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达旗人民医院检验科免疫室作业指导书文件编号：达-1-2013-21版本/修订号：1/0主题内容促黄体生成素(LH)生效日期：20130101第126页共页促黄体生成素(LH)分析原理·第1步：20µl标本、生物素化的抗LH单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗LH单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。·第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。·第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。·检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。标本要求必须选择以下的标本进行测定血清：使用标准取样试管或含分离胶的试管采集。血浆：肝素锂、钠、铵；EDTA-K3；氟化钠/草酸钾抗凝均可。如采用柠檬酸钠抗凝的血浆，测定结果需+10%。标本在2－8度可稳定14天，-20度可稳定6个月。只能冻融一次。对于使用分离胶试管后标本的稳定情况，请参见试管厂家的说明书。使用原始管采样，参见试管说明书。含沉淀剂的标本使用前需离心。不要使用加热灭活的标本。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。在测定前，保证试剂、定标液、质控液到达室温。考虑到可能挥发的因素，建议标本、定标液、质控液上机后在2小时内进行测定。试剂、校准品、质控品和其他所需材料提供的材料：达旗人民医院检验科免疫室作业指导书文件编号：达-1-2013-21版本/修订号：1/0主题内容促黄体生成素(LH)生效日期：20130101第127页共页促黄体生成素(LH)货号：11732234，100人份的ElecsysLH试剂盒包含：·M链霉亲和素包被的微粒·R1生物素化的抗LH单克隆抗体·R2三联吡啶钌标记的抗LH单克隆抗体需要的材料（未提供）：·ElecsysLH定标液（CalSet）货号11732269，4x1ml·Elecsys通用质控品（PreciControl）货号11731416,2x3ml,含水平1和水平2·一般实验室设备·Elecsys1010或2010或E170分析仪Elecsys1010/2010分析仪需要消耗品·Elecsys系统缓冲液（ProCell）货号11662988，6x380ml·Elecsys测量池清洗液（CleanCell）货号11662970,6x380ml·Elecsys添加剂液（SysWash）货号11930346,1x500ml,清洗水添加剂·Elecsys系统清洗液支架（AdapterforSysClean））货号11933159·Elecsys1010反应杯（AssayCup）货号11706829，12x32Elecsys2010反应杯（AssayCup）货号11706802,60x60·Elecsys2010吸样头（AssayTip）货号11706799,30x120E170分析仪需要消耗品·Elecsys系统缓冲液（ProCellM）货号12135019，1x2·Elecsys测量池清洗液（CleanCellM）货号12135027,1x2·Elecsys系统缓冲液/测量池清洗液预热杯（PC/CC-Cup）货号03023141·探针冲洗液，12x70ml,用于最终保养及完成试剂吸样后冲洗，货号03005712·前清洗液，5x600ml·Elecsys反应杯/吸样头盒(AssayCups/AssayTipsCombimagazineM)货号12102137·Elecsys废物盒(wasteliner)货号03023150达旗人民医院检验科免疫室作业指导书文件编号：达-1-2013-21版本/修订号：1/0主题内容促黄体生成素(LH)生效日期：20130101第128页共页促黄体生成素(LH)·Elecsys系统清洗液支架(SysCleanAdapterM))货号03027651各种分析仪均适用的材料·Elecsys系统清洗液（SysClean）货号11298500仪器和校准使用仪器：瑞士罗氏诊断公司生产Elecsys2010/E411/E170/E601全自动电化学发光免疫自动分析仪仪器校准：每批ElecsysLH试剂盒上都有条形码记录各批号试剂特定的定标信息。预先确定的主曲线适用于用ElecsysLHCalSet试剂盒进行测定的分析仪。定标频率：每批试剂必须用新鲜试剂（试剂经仪器注册24小时以内）标定一次，如再次标定即根据下列要求：·一个月（同一批号试剂）·7天（放置仪器上的同一试剂盒）·根据要求进行标定：如质控结果超出范围时。