棉蚜对吡虫啉的抗性及吡蚜酮对抗吡虫啉棉蚜生物学和生化特性的影

山东农业大学硕士学位论文棉蚜对吡虫啉的抗性及吡蚜酮对抗吡虫啉棉蚜生物学和生化特性的影响姓名：杨焕青申请学位级别：硕士专业：农药学指导教师：王开运20090606棉蚜对吡虫啉的抗性及吡蚜酮对抗吡虫啉棉蚜生物学和生化特性的影响作者：杨焕青学位授予单位：山东农业大学相似文献(10条)1.期刊论文于彩虹.林荣华.王开运.仪美琴.姜兴印棉蚜对吡虫啉等杀虫剂抗药性品系的室内选育及抗药性风险评价-植物保护学报2004,31(4)通过室内杀虫剂处理水培棉苗选育抗性棉蚜,研究棉蚜在药剂诱导下抗性的变化,比较吡虫啉、吡虫啉+增效磷、氧乐果和氰戊菊酯对棉蚜抗性诱导的差异,评价棉蚜对吡虫啉抗药性的风险.结果表明,用吡虫啉等药剂分别选育棉蚜至18代都能够诱导抗性上升,棉蚜对吡虫啉抗性达到10.08倍,对吡虫啉+增效磷的抗性达9.70倍;而用氧乐果和氰戊菊酯分别选育棉蚜至12代时,其抗性分别达28.48倍和35158倍.各抗性品系停止选育12代,抗性下降.2.期刊论文李菁.韩召军.LIJing.HANZhao-jun棉蚜对吡虫啉抗性的初步研究-农药学学报2007,9(3)用吡虫啉对棉蚜进行室内抗性筛选,用药处理25次后抗性是筛选前的20.03倍;2007年对田间棉蚜进行抗性调查,发现不同地区种群对吡虫啉的抗性差异显著,江苏南京种群最为敏感,河南安阳、山东泰安和北京地区棉蚜与之相比,抗性分别为2.21、7.63和9.53倍;抗、感品系解毒酶活力分析发现,抗性品系的谷胱甘肽S-转移酶活性增加很少(比活力1.12倍),但酯酶活力显著高于敏感品系(比活力1.71倍);增效试验结果表明,顺丁烯二酸二乙酯(DEM)在抗、感品系中对吡虫啉均没有明显的增效作用,而磷酸三苯酯(TPP)和增效醚(PBO)虽然在敏感品系中对吡虫啉的增效作用较小(SR1.24和1.29),但在抗性品系中的增效作用显著增高(SR2.13和1.74);此外还发现,吡虫啉处理可提高棉蚜群体的酯酶活力.由此认为,棉蚜至少具有对吡虫啉产生中等水平抗性的风险,其抗性可能是由于棉蚜的酯酶和P450单加氧酶的解毒能力提高所致.3.期刊论文刘海清.杨天奇.LIUHai-qing.YANGTian-qi20%丁硫·吡虫啉EC防治棉蚜的药效试验-农药2010,49(1)用20%丁硫·吡虫啉EC333.3～666.7mg/L及10%吡虫啉WP333.3mg/L和20%丁硫克百威EC1000mg/L在田间对棉蚜进行药效试验,得出20%的丁硫·吡虫啉EC对棉蚜经济有效的使用质量浓度.试验结果表明:20%的丁硫·吡虫啉EC333.3～666.7mg/L对棉花的苗蚜和伏蚜均具有良好的防治效果,防治效果在95.75%以上,表现出良好的速效性和持效性,防效高于单独使用10%吡虫啉WP和20%丁硫克百威EC,推荐使用质量浓度为333.3mg/L.4.期刊论文高占林.李耀发.党志红.潘文亮.GAOZhan-lin.LIYao-fa.DANGZhi-hong.PANWen-liang河北省不同地区棉蚜对吡虫啉等杀虫剂抗药性发展动态研究-河北农业大学学报2008,31(3)2004-2007年间,测定了氧化乐果、灭多威、吡虫啉和啶虫脒等杀虫剂对河北省不同地区棉蚜的毒力.与敏感基线比较,河北省各地棉蚜对灭多威的抗药性始终处于中、高抗水平,抗性倍数最高达94.04倍;对氧化乐果的抗药性发展较快,但基本仍处于中、低抗水平,其抗性倍数为2.15～20.76;河北省各地棉蚜种群对新烟碱.类杀虫剂吡虫啉和啶虫脒的抗药性差异波动较大,对啶虫脒的差异最大可达25.83倍.5.学位论文李菁棉蚜对吡虫啉抗性及其机理的初步研究2007棉蚜AphisgossypiiGlover是重要的棉花害虫，其生物学特性使得该害虫极易对频繁使用的杀虫剂产生抗药性。报道资料显示棉蚜已对多种传统杀虫剂产生了严重的抗药性。吡虫啉自上世纪90年代初开始推广使用以来，已经成为田问防治棉蚜的主打药剂，但至今尚无田间棉蚜对此药剂产生抗性的报道。