CK-MB

XXXX医院检验科ACCESS/ACCESS2/DXIPSASOP文件编号:页码/Pages:1/5生效日期:版本/Revision:仪器序列号：1111111CK-MB检测1检测目的、原理目的：检测患者体内CK-MB的含量，辅助临床治疗诊断。原理：AccessCK-MB检测采用双位点酶免法检测(“双抗体夹心法”)。样品、标记了碱性磷酸酶的大鼠抗人CK-MB抗体（酶结合物）以及包被了大鼠抗CK-BB抗体的磁性颗粒被一起加入到反应管中，样品中的CK-MB和固相在磁性颗粒表面的CK-BB抗体的B亚单位（与CK-BB和CK-MB为同分异构体）抗原结合点进行反应，同时酶结合物特异性的与血清或血浆中的CK-MB相结合（不与CK-BB和CK-MB同分异构体反应）。孵育后，反应管被传送到磁性分离区域进行多次冲洗，去处未和固相结合的其它成分。最后在反应管中加入化学发光底物（Lumi-Phos*530）,已与固相结合的碱性磷酸酶会使该底物发出光子并被光电比色计所检测。最后，对照仪器中储存的多点定标曲线中所描述的光量子与标准品CK-MB的对应关系而计算出样品中的CK-MB浓度，反应产生的光子与样品中CK-MB的含量成正比。2方法性能参数不精密度：小于等于8%分析灵敏度：小于0.1ng/ml3样本采集及处理A.血清或肝素抗凝血浆是推荐的样品。B.遵循国家委员会制定的临床实验室标准推荐的以下标本处理、运行和储存步骤：1.用真空采样管采集所有血液标本时须遵守常规注意事项。2.离心前使标本完全自然形成凝块。3.全程保证样品管的密闭状态。4.离心获得血清后的两小时内，至少将500l血清或血浆转移到一个密闭XXXX医院检验科ACCESS/ACCESS2/DXIPSASOP文件编号:页码/Pages:2/5生效日期:版本/Revision:仪器序列号：1111111的储存试管中备用。5.储存样品，保持样品管完全密闭，在室温(15到30°C)条件下不超过8小时。6.如果8小时内不能完成检测即应将标本放入2到8°C冰箱冷藏。7.如果24小时内不能完成检测即应将标本放入-20°C冰箱冻藏。8.标本只能复融一次。C.样品中至多含有35mg/L(3.5mg/dl)的胆红素、50U/mL的肝素和脂血标本中含有相当于6g/L(600mg/ml)的甘油三脂及溶血标本含有最多5mg/ml(500mg/Dl)的血红蛋白外不影响CK-MB检测的结果。避免使用严重溶血、黄疸或有絮状物沉淀的标本。4检测系统BeckmanCoulter,Inc.4300S.HarborBlvd.Fullerton,CA92834U.S.A.A.R1:AccessCK-MB试剂盒货号33300:100个测试，2盒，50测试/盒现成可用，在2到10°C冰箱中顶端朝上存放，可一直保存到标签中注明的失效期。试剂盒必须在2到10°C冰箱保存2小时后才能放入仪器中使用或在仪器中保存。试剂盒被吸取使用后，在2到10°C条件下可稳定28天，一旦发现有试剂盒上弹性体破裂或质控结果超出范围等现象出现即代表试剂盒失效。1.R1a:包被了大鼠抗人CK-BB的单克隆抗体的磁性颗粒悬浮于Tris缓冲液中，含小牛血清白蛋白(BSA)，0.1%的叠氮钠和0.1%ProClin**300。2.R1b:大鼠抗人CK-MB单抗-碱性磷酸酶酶结合物包含于Tris缓冲盐中，含小牛血清白蛋白(BSA)，0.1%的叠氮钠和0.1%ProClin**300。3.R1c:纯化的大鼠IgG包含于PBS缓冲液中，含0.1%的叠氮钠。XXXX医院检验科ACCESS/ACCESS2/DXIPSASOP文件编号:页码/Pages:3/5生效日期:版本/Revision:仪器序列号：11111115系统校准AccessCK-MB定标品货号33335:2.0mL/瓶.定量检测的定标是用已知分析浓度的标本进行检测以观察光量子值。光量子值和已知浓度之间的数学关系就构成了定标曲线。定标曲线储存于仪器中，可将样本检测中得到的光量子值转化成特定的分析浓度。