操作步骤（以E170为例）5.1校准操作步骤：在编缉各项目的参数时，已经在Application—Calib菜单中定义好了定标类型和几点定标。因此在对各项目进行定标时，只需在定标菜单Calibration中进行即可。进入Calibration—Status菜单，用鼠标选择需定标的项目，再根据需要点多点定标（FULL键），再选择其它项目进行相应选择，最后点SAVE，将定标物放入在Calibration—Calibrator中定义好的位置，点Start，再点Start，仪器开始定标。达旗人民医院检验科免疫室作业指导书文件编号：达-1-2013-21版本/修订号：1/0主题内容促黄体生成素(LH)生效日期：20130101第129页共页促黄体生成素(LH)在Calibration—Status菜单中看定标结果，点CalibrationResult键看定标结果。5.2样本检测程序：单个样本输入，在主菜单下选择Workplace-Testslection，在SequenceNo栏输入标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点SAVE键，样本号自动累加。批量常规标本的输入，在主菜单下选择Workplace-Testslection，在SequenceNo栏输入起始标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点REPEAT，输入该批标本的最后一个标本号，点OK即可。进样分析，将标本按在Workplace菜单中输入的标本号顺序在样本架上排好，放入进样盘内,按START键，输入该批上机标本的起始标本号，再点START键，仪器自动开始推架检测标本。质量控制Elecsys通用质控品（PreciControl）1和2或其它合适的质控品。各浓度区域的质控至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。计算方法对每一个标本，仪器会自动计算FSH含量，单位是mIU/ml或IU/l参考范围一项研究对泌乳素进行了评估，共检测了300份健康人群的样品，结果如下：LH(mIU/ml)测试总数百分位数50595男性3224.01.78.6女性卵泡期3165.92.412.6达旗人民医院检验科免疫室作业指导书文件编号：达-1-2013-21版本/修订号：1/0主题内容促黄体生成素(LH)生效日期：20130101第130页共页促黄体生成素(LH)排卵期5630.81495.6黄体期2804.31.011.4停经后13229.17.758.5每个实验室必须调查各自患者群体的参考范围变异性，必要时根据具体情况制订自己的参考范围。分析性能精密度干扰因素该方法不受黄疸（胆红素66mg/dl）、溶血（血红蛋白1g/dl）、脂血（脂质1900mg/dl）和生物素50ng/ml干扰。接受高剂量生物素（5mg/天）治疗的病人，至少要等最一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰（1500U/ml）的干扰。LH浓度高达1150mIU/ml也不出现钩状效应。17种常用药物经试验对本测定无干扰。ElecsysLH测定法没有检测过新生儿的标本。达旗人民医院检验科免疫室作业指导书文件编号：达-1-2013-21版本/修订号：1/0主题内容促黄体生成素(LH)生效日期：20130101第131页共页促黄体生成素(LH)接受过小鼠单抗治疗或体内诊断的病人可能会出现假阳性反应。偶尔可遇到高链霉亲和素和釕抗体的干扰。ElecsysLH试剂盒中含有添加剂，可消除这些影响。ElecsysLH测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。临床意义LH与卵泡刺激素（FSH）一样同属促性腺激素家族，二者协同调节和刺激性腺(卵巢和睾丸)的发育和功能。与FSH、TSH和hCG一样，LH也是糖蛋白，由二种亚单位（α-和β-）组成，含121个氨基酸和3条糖链，分子量29.5kD。对于女性，该激素在下丘脑-垂体-卵巢调节环路中发挥作用，控制月经周期。LH和FSH从垂体的促性腺细胞中阵发性释放,经血流到达卵巢。在卵巢中LH和FSH一起刺激卵泡的成长和成熟，进而刺激雌激素和雄激素的生物合成。LH水平在月经周期的的中期呈现最高峰，诱导排卵和形成黄体,其主要分泌物是雄激素。在睾丸的间质细胞内,LH刺激睾酮的产生。LH检测对查明下丘脑-垂体-卵巢系统的功能失常有作用。LH和FSH联合检测还可用于查明染色体异常的先天性的疾病（如特纳综合征）、多囊性卵巢（PCO）、闭经的病因、绝经综合征和疑有间质细胞发育不全。ElecsysLH测定方法能够检测文献已报导的所有LH种类。采用二种LH特异的单克隆抗体。其中生物素化的抗体识别由二种亚单位共同构成的决定簇，而钌标记的抗体识别β亚单位上的决定簇。因此与FSH、TSH、hCG、hGH和hPL的交叉反应可忽略不计。