为了研究棉蚜对吡虫啉的抗性风险，及其抗性机制，本文对棉蚜进行了吡虫啉抗性的室内筛选、田间抗性的调查、抗性生化机制的研究，以及吡虫啉作用靶标基因的分子克隆。1．棉蚜对吡虫啉抗性的室内筛选以田间采集的棉蚜为原始种群，在室内进行吡虫啉药剂的抗性选育，经过25次的抗性筛选，棉蚜对吡虫啉的抗性上升了20.03倍，达中等抗性水平。在筛选过程中发现，选育初期棉蚜的抗性呈稳定增长趋势，但从第19次筛选以后，棉蚜对吡虫啉的抗性水平便稳定在20倍左右。该研究结果表明棉蚜对吡虫啉药剂的抗性发展比较缓慢，但仍具有对该药剂产生中等抗性的潜力和风险。2．不同地区棉蚜对吡虫啉等药剂的抗性调查对南京、安阳、北京和泰安四个地区的棉蚜种群进行了吡虫啉、高效氯氟氰菊酯和毒死蜱等3种药剂的抗性调查。结果发现，南京地区棉蚜对三种药剂都属于相对最敏感的种群。相比于南京种群，安阳、北京、泰安三地的棉蚜对吡虫啉的相对抗性倍数分别为2.21、9.53和7.63倍。与国内报道的有机磷类和菊酯类药剂的敏感基线相比，发现不同地区的棉蚜对这两种药剂都具有高水平或极高水平的抗性，仅南京种群对有机磷类为中等水平抗性。本次调查结果表明，吡虫啉仍然是对棉蚜效果最好的药剂之一，但在一些地区棉蚜确实已对吡虫啉产生了一定程度的抗性。该结果证实了抗性室内筛选得到的关于棉蚜具有对吡虫啉产生抗药性风险的结论。3．棉蚜对吡虫啉抗性的生化机理分析以室内筛选的吡虫啉抗性品系和野生敏感种群棉蚜为基础(抗性相差42.3倍)，分别测定了三种解毒酶抑制剂对吡虫啉的增效作用，并且比较了两个品系棉蚜的解毒酶活性。增效剂试验表明，TPP和PBO在两个品系中均有明显的增效作用，并且在抗性品系中的增效作用显著大于敏感品系，但DEM在两品系中均没有明显的增效作用。对两个品系解毒酶活力测定结果显示，抗性品系酯酶(EST)活性显著高于敏感品系(1.71倍)，而谷胱甘肽S-转移酶(GST)的活力变化不大(1.12倍)。测定吡虫啉处理对棉蚜群体EST活力分布的影响，结果发现吡虫啉处理后群体EST分布有明显升高趋势。由此认为，棉蚜对吡虫啉的中等水平抗性主要是由于酯酶和P450单加氧酶活力升高所致，在生产上可以利用酯酶和P450单加氧酶的抑制剂来提高吡虫啉对棉蚜的防效，并延缓其抗药性发展。4．棉蚜烟碱型乙酰胆碱受体基因克隆及序列分析采用简并引物和RACE技术，成功在棉蚜中克隆出2个未报道的烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)α亚基基因全长和1个片段，分别命名为Aga3、Aga4和Aga5。其中Agct3基因为2314bp，开放阅读框为1776bp，编码592个氨基酸；Aga4(包括Agα4-1和Aga4-2)基因为1767bp，开放阅读框为1602bp，编码534个氨基酸；克隆得到的Aget5基因片段为840bp，编码280个氨基酸。经过同源性分析发现，棉蚜的α亚基与GenBank中登陆的其他昆虫的nAChR亚基具有很高的相似性，尤其与桃蚜Myzuspersicae和麦长管蚜Sitobionavenae的各相对应亚基相似性最高，均达到90％以上。该研究结果将为进一步研究棉蚜的nAChR，以及可能出现的棉蚜对吡虫啉药剂靶标抗性的分子机制，奠定了基础。综上所述，本研究通过室内筛选确定了棉蚜对吡虫啉的抗性风险，并通过田间调查确定了部分地区棉蚜已经对吡虫啉产生了一定程度的抗性，通过抗性机理分析确定了酯酶和P450单加氧酶活力升高是棉蚜对吡虫啉抗性的主要机理，提出了在生产上利用酯酶和P450单加氧酶的抑制剂来提高吡虫啉对棉蚜的防效，并延缓其抗药性发展的合理建议。显然该研究成果对制定合理的抗性治理策略、延缓田间棉蚜抗性发展具有重要指导意义。此外本研究还克隆了棉蚜nAChR亚基新基因，为进一步研究棉蚜nAChR以及吡虫啉靶标抗性机制奠定了基础。6.期刊论文潘文亮.党志红.