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1一、显微镜的使用一、取镜和安放1．右手握住镜臂，左手托住镜座。2．把显微镜放在实验台上，略偏左（显微镜放在距实验台边缘7厘米左右处）。安装好目镜和物镜。二、对光3．转动转换器，使低倍物镜对准通光孔(物镜的前端与载物台要保持2厘米的距离)。4．把一个较大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜内(右眼睁开，便于以后同时画图)。转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜，可以看到白亮的视野。三、观察5．把所要观察的玻片标本放在载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心。6．转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止（眼睛看着物镜，以免物镜碰到玻片标本）。7．左眼向目镜内看，同时反方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，直到看清物像为止。再略微转动细准焦螺旋，使看到的物像更加清晰。8．高倍物镜的使用：使用高倍物镜之前，必须先用低倍物镜找到观察的物象，并调到视野的正中央，然后转动转换器再换高倍镜。换用高倍镜后，视野内亮度变暗，因此一般选用较大的光圈并使用反光镜的凹面，然后调节细准焦螺旋。观看的物体数目变少，但是体积变大。四、整理8．实验完毕，把显微镜的外表擦拭干净。转动转换器，把两个物镜偏到两旁，并将镜筒缓缓下降到最低处，反光镜竖直放置。最后把显微镜放进镜箱里，送回原处。二、生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定1．还原糖的鉴定（1）原理：还原糖+斐林试剂/班氏试剂→（水浴加热）砖红色沉淀（2）选材：含糖量较高（反应颜色明显便于观察）、白色或近于白色的植物组织（防止遮蔽）。（3）斐林试剂：现配先用，由质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液和质量浓度为0.05g/ml的CuSO4溶液配制而成，等体积混合后加入被鉴定的材料。班氏试剂：配好后备用。2．脂肪的鉴定（1）原理：脂肪+苏丹Ⅲ染液→橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ染液→红色（2）选材：富含脂肪的种子，以花生种子为最好，在进行实验前需浸泡3-4小时。（3）步骤：取材：花生种子(浸泡3～4h），将子叶削成薄片。制片：①取最理想的薄片②在薄片上滴苏丹Ⅲ染液（2～3min）③去浮色（用50﹪酒精）④制成临时装片观察：低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察，可看到橘黄色圆形小颗粒。3．蛋白质的鉴定（1）原理：蛋白质+双缩脲试剂→紫色（2）选材：浸泡1-2小时的大豆种子或豆浆，或鸡蛋蛋白。（3）双缩脲试剂：先加2mlA液（0.1g/mlNaOH溶液）振荡摇匀后加3-4滴B液（0.01g/ml的CuSO4溶液）。三、用高倍显微镜观察叶绿体1．原理：高等绿色植物的叶绿体存在于细胞质基质中。叶绿体一般是绿色的、扁平的椭球形或球形，可以用高倍显微镜观察他的形态和分布。2．选材：新鲜的藓类的叶，叶绿体多，薄而透。3．步骤：（1）制作藓类叶片临时装片（注意：临时装片中的叶片不能放干了，要随时保持有水状态，适当光照、升温，做损伤处理）。（2）用显微镜观察。四、用高倍显微镜观察细胞质的流动1．原理：活细胞中的细胞质处于不断流动的状态。观察细胞质的流动，可用细胞质基质内的叶绿体的运动作为标志。2．选材：新鲜的黑藻（事先在光照、室温条件下培养）。3．步骤：（1）制作黑藻叶片临时装片。（2）用显微镜观察。五、观察植物细胞的有丝分裂1．原理：（1）植物体中，有丝分裂常见于根尖、茎尖等分生区细胞（2）细胞核内的染色体容易被碱性染料（如龙胆紫染液）着色2．选材：洋葱（或蒜、葱）、质量分数为15%的盐酸，体积分数为95%的酒精溶液，质量浓度为0.01g/mL2的龙胆紫溶液或0.02g/mL的醋酸洋红液等。3．步骤（1）洋葱根尖的培养（2）装片的制作：①解离：使组织中的细胞相互分离开来；使细胞死亡。取洋葱的根尖2-3mm，立即放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液（1:1）的玻璃皿中，在室温下解离3-5min。