第四章微生物的形态和构造(三)非细胞型生物病毒--核蛋白体•核酸•蛋白质病毒类病毒亚病毒拟病毒朊病毒活的证据:有繁殖、传播疾病的能力死的证据:可被结晶。结晶性具僵硬、固定、排列规矩第一节病毒病毒是•超显微的大分子生物•无细胞结构•只含一种核酸•专性活细胞内寄生•体外可以无生命状态存在且保持其侵染性特点:•小•可通过细菌滤器•成分:一种核酸+蛋白质•缺乏酶类、无核糖体、无蛋白质合成系统•专性活细胞内寄生•可结晶,且可在外界长期保存•特殊的繁殖方式:复制+装配•对干扰素敏感,对抗生素不敏感一病毒形态构造和化学组成(一I病毒的大小单位为nm,即10-9mm(二)病毒的形态1典型的病毒粒子核衣壳病毒粒子包膜核心:DNA或RNA衣壳:衣壳粒蛋白2构型(1)烟草花叶病毒(TMV)---螺旋对称衣壳衣壳蛋白:占95%,2130个衣壳粒核心RNA:占5%,ssRNA300nm÷2.3nm/圈=130圈130圈×161/3个/圈=2130(2)腺病毒(ADENOVIRUS)---二十面体立体对称•1953年发现形状:二十面体腺质体致病性:消化道炎症等。12个顶角20个面30个边衣壳:252个衣壳粒12个五邻体,240个六邻体核心:dsDNA,线状(3)T偶噬菌体---复合对称头部尾部目前噬菌体基本形态分为3种蝌蚪形微球形丝状椭圆形20面体衣壳粒212内含DNA和中心蛋白螺旋对称衣壳粒144个注射核酸的通道3病毒群体形态•包涵体:某些感染病毒的宿主内,出现光镜可见的大小、形态和数量不等的小体。•噬菌斑:把适量噬菌体倒在充满细菌的营养琼脂表面,培养一定时间后噬菌体裂解细菌后留下的空斑。•空斑、病斑:动物单层细胞培养病毒后留下的,类似于噬菌斑。•枯斑:病毒作用于植物留下的局部坏死部分。(三)病毒的化学组成1病毒的核酸•RNA多为ss,DNA多为ds动物病毒植物病毒噬菌体ds+++++++DNAss+++++ds+++++RNAss+++++++++2病毒的蛋白质结构蛋白:位于颗粒外表,起保护作用;决定病毒的抗原性酶蛋白:分解性酶;合成性酶•病毒侵入后的三种结局•裂性噬菌体增殖吸附、侵入、增殖(复制)、装配、释放二病毒的繁殖---以噬菌体为例1吸附•位点:受体、性菌毛等•过程:随机碰撞、尾丝散开、固着、刺突插入、基板固定•感染复数(multiplicityofinfection):每一敏感细胞可吸附的相应噬菌体的数量。•自外裂解(lysisfromwithout)•内裂解:2侵入•过程:尾丝展开、释放溶菌酶、尾丝尾鞘收缩、DNA注入动物病毒借助胞饮作用或直接穿过膜,植物病毒则通过伤口或昆虫刺吸传染3增殖(1)核酸复制•核酸复制•核酸转录•蛋白质合成DNA病毒(poxvirus)的复制(2)核酸转录(3)蛋白质合成4装配DNA分子的缩合通过衣壳包裹DNA而形成头部尾丝和尾部其它部件独立装配完成头部与尾部相结合装上尾丝•成熟的病毒粒子从被感染细胞内转移到外界的过程。•没有包膜的病毒合成溶解细胞的酶,引起内裂解。•有包膜的病毒以下图方式进行:5释放三一步生长曲线一步生长曲线:定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线。裂解量=裂解期平均噬菌斑数潜伏期平均噬菌斑数裂解量:每个被感染细菌释放新的噬菌体的平均数称为“平均收获量,也称裂解量。四溶源性•溶源性:温和噬菌体侵入宿主细胞后产生一种新的特性,称为溶源性。1温和噬菌体(temperatephage):噬菌体吸附或侵入细胞后,其DNA只整合在宿主核染色体组上,并可长期随宿主DNA的复制而同步复制,一般不进行增殖或引起宿主细胞裂解的噬菌体。原噬菌体(前噬菌体):整合在宿主染色体上的温和噬菌体核酸。游离态:具感染性的病毒粒子整合态:原噬菌体,附着或整合在细菌染色体上营养态:在宿主细胞内指导特定的病毒核酸和蛋白质的合成2溶源性细菌:含有原噬菌体(温和噬菌体)的细菌称为溶源性细菌。溶源性细菌基本特性:(1)溶源性是溶源性细菌的一个极其稳定的遗传特性(2)自发裂解(3)诱发裂解(4)具“免疫性”(5)溶源性细菌的复愈:非溶源化(6)溶源转变:可获得一些新的生理特性E.coliK12(λ):表示一株带有λ前噬菌体的大肠杆菌K12溶源菌株。