高占林棉蚜抗吡虫啉品系和敏感品系主要解毒酶活性比较-昆虫学报2003,46(6)通过生物测定和生物化学方法比较了棉蚜Aphisgossypu对吡虫啉抗性(约为7倍)和敏感品系几种主要解毒酶的活性.结果表明:氧化胡椒基丁醚对两个品系均无明显增效作用.抗性品系中羧酸酯酶和谷胱甘肽S-转移酶的比活力均明显高于敏感品系,抗性品系中羧酸酯酶的Km值也显著高于敏感品系,说明抗性品系羧酸酯酶与底物的亲和力明显高于敏感品系.上述结果证明羧酸酯酶和谷胱甘肽S-转移酶活力增强在棉蚜对吡虫啉的抗性中起重要作用.7.期刊论文付贵成.张艳民13%吡虫啉·毒死蜱乳油对棉蚜的防效-河南农业科学2007,(11)采用不同用量的13%吡虫啉·毒死蜱乳油防治棉花蚜虫,结果表明,13%吡虫啉·毒死蜱乳油600mL/hm2,825mL/hm2,1050mL/hm2对棉花蚜虫有较好的防治效果,并表现出良好的速效性和持效性.防效高于单独使用10%吡虫啉可湿性粉剂和60%毒死蜱乳油,生产上推广使用的适宜用量为600mL/hm2.8.学位论文王业霞吡虫啉等三种内吸性杀虫剂对棉蚜和棉花GST、CarE及PPO活性的影响2007研究了吡虫啉等3种内吸性杀虫剂对棉蚜谷胱甘肽S.转移酶和羧酸酯酶及棉花多酚氧化酶和羧酸酯酶活性的影响。论文主要包括3部分内容：(1)3种内吸杀虫剂对棉蚜谷胱甘肽S-转移酶和羧酸酯酶活性的影响用含200mg/L氧化乐果、25mg/L吡虫啉、100mg/L丁硫克百威的营养液分别处理带有棉蚜的棉花幼苗，使杀虫剂内吸到棉花体内，于不同处理时间(即4、6、8、10、12h)收集棉苗上未致死的棉蚜，测定3种杀虫剂对棉蚜的谷胱甘肽S-转移酶和羧酸酯酶活性的影响。结果表明，在吡虫啉和丁硫克百威对棉蚜致死过程中，对棉蚜谷胱甘肽S-转移酶和羧酸酯酶活性未产生显著影响；氧化乐果处理后棉蚜谷胱甘肽S-转移酶活性与对照组比较没有显著差异，而羧酸酯酶的活性在各处理时间均受到显著抑制，处理后12h处理组棉蚜羧酸酯酶活性比对照降低79.2％。(2)3种内吸杀虫剂对棉花多酚氧化酶和羧酸酯酶活性的影响用含有不同浓度氧化乐果、吡虫啉和丁硫克百威的营养液分别处理棉花幼苗，研究120h内不同处理时间棉花幼苗多酚氧化酶和羧酸酯酶活性的变化。结果表明，400mg/L氧化乐果处理后24h，棉花幼苗多酚氧化酶活性比对照降低21.6％；50mg/L吡虫啉处理后120h，多酚氧化酶活性比对照增高47.3％；200mg/L丁硫克百威处理后72h，多酚氧化酶活性增高75.7％。氧化乐果处理后，120h内各处理棉花幼苗羧酸酯酶的活性均低于对照，且抑制率在70％以上；50mg/L吡虫啉处理后120h，羧酸酯酶活性比对照增高30.7％；丁硫克百威处理后120h内，羧酸酯酶活性与对照比较均无显著差异。可见，3种内吸性杀虫剂对棉花幼苗中多酚氧化酶和羧酸酯酶活性的影响不仅与杀虫剂种类有关，还具有一定的剂量效应和时间效应。(3)棉花幼苗中吡虫啉的含量用含12.5mg/L、25mg/L和50mg/L吡虫啉的营养液分别处理棉花幼苗，使其内吸到棉花体内，于不同处理时间(即24、48、72、96、120h)取样，用高效液相色谱测定棉花幼苗中的吡虫啉含量。结果表明，在处理时间内，吡虫啉在棉苗叶片中的含量，随处理时间的加长逐渐增大。9.会议论文王开运.孔祥波.于彩虹.姜兴运.仪美芹温室白粉虱和棉蚜对吡虫啉抗性及交互抗性199910.期刊论文潘文亮.党志红.高占林.贾海民.张克锦.PanWenliang.DangZhihong.GaoZhanlin.JiaHaimin.ZhangKejin几种蚜虫对吡虫啉抗药性的研究-农药学学报2000,2(4)SensitivityofAphisgossypii,A.spiraecclaandMacrosiphumavenaeinvariousplacesofHebeiprovincetoimidaclopridweredetermined.Theresultsshowedthatnosignificantdifferenceswerefoundinthesensitiv