（如果解离时间过短，就不能使细胞之间的连接分开，造成压片失败，细胞不能均匀地在装片上铺成一层。如果解离时间过长，可能使根尖烂掉）②漂洗：洗去组织中的解离液，便于染色(防止酸碱中和)。用清水漂洗10min。（如果漂洗不干净，沾在洋葱根尖上的盐酸与酒精就会和龙胆紫反应，造成根尖细胞染色体不能染上颜色。）③染色：使染色体或染色质被碱性染料染成深色，便于观察。用染液（0.01g/mL的龙胆紫或0.02g/mL的醋酸洋红），时间为3－5分钟。④制片（压片）：使细胞分散开。用镊子弄碎根尖，盖上盖玻片，再放上一块载玻片，压片。（压片过重过猛可能将组织压碎、压烂；过轻则细胞未充分分散开而重叠。）（3）观察：①低倍镜观察：找到分生区细胞（特点：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂）②高倍镜观察：找各时期细胞。可见处于间期的细胞最多，中期最少。不能看到某个细胞连续分裂的过程，因细胞在解离时已被杀死。（若换成动物细胞：胰蛋白酶处理→漂洗→染色→制片）六、比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率1．原理：新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶。2．选材：新鲜肝脏（酶含量较多）研磨液（增大反应面积）。3．步骤（1）分组编号，各注入2mL过氧化氢溶液。（2）1号试管中滴入2滴肝脏研磨液，2号试管中滴入2滴氯化铁溶液。（3）堵住试管口，轻轻振荡，是混合均匀。（4）将带火星的卫生香分别放入两支试管液面上方，观察并记录哪支卫生香燃烧猛烈。七、探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用1.原理：淀粉和蔗糖都是非还原糖，在酶的催化作用下能水解成还原糖，再用斐林试剂检验就可知淀粉酶是否催化着两种化学反应。2.选材：质量分数2%的新鲜淀粉酶溶液，质量分数3%的淀粉溶液和蔗糖溶液。3.步骤：（1）分组编号，如表处理。序号项目试管121注入可溶性淀粉溶液2mL/2注入蔗糖溶液/2mL3注入新鲜的淀粉酶溶液2mL2mL（2）振荡使液体混合均匀，60℃（α-淀粉酶的最适温度）热水中保温5分钟。（3）取出试管，各加入2mL斐林试剂（边加边振荡）。（4）沸水浴加热1分钟。（5）观察。八、温度对酶活性的影响1.原理：淀粉遇碘后形成紫蓝色复合物，淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖，葡萄糖和麦芽糖遇碘后不显色。2.选材：质量分数为2%的新鲜淀粉酶溶液，质量分数为3%的可溶性淀粉溶液，热水，冰块，碘液，温度计。3.步骤：（1）3支试管，编号，分别注入2mL可溶性淀粉溶液。（2）另取3支试管，编号，分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液。（3）分成三组，分别放入热水（60℃）、冰水、沸水中，恒温5分钟。（4）分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液，恒温5分钟。（5）在3支试管中各滴入1到2滴碘液，摇匀，观察。九、叶绿体中色素的提取和分离1.原理：叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂丙酮或酒精中；层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂，叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快。2.选材：新鲜的绿色叶片（如菠菜叶片）、丙酮、层析液、二氧化硅（使研磨充分）、碳酸钙（防止在研磨时色素受到破坏）。3.步骤：（1）称取5g叶片剪碎，放入研钵中。（2）在研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙，再加入5mL丙酮或酒精，进行迅速、插滤纸条层析液培养皿3充分的研磨。（3）将研磨液迅速倒入小玻璃漏斗中进行过滤（漏斗基部放一块单层尼龙布），将滤液收集到一个小试管，及时用棉塞将试管口塞紧。（4）准备滤纸条：干燥处理过的定性滤纸，处理成如图。（5）用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出一条直的滤液细线，待滤液干后再画两三次。（6）分离叶绿体中的色素。（7）观察实验结果。