Nextseq500简易操作流程

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Nextseq500简易操作流程一、开机打开电源开关切换到I(on)的位置,按下试剂室上方的电源按钮后开机二、关机1.点击界面上的ManageInstrument按钮2.选择SystemPowerOptions3.点击关机安全关机的方式应先关闭电脑软件再关闭电源,再次打开仪器时需等待至少60s注意:仪器放置后不要随便移动,移动机器可能会影响其光线的校准和破坏数据的完整性,如果需要重新移动仪器,需要联系Illumina公司相关技术人员。三、测序工作流程使用IlluminaBaseSpace进行配置根据实验需要选择合适的试剂盒变性和稀释文库将处理好的文库加到试剂盒10号样品孔里从软件界面,选择序列开始运行设置步骤载入flowcell将试剂室清空,加入buffer和试剂盒检查运行参数和自动检查的结果,确认后开始数据分析处理测序完成后仪器维护清洗试剂盒准备①取出保存在-20℃中的试剂盒,室温水浴60min后将试剂盒表面的水擦干,注意水浴过程中不要浸没试剂盒;(或将试剂盒放在2℃-8℃融化过夜,至少需要18h融化,在2℃-8℃下,试剂能稳定使用一周)②轻轻来回摇晃5次混匀试剂盒;③检查29,30,31和32孔,确定试剂都已经融化完全;④轻敲桌面排除气泡。注意:试剂盒中含有甲酰胺,具有一定的毒性,注意不要吸入、摄取、皮肤和眼睛接触到,实验时注意穿好防护措施,包括防护镜、手套和实验服,处理使用过的试剂时应严格按照政府规定的安全标准。FlowCell准备①取出保存在2℃-8℃的FlowCell,在室温下放置30min后拆开铝箔包,打开透明塑料翻盖包后取出FlowCell。②用沾有少量的低棉絮酒精棉轻轻擦拭FlowCell,并用低棉絮擦干剩余酒精。注意:①使用前确保FlowCell未破损;②确保端口垫圈和白色塑料的帖子完好无损。③确保四个白色固定夹卡在黑色承板的边缘,如果发现承板在夹子下不安全,轻轻一起按下黑色承板和白色框架直到板卡在夹子上。④确保4个金属弹簧夹平对黑色的承板。A.端口垫圈B.固定夹C.弹簧夹D.白色框架E.承板文库加载到试剂盒①用低棉絮酒精棉将试剂盒上的#10labeledLoadLibraryHere擦干净,并用1ml移液枪冲洗金属箔片;②将文库加入到#10labeledLoadLibraryHere,分散文库时注意不要碰到金属箔片。

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