8灰树花合剂降血糖功能的研究

Mar.2010,Volume4,No.2(SerialNo.27)JournalofLifeSciences,ISSN1934-7391,USA41灰树花合剂降血糖功能的研究曹素芳1，王新瑞1，张晨2，陈孝3，陈越飞3（1.山西省医药与生命科学研究院，山西太原030006；2.解放军第264医院，山西太原030001；3.盐城神农保健食品有限公司，江苏盐城224221）摘要：目的：研究灰树花合剂降血糖保健功能的效果。方法：通过灰树花合剂对正常动物空腹血糖的影响实验并对四氧嘧啶引起的高血糖小鼠空腹血糖及糖耐量的影响实验，观察灰树花合剂降血糖的作用。结果：灰树花合剂对正常小鼠空腹血糖无影响（P0.05）。实验前，各组高血糖小鼠的血糖水平没有统计学上的差别（P0.05）。实验后，与模型对照组比较，低、中、高剂量能明显降低四氧嘧啶所致高血糖小鼠的空腹血糖（P0.05，P0.01）；低、中、高剂量组小鼠血糖前后差值与模型对照组相比均有统计学上明显差异（P0.05，P0.01）。与模型对照组比低、中、高剂量能明显降低四氧嘧啶高血糖小鼠口服2.5g/kg。BW葡萄糖后0.5、2小时的血糖值，经统计学检验有明显差异（P0.05，P0.01）。灌胃葡萄糖后灰树花合剂低、中、高剂量组葡萄糖曲线下面积均小于模型对照组，差异有显著性（P0.05）。结论：灰树花合剂具有降血糖的保健功能。关键词：灰树花合剂；降血糖；保健功能【作者简介】曹素芳（1960－），女，大专，工程师，研究方：菌类保健产品研发；E-mail:[e-mail].通讯作者：张晨（1981－），女，本科，药师，研究方向：药品保健；E-mail:[e-mail].灰树花（Grifolafrondosa）属担子菌亚门，层菌纲，非褶菌目，多孔菌科花菌属，又名舞茸、莲花菌、贝叶多孔菌、千佛菌，俗称云蕈。是食、药兼用的蕈菌，在民间有悠久的药用历史。主要含多糖、蛋白质、维生素、微量元素等。研究表明，灰树花具有显著的抗肿瘤、降血糖、抗肝炎、抗灰树花合剂降血糖功能的研究42HIV病毒以及改善免疫系统功能的作用[1-3]。本研究以灰树花为主要成分，辅以黄芪、灵芝、红景天、富铬酵母、蜂胶等药、食两用成分，经过提取、浓缩、喷雾干燥等加工工艺，制成灰树花合剂，按照《保健食品检验与评价技术规范-2003》降血糖检验项目要求进行试验，探讨灰树花合剂在降血糖方面的作用。为开发降血糖产品寻找合适配方。1.材料与试剂灰树花合剂由本项目小组制备。依据2005年版《中华人民共和国药典》及保健食品配方使用剂量相关规定，推荐使用量为成人每天2.7g，相当于0.045g/kg·BW（按成人60kg体重）。实验动物为6周龄雄性昆明种小鼠，体重24～28g，三级，由中国药品生物制品检定所实验动物中心提供。主要试剂为四氧嘧啶，购自Sigma公司；主要仪器为GLUCOTREND血糖仪，购自Roche公司。2.实验方法2.1灰树花合剂对正常动物血糖的影响选用健康成年雄性小鼠24只，禁食5小时后（自由饮水），取尾血测定小鼠空腹血糖，按血糖水平随机分为2组，一个对照组、一个灰树花合剂高剂量组，每组12只小鼠，对照组每日用蒸馏水灌胃，剂量组给予1.350g/kg·BW灰树花合剂，相当于人体每日推荐量0.045g/kg·BW的30倍，连续灌胃30天后，禁食同前，测定空腹血糖水平，观察受试物对正常动物空腹血糖的影响。2.2灰树花合剂对四氧嘧啶引起的高血糖小鼠空腹血糖及糖耐量的影响雄性小鼠禁食24小时后，尾静脉注射四氧嘧啶溶掖45mg/kg·BW，注射量为0.2ml/20g·BW。5天后禁食5小时，取尾血测定小鼠的空腹血糖，选取血糖值大于10mmo1/L的小鼠，按血糖水平分为模型对照组和三个灰树花合剂剂量组，以人体推荐量的5、10、30倍灰树花合剂给小鼠灌胃，分别相当于0.225、0.450、1.350g/kg·BW剂量。