现成可用，在2~10℃环境下保存可稳定到定标品瓶标签上标出的失效期。避免产生气泡，质控结果落到允许的范围之外或定标品不能完全溶解是定标品失效的信号。定标操作步骤请参见Access免疫分析系统的操作SOP。1.S0:以小牛血清白蛋白(BSA)为基质的缓冲液，含0.025%Cosmocil***CQ和0.1%的叠氮钠。含有的CK-MB浓度为0.0ng/ml。2.S1,S2,S3,S4,S5:人重组CK-MB的浓度分别为3,10,30,100以及300ng/mL(µg/L)，包含于以小牛血清白蛋白(BSA)为基质的缓冲液，含0.025%Cosmocil***CQ和0.1%的叠氮钠缓冲液中，参见定标卡和瓶贴上的准确标值。3.定标卡：1张4.定标周期：28天。6检验程序详见Access仪器系统操作SOP7质量控制商用质控血清质控材料用于模拟患者样品的特征，这对于监测免疫生化检验的系统性能是必要的。因为样品可以在“随机访问”的形式下随时接受处理，而在“批量”形式中则无法进行。质控材料应该在24小时中随时提供，包括至少覆盖两个分析物水平XXXX医院检验科ACCESS/ACCESS2/DXIPSASOP文件编号:页码/Pages:4/5生效日期:版本/Revision:仪器序列号：1111111的商用质控材料。按照制造商的指导对质控材料进行重组和贮存。每个实验室必须创建平均值以及可接受范围值以确保性能正确。质控结果如果不在可接受范围值之内，可能表明检测结果无效。在获得分析物的最后可接受质控检测点后，对其产生的所有检测结果进行检查。质控规则：westgard规则。8干扰和交叉反应含有达到10毫克/分升的胆红素的样品，含有相当于3000毫克/分升的甘油三酸酯的脂血样品，以及含有达到6000毫克/分升的血色素的溶血样品，在检验中没有影响。9结果计算使用权重4参数逻辑曲线（4PLC）数学模型，通过系统软件，对患者检测结果进行自动检测。样品中分析物的量通过贮存的校准数据所测定的光产品进行确定。患者检测结果通过相应的屏幕进行复查。10生物参考区间0.6-6.3ng/mL（血清、血浆-LiH）0.5-5.0ng/ml（血浆-E）11患者检验结果的可报告区间0.1-300ng/ml12警告/危机值大于等于3ng/ml13安全防护措施详见Access仪器系统操作SOP14临床意义XXXX医院检验科ACCESS/ACCESS2/DXIPSASOP文件编号:页码/Pages:5/5生效日期:版本/Revision:仪器序列号：1111111CK-MB和CK-BB、CK-MM一样是肌酸激酶（CK）三种组织同分异构形式之一，肌酸激酶是肌肉代谢过程中的关键酶，在三磷酸腺苷（ATP）参与下催化肌酸磷酸化反向反应。CK-MB由两个亚单位组成（每个分子量=40000）：M亚单位在肌肉中表达，B亚单位在脑中表达。CK-MB同功酶主要位于心肌中，具有CK的20%活性，超过5%也可在其它组织如前列腺、平滑或骨骼肌中被发现，随肌肉类型不一样而表现出不同的CK-MB的量。急性心肌梗死后（AMI），心肌坏死后释放的CK-MB进入外周血，在12小时内达到其高峰值，随后逐渐降低，于36~72小时后恢复正常。CK-MB的升高和下降、心电图（ECG）的改变以及临床主诉胸痛通常可用来考虑诊断急性心肌梗死。CK-MB测定还可作为溶栓治疗后心肌再灌注的非创伤性评估指标。CK-MB的升高还可见于骨骼肌的创伤，但是没有急性心肌梗死时出现的上升下降的特点。最初选用免疫抑制技术来测定CK-MB的活力，该活力通过比较CK-MB和测定得到的CK活力之间的比值来表示（CK-MB/CK），但是，样品中出现CK-BB，腺苷酸环化酶（AK）和非典型的CK形式（巨-CK）等不能由抗M抗体所中和的物质时，通常引起CK-MB检测结果的增高。现在，许多酶免疫测定技术已用来测定DK-MB的质量，与测定得到的CK-MB活性相关良好，并且没有CK-BB，巨CK和腺苷酸环化酶的干扰。15相关文件《BeckmanCoulterAccess系统项目手册》16记录格式