三逆转录病毒(Retrovirus)的复制、增殖和致癌原理1癌症:•现在知道是受累组织生长紊乱而又不受约束。现知约200多种,15%为病毒所引起,另主要为突变所引起。2逆转录病毒:•Temin(1964年)研究劳斯肉瘤病毒(RSV),提出的前病毒学说(provirustheory)。1970年发现了逆转录酶,荣获了诺贝尔医学和生理学奖。•逆转病毒是一类具有包膜的、含ssRNA的球状病毒,呈二十面体。它除含有一些一般病毒所具有的ssRNA、蛋白质、脂肪和糖类外,还含有反转录酶(reversetranscriptase)、核糖核酸酶H(RNaseH可降解RNA-DNA杂种分子中的RNA链)、转化蛋白和DNA连接酶等,艾滋病数字近二十年来1600万人受感染而死全球感染者累计已达5000万1999年有260万人因之死亡新感染者中儿童和青少年居多,全球1999年儿童新感染者为560万“重灾区”为女性,感染者人数超过男性个别南部非洲国家有1/4的人口感染去年全球每分钟有11人感染目前非洲每天为此举行5500个葬礼在不到十年的时间,我国的HIV-1携带者由1千余人上升到30万我国感染者60%为吸毒者注射毒品时感染病毒,其次为性行为传播和母婴关系传播3艾滋病-获得性免疫缺损综合症•80年代流行的AIDS(acquiredimmunedeficiencysyndrome),病原体为人类免疫缺损病毒(HIV,humanimmnodeficiencyvirus)。•猿免疫缺损病毒(SIV,simianimmnodeficiencyvirus)•人类免疫缺损病毒(HIV,humanimmnodeficiencyvirus)•艾滋病(AIDS,acquiredimmunedeficiencysyndrome)•艾滋病病毒起源:一是认为这是美国政府的一个生物武器试验;二是认为HIV病毒来源于科学家们早期在非洲对脊髓灰质炎疫苗的试验。•HIV感染人体时先由其表面糖蛋白gp120与人辅助T细胞(即T4细胞)表面蛋白CD4特异结合,gp120流在细胞表面而病毒进入T4细胞内。在逆转录酶作用下,以RNA为模板由病毒DNA聚合酶催化得到原病毒DNA并整合到宿主细胞DNA基因组中进行繁殖。由于gp120都留在T4细胞表面,使得其像HIV病毒一样可以去感染另一个T4细胞而形成大的多核合胞体。•T4细胞被感染,则失去免疫功能,人则患上爱滋病。这样,使人体变为没有军队的国家,只能招募“雇佣军”--抗生素。一旦雇佣军不济时则全线崩溃,死于象肺结核、肝炎及生理上的一些常见疾病。第二节亚病毒•类病毒:最小的、只含RNA一种成分、专性细胞内寄生的分子生物。•拟病毒:包裹在植物病毒中的类病毒。病毒类病毒亚病毒拟病毒朊病毒–priondiseases•Scrapie:sheep羊搔痒病•TME(transmissibleminkencephalopathy):mink•CWD(chronicwastingdisease):muledeer,elk•BSE(bovinespongiformencephalopathy):cows疯牛病•CJD(Creutzfeld-JacobDisease):human克-雅氏病朊病毒(Prion):普列昂:Proteininfection蛋白质侵染因子,是一类能侵染动物并在宿主细胞内复制的小分子无免疫性的疏水蛋白质。1982年,美国病毒学家Prusiner发现羊搔痒病致病因子为一种蛋白质,是一种不含核酸的微蛋白颗粒,形态为杆状颗粒,直径25nm,长100-200nm,对朊病毒影响最大的为蛋白酶、氨基酸化学修饰剂和蛋白质变性剂。其复制机制违背了现行的中心法则。中心法则•理由1:RNA核苷酸比DNA核苷酸更容易合成,DNA可能是从RNA进化来的,比RNA更稳定,其作为遗传力的保管员的作用要胜过RNA。如逆转录病毒,它仍携带遗传信息;•理由2:新近发现RNA具有酶的功能,称酢酶。进化的结果蛋白质完全担负起了催化的功能。如月元病毒也能携带信息。