连续灌喂30天后，进行糖耐量实验，禁食5小时，剂量组给予不同浓度受试物，模型对照组给予同体积的水，20分钟后，灌胃25%葡萄糖溶液2.5g/kg·BW，灌灰树花合剂降血糖功能的研究43胃量为0.2ml/20g·BW，服用葡萄糖后，取尾血测定血糖水平分别测定0小时、0.5小时、2小时血糖值。观察模型对照组与受试样品组给葡萄糖后各时间点血糖曲线下面积的变化。3.统计分析与结果判定3.1统计分析实验数据用spss软件进行方差分析。方差齐P0.05，表明各组均数间无显著差异；对照组与实验组间均数比较统计P≤0.05，表明差异有显著性。3.2结果判定空腹血糖和糖耐量两项指标中一项指标阳性，且对正常动物空腹血糖无影响，即可判定该受试样品降血糖功能动物实验结果阳性。4.结果4.1灰树花合剂对正常小鼠体重的影响由表1结果可知，高剂量组动物体重与正常对照组相比，未有统计学上的差异（P0.05）。4.2灰树花合剂对正常小鼠空腹血糖的影响由表2可见，试验前后高剂量组小鼠的空腹血糖与正常对照组相比没有统计学上的差异（P0.05）。4.3灰树花合剂对四氧嘧啶引起的高血糖小鼠体重的影响由表3可见，各剂量灰树花合剂组小鼠体重与模型对照组比较无显著性差异（P0.05）。4.4灰树花合剂对四氧嘧啶引起的高血糖小鼠空腹血糖的影响由表4可见，实验前各组小鼠的血糖水平没有统计学上的差别（P0.05）。实验后，与模型对照组比较灰树花合剂低、中、高剂量能明显降低四氧嘧啶所致高血糖小鼠的空腹血糖（P0.05，P0.01），低、中、高剂量组小鼠血糖前后差值与模型对照组相比均有统计学上明显差异（P0.05，P0.01）。表1正常小鼠的初期体重、中期体重、末期体重组别动物数（只）初期体重/g中期体重/g末期体重/g正常对照组1228.4±1.234.3±1.839.0±2.4高剂量组1228.1±0.933.7±1.538.5±2.3灰树花合剂降血糖功能的研究44表2灰树花合剂对正常小鼠空腹血糖的影响组别剂量（g/kg·BW）空腹血糖值（mmol/l）试验前P值试验后P值正常对照组0.0006.4±0.7──6.8±0.9──高剂量组1.3506.3±0.60.6946.4±0.60.340表3灰树花合剂对高血糖模型小鼠体重的影响组别动物数（只）体重/g初期中期末期模型对照组1228.8±2.233.7±2.336.5±2.8低剂量组1228.5±1.432.9±1.335.6±2.4中剂量组1229.1±1.933.1±1.837.0±2.1高剂量组1228.6±1.633.5±2.636.0±3.1表4灰树花合剂对高血糖小鼠空腹血糖的影响组别剂量（g/kg·BW）动物数（只）空腹血糖值（mmol/l）试验前试验后差值模型对照组0.0001217.0±3.121.6±3.84.6±2.4低剂量组0.2251216.9±3.117.6±4.0*0.8±4.0**中剂量组0.4501216.7±3.317.3±3.6**0.6±3.2**高剂量组1.3501217.1±3.218.1±2.9*1.0±3.4*注：与模型对照组相比：*P0.05；**P0.01。表5灰树花合剂对高血糖小鼠给糖后血糖的影响组别动物数（只）血糖值（mmol/l）0h0.5h2h模型对照组1221.6±3.827.3±4.123.1±3.8低剂量组1217.6±4.0*22.9±3.4*18.9±3.5**中剂量组1217.3±3.6**22.2±4.8**18.4±3.7**高剂量组1218.1±2.9*23.7±4.6*19.5±2.9*注：与模型对照组相比：*P0.05；**P0.01。4.5灰树花合剂对四氧嘧啶引起的高血糖小鼠糖耐量的影响由表5、表6结果可见，与模型对照组相比灰树花合剂低、中、高剂量能明显降低四氧嘧啶高血糖小灰树花合剂降血糖功能的研究45鼠口服2.5g/kg·BW葡萄糖后0.5、2小时的血糖值，经统计学检验有明显差异（P0.05，P0.01），灌胃葡萄糖后灰树花合剂低、中、高剂量组葡萄糖曲线下面积均小于模型对照组，差异有显著性（P0.05）。