。6.2验证试验过程中所用的纯化水、标准溶液、对照品、试剂等在使用前必须符合规定。6.3验证试验所用的清洁器具和玻璃容器应按标准规定清洁且符合要求。7、验证内容与方法7.1验证依据及标准：《药品GMP指南》2010年版、《高效液相色谱仪标准操作规程》、《中国药典》2010年版7.2验证判断标准：7.2.1运行确认判断标准：安装确认认可后，在不使用试样的条件下，确认该仪器运行正常。7.2.2性能确认判断标准：符合《中国药典》2010年版附录要求。7.3、验证确认7.3.1再确认仪器名称：型号：生产厂家：所在部门和房间：7.3.1.1检查有关资料完整性。名称是否齐全存放处高效液相色谱仪使用说明书紫外-可见光检测器使用说明书柱恒温控制箱使用手册合格证保修卡备件清单检定合格证仪器使用记录仪器操作规程LC-2010AHT型高效液相色谱仪验证方案STP-VP第5页7.3.1.2安装场地项目要求检查情况位置应无强震动源,无强电磁干扰源,通风良好，无明火环境洁净度室内应保持清洁,无腐蚀性气体温度20～30℃，全天温度变化较小相对湿度20～85%电路电源AC220V±22V、50Hz±1Hz接地应接地电源线与插孔吻合结论检测人日期年月日复核人日期年月日7.3.2运行确认：严格按《高效液相色谱仪标准操作规程》进行操作，对仪器进行运行试验，确认其运转性能，并将检查结果填于下表中。操作步骤合格标准结果打开/关闭电源1.按下电源开关“打开”电源，再次按下电源开关“关闭”电源2.首次打开电源开关，显示矩阵中所有点，所有指示灯亮起3.自动检测内存，通过后，短暂显示控制程序版本(ROM版本)4.显示ROM版本后，出现初始屏幕，状态指示灯变绿色5.以上程序完成后，可对仪器进行操作操作前准备仪器出厂前，使用氮对泵和泵内部的管路进行清洗并已干燥。在最初使用(安装后)前，必须先使用甲醇运行一段时间泵，以排出泵流路中的空气，然后才可以接收用于分析LC-2010AHT型高效液相色谱仪验证方案STP-VP第6页的流动相。1.将约100ml甲醇倒入量杯中；将吸滤头放入量杯中；将SUS管一端连接到泵出样口，另一端放入量杯中；将排液管一端连接到排液管连接出入口，另一端放入废液瓶中2.打开电源，仪器自动完成初始化3.将排液阀旋钮逆时钟旋转180°以打开排液阀，按“purge”，泵运行，泵指示灯亮4.清洗完成后，按一次“func”，以改变流速，将流速设定为5ml/min,顺时针方向旋转排液阀旋钮关闭排液阀5.按“pump”，泵运行，泵指示灯亮；约15分钟后，再次按“pump”，泵停止，泵指示灯灭6.以上程序完成后，操作的准备工作完成检查压力值在开始操作前检查压力上下限的值1.将流动相倒入贮液瓶，吸滤头放入贮液瓶中，排液管的一端放入废液瓶中2.打开排液阀，逆时钟方向旋转排液阀旋钮180°，按“CE”返回初始屏幕，检查显示压力值是否在-0.3至0.3MPa之间3.检查压力上下限的值是否合适，必要时更改这些值到符合要求4.按“purge”以记录的流速开始送液，观察从排液管末端流出的流动相约10秒钟，流动相应持续流动且没有气泡，按“purge”泵停止，泵指示灯灭仪器校验应经过技术监督部门校验，结果符合规定结论检测人日期年月日复核人日期年月日7.3.3性能确认7.3.3.1高压恒流泵LC-2010AHT型高效液相色谱仪验证方案STP-VP第7页7.3.3.1.1流量准确度可执行标准：＜±3%（以蒸馏水为标准）测试方法：将输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以蒸馏水为流动相，将流速稳定后，分别设定0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0ml/min六段，在流动相排出口用已恒重的比重瓶收集流动相，同时计时收集10分钟，称重，查表，即得。流量设定值（ml/min）0.51.01.52.02.53.010分钟收集量（g）收集量计算查表后的体积(ml)实际每分钟流出量（ml/min）流量准确度（%）结论检测人日期年月日复核人日期年月日7.3.3.1.2流量精确度可执行标准：＜±0.3%（0.997ml/min～1.003ml/min，以蒸馏水为标准）测试方法：将输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以蒸馏水为流动相，将流速稳定后，设定流量为1.0ml/min，在流动相排出口用已恒重的比重瓶收集流动相，同时计时收集10分钟，称重，查表，即得，共收集5次。