十、观察植物细胞的质壁分离和复原1.原理：①原生质的伸缩性比细胞壁伸缩性大。②当外界溶液浓度大于细胞液浓度时，细胞失水，质壁收缩，进而质壁分离。③当细胞液浓度大于外界溶液浓度时，细胞渗透吸水，使质壁分离复原。2.选材：紫色的洋葱鳞片叶（能发生质壁分离，便于观察），质量浓度为0.3g/mL的蔗糖溶液，清水。3.步骤：（1）制作洋葱鳞片叶上表皮的临时装片（滴、取（薄）、展）。（2）高倍镜观察：可看到紫色的中央液泡，原生质层紧紧贴着细胞壁。（3）使洋葱鳞片叶表皮浸润在蔗糖溶液中。（4）用高倍镜观察：可看到细胞中的中央液泡逐渐变小颜色变深，原生质层逐渐与细胞壁分开来。（5）使洋葱鳞片叶表皮浸润在清水中。（6）用高倍镜观察：可看到中央液泡逐渐胀大颜色变浅，原生质层逐渐贴向细胞壁。十一、植物向性运动的实验设计和观察1.原理：在单侧光刺激下，植物表现出向光性运动；在地心引力（重力）的影响下，植物的根表现出向重力性运动。2.选材：种在花盆中的植物幼苗（如玉米、小麦等），刚萌发并已长出幼根的蚕豆种子或玉米种子，锡纸，滤纸，不透光的纸盒，培养皿，剪刀，台灯，胶布，橡皮泥，棉花，清水，琼脂。3.步骤（略）。十二、设计实验，观察生长素或生长素类似物对植物生长发育的影响设计角度：1.生长素的浓度不同，对植物生长的作用也不同2.生长素对扦插枝条、果实发育和落花落果的作用十三、甲状腺激素能促进小动物的个体发育实验（动物激素饲喂小动物的实验）1.原理：蝌蚪是变态发育，受甲状腺激素的影响。2.选材：15只同种并同时孵化的、体长约15mm的蝌蚪，新鲜水草（保证溶氧量充足），甲状腺激素，甲状腺激素抑制剂（甲硫咪唑），河水。3.步骤：（1）取3个玻璃缸编号1,2,3。（2）三个玻璃缸中分别放入2000mL河水和等量新鲜水草和5只蝌蚪。（3）1中加5mg甲状腺激素，2中加5mg甲状腺抑制剂，3中不加药。（4）1、2中连续投药7天，每天一次，药量相同。每两天换一次水，每次换3/4的水。每天为范例少许。（5）每天观察一次，连续观察10到20天。十四、DNA的粗提取与鉴定1.原理：（1）血细胞在蒸馏水中会渗透吸水过度而导致细胞膜和细胞核膜的破裂。利用此特性可得到含有DNA的溶液。（2）DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。DNA在物质的量浓度为0.14mol／L的氯化钠溶液中的溶解度最低，利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。（3）DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。（4）DNA遇二苯胺（沸水浴）会变成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。2.选材：鸡血细胞液（不用哺乳动物血细胞：成熟的哺乳动物红细胞无细胞核）、体积分数为95%的冰酒精溶液（对DNA的凝集效果较佳）、物质的量浓度分别为2mol/L和0.015mol/L的氯化钠溶液、蒸馏水、二苯胺试剂。3.步骤：（1）制备鸡血细胞液0.1g/mL柠檬酸钠100mL+活鸡鲜血180mL，500mL烧杯中，玻棒搅拌，离心、分离或静置沉淀。（去除上层血浆的目的是增加DNA相对含量）（2）提取血细胞核物质①取血细胞5-10mL＋20mL蒸馏水，用玻棒沿一个方向快速搅拌（血细胞的细胞膜、核摸吸水胀破，玻璃棒快速搅拌，机械加速血细胞破裂。）②纱布过滤：滤液中含DNA和其他核物质，如蛋白质。取滤液（3）溶解核内的DNA滤液＋2mol/L的NaCl溶液40mL，玻棒沿一个方向轻缓搅拌（使DNA溶解）（4）析出含DNA的粘稠物4在上述溶液中缓缓加入蒸馏水，并沿一个方向轻轻搅拌（析出DNA），出现丝状物；当丝状物不在增加时，停止加水（此时NaCl溶液的浓度相当于0.14mol/L）。（5）滤取含DNA的粘稠物：用多层纱布过滤，含DNA的粘稠物留在纱布上。取粘稠物（6）DNA粘稠物的再溶解20mL2mol/L的NaCl溶液+含DNA的粘稠物，在20mL烧杯中轻缓搅拌（使DNA溶解）3min，使尽可能多的DNA溶解在NaCl溶液（7）过滤含有DNA的NaCl溶液用放有两层纱布的漏斗过滤上述所得的溶液，滤液中含有DNA。取滤液（8）提取含有杂质较少的DNA滤液＋体积分数为95%的冰酒精50mL，用玻棒沿一个方向轻缓搅拌（析出DNA），溶液中（析出）出现乳白色丝状物，用玻棒将丝状物卷起，并用滤纸吸取上面的水分。（9）DNA的鉴定取两支20mL的试管，各加入物质的量浓度为0.015mol/L的NaCl溶液5mL（避