表6灰树花合剂对四氧嘧啶所致高血糖模型大鼠葡萄糖曲线下面积影响组别剂量（g/kg·BW）动物只数（只）峰面值模型对照组0.0001250.0±7.5低剂量组0.2251241.5±6.8**中剂量组0.4501240.3±8.3**高剂量组1.3501242.8±7.1*注：与模型对照组相比：*P0.05；**P0.01。5.讨论实验结果表明，灰树花合剂对正常小鼠空腹血糖无影响（P0.05）。实验前各组高血糖小鼠的血糖水平没有统计学上的差别（P0.05）。实验后，与模型对照组比较灰树花合剂低、中、高剂量能明显降低四氧嘧啶所致高血糖小鼠的空腹血糖（P0.05，P0.01）；低、中、高剂量组小鼠血糖前后差值与模型对照组相比均有统计学上明显差异（P0.05，P0.01）。与模型对照组比灰树花合剂低、中、高剂量能明显降低四氧嘧啶高血糖小鼠口服2.5g/kg·BW葡萄糖后0.5、2小时的血糖值，经统计学检验有明显差异（P0.05，P0.01）。灌胃葡萄糖后灰树花合剂低、中、高剂量组葡萄糖曲线下面积均小于模型对照组，差异有显著性（P0.05）。依据《保健食品检验与评价技术规范-2003》结果判定，灰树花合剂具有辅助降血糖功能[4-5]。灰树花具有降血糖功能，其药理机制尚需探讨，但作为抑制肿瘤，降低血糖的食品、保健品，已经被广泛应用。本实验用灰树花及黄芪、灵芝、红景天、富铬酵母、蜂胶等药、食两用成分的提取物为原料，进行降血糖功能的试验，深层次的开发，需要进一步研究。参考文献：[1]彭红.灰树花的栽培和开发现状[J].食用菌，1998，20（4）：2-4.[2]郭倩，周昌艳.灰树花菌丝体多糖的提取[J].食用菌，1998，20（1）：10-10.[3]王世远，赵国强.天然营养保健食品栗子蘑[J].中国食用菌，1994，13（4）：36-37.[4]李仪奎.中药药理实验方法学[M].上海：上海科学技术出版社，1991：157，303.[5]陈天寿.微生物培养基的制造与应用[M].北京：中国农业出版社，1995：420-445.Mar.2010,Volume4,No.2(SerialNo.27)JournalofLifeSciences,ISSN1934-7391,USA41StudyonhypoglycemicfunctionofFrondosamixtureCAOSu-fang,WANGXin-rui,ZHANGChen,CHENXiao,CHENYue-feiAbstract:Purpose:StudyontheeffectsofhypoglycemicfunctionofFrondosamixture.Method:Experimentonthefastingmicewhicharenormalorinducedhyperglycemiabyalloxan.Results:Frondosamixturehadnoeffectonbloodsugarofnormalmice(P0.05).Beforetheexperiment,thebloodglucoselevelofmiceineachgroupofhighbloodsugarhavenosignificantdifference(P0.05);Aftertheexperiment,Comparedwithmodelcontrolgroup,low,mediumandhighdosescansignificantlyreducethealloxan-inducedfastingbloodglucoseofhyperglycemicmice(P0.05,P0.01);comparedwiththemodelcontrolgroupthebloodsugarofthisgro