M胆碱受体和H1组胺受体激动剂对离体豚鼠回肠的作用

实验报告课程名称：生理科学实验指导老师：唐法娣成绩：实验名称M胆碱受体和H1组胺受体激动剂对离体豚鼠回肠的作用同组学生：一、实验目的和要求（必填）二、实验内容和原理（必填）三、主要仪器设备（必填）四、操作方法和实验步骤五、实验数据记录和处理六、实验结果与分析（必填）本人Email：M胆碱受体和H1组胺受体激动剂对离体豚鼠回肠的作用（浙江大学医学院级临床医学七年制生理科学实验班组，浙江杭州310058）[摘要]目的：观察胆碱能神经递质acetylcholine(Ach、乙酰胆碱），炎症介质histamine(His、组胺）对离体豚鼠回肠平滑肌的作用。观察M胆碱受体拮抗剂atropine(阿托品)和组胺H1受体拮抗剂chlorpheniramine(氯苯那敏、扑尔敏）对乙酰胆碱、组胺的拮抗作用。方法：应用液压传递系统直接测定动脉血压，通过压力换能器将压力变化转化为电信号变化，用微机生物信号采集处理系统记录动脉血压变化曲线。结果：在加入阿托品后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入乙酰胆碱时（P0.01）；加入扑尔敏后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入组胺时（P0.01）；BaCl2处理后加入阿托品时回肠肌张力小幅下降。结论：阿托品具有强抗胆碱作用；扑尔敏具有部分拮抗组胺作用；阿托品可通过拮抗胆碱能受体部分减弱BaCl2的作用。[关键词]动脉血压血红蛋白急性失血1.材料1.1实验动物豚鼠1.2药品未标记的激动剂：A，B，C。10-2g/L氯化乙酰胆碱（acetylcholinechloride）溶液；10-2g/L磷酸组织胺（histaminephosphate）溶液；10g/LBaCl2溶液。拮抗剂：1g/L硫酸阿托品（atropinesulfate）溶液；10-3g/L氯苯那敏（chlorpheniramine）溶液。台氏液（Tyrode)g/L:NaCl8.0,KCl0.2,MgCl20.1,CaCl20.2,NaH2PO40.05,NaHCO31.0,葡萄糖1.0。1.3器材双层玻璃浴槽（20ml）、张力换能器、微距调节夹，恒温水浴箱、多道生理专业：临床医学姓名：学号：日期：2013.3.21地点：教C信号采集处理系统，RM6240生物信号采集处理系统。2.方法2.1准备清洗浴槽：清洗后,将台氏液装至刻度；检查温度：37℃±0.5℃；检查通氧:单个小泡溢出;打开电脑：选中桌面RM6240图标，选择“实验”---生理科学实验---肠肌。2.2实验步骤清醒豚鼠，轻击头部后股动脉放血，打开腹腔，取出回肠，制作回肠标本，一端固定在通气钩上，置含有37℃台氏液的浴槽中，通氧另一端固定在换能器上与多道生理信号采集处理系统的连接，连接RM6240生物信号采集处理系统，选择“实验”---生理科学实验---肠肌，归零，调节换能器张力（1g），稳定20分钟。2.3制作回肠标本找到回盲部，在离回盲部1cm处剪断回肠，取出回肠约15cm左右一段，置于盛有台氏液的培养皿中，将回肠剪成1-1.5cm的小段。2.4回肠标本张力调节将回肠标本的下端连线系于标本固定钩上，放入麦氏浴槽中，选中桌面RM6240图标。选择“实验”--生理科学实验--肠肌，工具--快速归零（按右上快速归零Z）---调“0”，将RM6240系统处在记录状态；将回肠标本的上端连线打一活结，勾在张力换能器的悬臂梁钩上，旋转调节螺母，调张力至1g。（见左上显示平均1g左右）。2.5RM6240系统的使用1.实验---生理科学实验---肠肌2.记录、实验中用暂停,实验结束用停止，停止后一定要另存为d或e盘。3.标记：在标记窗内打上药名，加药时做好标记。4.测量方法：选测量方法选择键---峰峰值测量5.剪辑：按剪辑图标---选中---剪切6.导出：文件---当前屏图像输出---到word2.6实验观察记录①待离体回肠稳定10min，记录一段正常收缩曲线。②加A药0.3ml，观察并记录其收缩曲线，加入拮抗剂阿托品0.3ml,曲线稳定后加A药，记录一段曲线后，用台氏液连续冲洗浴槽3次换液，稳定5min。③加B药0.3ml，观察并记录其收缩曲线，待曲线稳定后，加入拮抗剂氯苯那敏0.3ml,观察5min，加B药，换液，稳定5min。④加C药0.3ml，观察并记录其收缩曲线，待曲线稳定后，加入拮抗剂阿托品0.3ml,观察3min，加C药，记录曲线。请根据实验结果考虑进一步设计实验，并继续实验。2.7数据处理1.数据测量：从加药前的基线到最高点的收缩幅度，测得峰峰值。2.收集数据：离体豚鼠回肠实验10个小组的原始数据收集3.导出实验图：文件---当前屏图像输出2.8统计参考《生理科学实验教程》p30应用Excel进行数据统计分析t-检验，以xs表示。3.结果3.1药物对离体豚鼠回肠作用曲线图，见图1.图2.图1.A药物对离体豚鼠回肠作用曲线图图2.BC药物对离体豚鼠回肠作用曲线图3.2离体豚鼠回肠实验10个小组的原始数据列表药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响(数据统计表）见表1.表1.药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响收缩幅度（g）收缩幅度（g）实验小组A药Atr+A药B药Chl+B药10.4620.0590.1470.05921.4440.2052.40.24231.1360.1690.2420.08841.2460.0591.3850.22751.7810.0441.5160.33760.5280.0440.8060.04471.3190.7991.240.67681.2970.1651.370.24291.290.8721.260.967100.7250.0511.1060.139x1.12280.24671.14720.3021s0.4212723580.3164775050.6472975960.2970463673.3结果，见表2.表2.药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响组别标本数收缩幅度（g）T检验值乙酰胆碱101.12±0.426.78512E-05阿托品+乙酰胆碱100.25±0.32组胺101.15±0.650.002534156氯苯那敏+组胺100.30±0.304.讨论4.1A、B、C药分别为什么药？根据实验结果，A药是乙酰胆碱，B药是组胺，C药是氯化钡。4.2阿托品的作用和作用机制阿托品与胆碱受体结合而本身不产生或较少产生拟胆碱作用，却能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与胆碱受体结合，从而产生抗胆碱作用。[1]4.3氯苯那敏的作用和作用机制氯苯那敏（扑尔敏）：为组胺H1受体拮抗剂。扑尔敏与平滑肌细胞膜H1受体结合，从而阻断组胺对H1受体的激动作用。[2]在肠肌痉挛收缩时加入阿托品可通过拮抗胆碱能受体部分减弱BaCl2的作用，但无法阻断钙离子浓度上升导致的收缩，故肌张力依然维持在较高水平。5.参考文献[1]陆源，夏强等，生理科学实验教程（第二版）.浙江：浙江大学出版社.2012.231.[2]唐法娣，药物对离体豚鼠回肠的作用（课件）.