次数1234510分钟收集量（g）收集量计算查表后的体积(ml)实际每分钟流出量（ml/min）流量精确度（%）结论检测人日期年月日复核人日期年月日7.3.3.1.3压力范围可执行标准：±0.2MPa设定值LC-2010AHT型高效液相色谱仪验证方案STP-VP第8页测试方法：在进样阀的出口接一个两通，再将两通的另外一端用OD1.6的盲管封住。启动泵，使压力升至所设定的压力，观察仪器是否自动停泵。设定值分别为：10.0Mpa、20.0Mpa、30.0Mpa结论：检测人：日期：年月日复核人：日期：年月日7.3.3.2柱温箱7.3.3.2.1温度准确度可执行标准：＜±2℃测试方法：分别依次设定温度25℃、40℃后待温度稳定后读取示值。温定设定值25℃40℃显示温度（℃）温度准确度（℃）结论：检测人：日期：年月日复核人：日期：年月日7.3.3.2.2温度精密度可执行标准：＜±1℃测试方法：分别依次设定温度40℃后待温度稳定每小时后读取示值一次。温定设定值40℃时间显示温度（℃）温度准确度（℃）结论：检测人：日期：年月日复核人：日期：年月日LC-2010AHT型高效液相色谱仪验证方案STP-VP第9页7.3.3.3检测器7.3.3.3.1噪声与漂移可执行标准：噪声＜±1.0×10-2mv(250nm)，漂移＜±5.0×10-2mv/hr测试方法：将仪器各部连接好，紫外检测器调至250nm，流动相为甲醇，流速为1.0ml/min，待柱平衡稳定后，进行基线的测试，测试时间半小时，观察并记录测试结果。测试图谱见基线漂移测试。结论：检测人：日期：年月日复核人：日期：年月日7.3.3.3.2系统适用性试验可执行标准：精密度（峰面积）RSD≤2.0%；分离度应大于1.5；测试方法：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸盐缓冲液（磷酸二氢钾6.8g，加三乙胺5ml,用水溶解并稀释至1000ml）－乙腈（85：15）（用磷酸调PH值至3.0）为流动相，检测波长为286nm。精密称取于105℃干燥至恒重的加替沙星对照品适量（来源中国药品生物制品检定所）加流动相制成每1ml中含75μg的对照品溶液。精密量取上述溶液10μl注入色谱仪中，连续进样5次，记录色谱图，计算，即得。A精密度（峰面积）记录及计算。次数12345分离度峰面积峰面积RSD%结论检测人日期年月日复核人日期年月日LC-2010AHT型高效液相色谱仪验证方案STP-VP第10页7.3.3.3.3线性可执行标准：相关系数≥0.999。测试方法：用加替沙星滴眼液对照品100μg贮备液经精密稀释，制备5份不同浓度的供试样品，依次为10μg、20μg、50μg、80μg、100μg以测得的峰面积作为被测物浓度的函数作图，观察是否呈线性，再用最小二乘法进行线性回归，记录色谱图。数据要求：列出回归方程、相关系数和线性图。结果见图谱。结论：检测人：日期：年月日复核人：日期：年月日7.3.3.3.4重现性：相同样品，不同实验室设备检验结果对比及同一实验室不同设备检验结果对比，计算其RSD值。样品名称：操作方法：色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸盐缓冲液（磷酸二氢钾6.8g，加三乙胺5ml,用水溶解并稀释至1000ml）－乙腈（85：15）（用磷酸调PH值至3.0）为流动相，检测波长为286nm。对照品溶液的制备:精密称取于105℃干燥至恒重的加替沙星对照品适量（来源中国药品生物制品检定所）加流动相制成每1ml中含75μg的对照品溶液。供试品溶液的制备:精密量取本品7.5ml，用流动相稀释至100ml，摇匀，做为供试品溶液。测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。结果见报告书。批号公司自行检验结果楚雄州药检所检验结果RSD%LC-2010AHT型高效液相色谱仪验证方案STP-VP第11页批号岛津LC-2010A公司自行检验结果岛津LC-20A公司自行检验结果RSD%结论操作人日期年月日复核人日期年月日7.3.4辅助仪器设备名称：生产厂家：仪器编号：计量编号：检定有效期：8、验证数据分析：仪器工作环境、灵敏度、检测限、重复性、仪器外观等应符合验证合格标准，如有少量数据超过上述标准，则应进行分析，找出不合格原因，并修订验证方案，再实施，直至缝合验证标准。9、验证结果与结论：10．再验证周期：正常情况下，拟定每年做一次验证。11、附件：检验原始记录