LC-MS操作流程

基本操作流程开机：1、打开液氮罐自增压阀门，调节液氮罐分压表的输出压力为0.7MPa（~110psi），并确认前级泵的镇气阀处于关闭状态。打开高纯氮主阀门。调节纯氮气钢瓶次级减压表输出压力至0.15MPa（最大不要超过0.2MPa或30psi）。2、打开计算机，网络交换机（LANSwitch）电源。3、打开液相各个模块电源。4、打开质谱前面左下角的电源开关，这时可以听到质谱里面溶剂切换阀切换的声音。同时机械泵开始工作，仪器开始自检。等待大约两分钟，听到第二声溶剂阀切换的声音(表明质谱自检完成)后，表示仪器自检完成，可以联机。5、在计算机桌面上双击MassHunter采集软件图标“DataAcquistion”，进入MassHunter工作站。关机：1、确认气镇阀处于关闭状态(顺时针拧紧);2、在MassHunter采集软件内点击MS三级四极杆图标，选择“Vent”执行放空步骤。3、出现放空相关提示，如果确认要放空，选择“Yes”。4、可以在三级四极杆的Diagnosis界面观察涡轮泵转速的下降情况。5、大约十分钟以后，会出现“放空完成，可关闭电源”提示，选择“OK”。6、关闭MassHunter软件。然后关闭质谱及LC各模块的电源。关闭电脑，同时关闭液氮罐自增压阀门。方法编辑：1、在桌面上双击数据采集软件图标，打开MassHunter采集软件，进入MassHunter数据采集软件。在这个界面中完成所有HPLC和三级四极杆的方法参数设置。2、调谐步骤确认离子源的参数如下：DryingGasFlow:10L/minDryingGasTemperature:350℃NebulizerPressure:30-50psiSheathGasFlow:7L/minSheatGasTemperature:250NozzleVoltage:1500VCapillaryVoltage:4000V（正离子模式）3500V（负离子模式）3、新建方法（1）通过菜单FileNewMethod创建一个新的方法。（2）或者通过菜单FileOpenMethod来打开D:\MassHunter\Methods\目录下的默认方法Default.m。在这个方法的基础上创建新的方法。（在打开已有的方法时，有时会提示“IonSourcenotidentical”。这里表示方法里面离子源的设定和仪器实际安装的离子源是不同的。这时，我们需要更改方法里面的IonSource的设定到正确的离子源，然后点击Apply按钮，错误就会消失。）（3）自动进样器的参数设置setup：选择InjectionwithNeedleWash洗针进样；进样体积（injectionvolume）：5μL洗针样品位置（washyial）：100options：stoptime：与泵一致；Drawposition：取样位置可以调整进样针的插入位置，默认为零。使用标准样品瓶时针尖距离瓶底的距离约为5mm。当样品量比较多并且担心有沉淀的时候，可以选择把针的位置抬高（最多比默认位置抬高5mm）；当样品量很少时，也可以考虑把针的位置降低（最多比默认位置降低10mm）。（4）泵的参数设置在二元泵的Setup界面可以设置泵的流量、流动相比例、数据停止采集时间等setup：flow：0.3ml；solventA：watersolventB：75%ACN；Stoptime：Posttime：timetable：设置梯度系统程序option：选择压缩因子（Useenhancedcompressibilitycalibration）乙腈-115，水-46.（5）柱温箱设置在柱温箱编辑画面输入柱温箱温度。大部分应用情况下，左右加热的温度设置成相同值。TimeTable和Options内的参数一般不需更改使用默认值。（6）DAD设置在Setup选项里面设置检测波长（238nm）和带宽，以及参比波长和相应的带宽，停止时间，是否保存三维光谱数据等参数。在Options选项里面调节Requiredlamps参数，设置分析时需要紫外灯(UV)还是可见光灯(Vis)。（7）三级四极杆采集参数的设定见附件1（39-42）4、保存方法通过File菜单选择SaveMethod，或者点击方法保存按钮保存当前方法。也可以通过File菜单选择SaveAsMethod来将方法另存成其他名字。5、运行单针样品（1）打开样品栏，输入样品名字、瓶号、数据文件名以及数据保存路径（2）使用工具栏的快捷按钮，或者通过选择Run菜单中的InteractiveSample开始运行样品。（3）在实时色谱图显示区单击鼠标右键，单击Change，在弹出的对话框中左侧选择想要监视的信号单击Add添加，设定范围后，单击OK。6、编辑和运行Worklist（1）创建工作列表通过File菜单选择NewWorklist创建新工作列表工作列表面板点击右键，通过弹出的菜单可以实现添加单个或多个样品，复制，插入等功能。这和通过Worklist菜单能实现的功能相同。通过Worklist菜单选择Show/Hide/OrderColumns，我们就可以在弹出的窗口增加或者减少在Worklist表格里面显示的内容④从Worklist菜单中选择AddSample。添加一行新的样品。可以接在工作列表表格输入以下样品信息：样品名称，样品位置，方法，数据文件名称，样品类型，进样体积，注释和级别名称等。⑤从Worklist菜单选择AddMultipleSamples。在SamplePosition选项卡下，填写样品名称，数据文件名称，调用方法，方法路径以及数据文件储存路径等。点击samplePosition选项卡，选择要添加的样品所放置的位置。点击OK关闭AddMultipleSamples对话框。指定的样品出现在Worklist表格，并且可以进行再次编辑。从Worklist菜单选择WorklistRunParameters…，设定工作列表的运行信息，方法路径以及数据文件储存路径等。选中Postworklist，在弹出的窗口选择SCP_InstrumentStandby，这个Script的功能是使得Worklist在运行完毕后仪器自动切换到Standby。⑥使用工具栏的保存工作列表快捷按钮，或者通过File菜单选择SaveWorklist菜单保存工作列表，也可以通过File菜单选择SaveasWorklist将工作列表另存为气体的名字。⑦使用工具栏上的快捷按钮，或者通过Run菜单中选择Worklist，开始运行工作列表。