浙江大学生命科学学院硕士学位论文天目山自然保护区产抗微生物资

浙江大学生命科学学院硕士学位论文天目山自然保护区产抗微生物资源及其系统学研究姓名：陈伟峰申请学位级别：硕士专业：微生物学指导教师：吴雪昌20080601天目山自然保护区产抗微生物资源及其系统学研究作者：陈伟峰学位授予单位：浙江大学生命科学学院相似文献(10条)1.学位论文卞彦宝华山自然保护区不同演替群落中土壤微生物状况的比较研究2000该文的目的就是通过对不同演替阶段的植物群落中土壤微生物状况的研究,比较微生物的生物量、数量、种类构成的情况,试图揭示其内在的联系和规律.同一地段不同植物群落相互替代的现象称为植被演替,向地带性植被或顶极方向的演替称为顺行演替,反之为逆行演替.宝华山自然保护区现存的不同群落类型中,均处在逆行演替的不同阶段上,该种演替的发生主要由于人为破坏.宝华山自然保护区内的植物群落演替有以下类型:常绿落叶阔叶混交林、落叶阔叶或针阔混交林、灌丛、荒山裸地.该文研究了宝华山自然保护区中处于不同演替阶段的次生裸地、纯盐肤木林以及栓皮栎青冈混交林下的土壤微生物的生物量,并调查了其中的细菌(Bacteria)、放线菌(Actinomycets)、真菌(Fungi)和固氮菌(Nitrogen-fixingmicrobes)的数量并分析了细菌的组成.2.学位论文姚贤民长白山自然保护区北坡森林土壤真菌多样性的研究2007长白山自然保护区生态系统保存完整，自然环境复杂多样，生物资源极其丰富。随着海拔、气候、土壤等综合因素的影响，该保护区北坡地带的植物、动物、微生物(包括真菌)具有明显的区系分布特点。通过对长白山北坡森林土壤真菌的分类研究，可明确其真菌种群多样性及分布规律，筛选大量食用、药用、工业用等有益真菌，并为长白山自然保护区的管理及其微生物资源的进一步开发利用提供科学的理论依据。分别于2006年6月、8月赴长白山自然保护区北坡森林地带采集土壤标样，根据海拔高度、森林类型及土壤类型等因素，选取6处能代表不同海拔高度和生态类型的地点，采用“之”字形多点采样法采集土壤样品共计158份。对土样同时采用稀释平板法和土壤平板法进行真菌分离和培养，共获得近千株真菌。根据形态特征，鉴定出34属68种真菌，其中接合菌6属8种，子囊菌3属5种，无性型真菌25属55种。68种真菌中包括中国新记录属1个，即球壳属Sphaerodes；中国新记录种5个，即短毛毛壳Chaetomiumbrevipilium、梭形毛壳Chaetomium．fusifoorme、条纹孢蔓毛壳Herpotrichiastriatispora、网状球壳Sphearodesretispora、柱孢弯颈霉Tolypocladiumncylindrocladium；未定种2个，即拟盘多毛孢属未定种Pestalotiopsissp．和轮枝菌属未定种Verticilliumsp．。论文对每种真菌均作了形态描述及生境记录，同时附有显微形态照片，并对部分属、种真菌进行了简要的分析和讨论。研究发现海拔高度和森林类型对长白山森林土壤真菌种群的组成、数量及分布均具有一定的影响，从采集白海拔800米处及针阔混交林的土壤样品中分离得到的真菌种群较多。分离方法对土壤真菌种群的组成及数量具有显著的影响，采用土壤平板法和稀释平板法所得到的真菌种群的组成之间存在着较大的差异，采用土壤平板法得到的真菌种群的数量明显高于稀释平板法。3.期刊论文孟凡旭.吴敏.张会斌.童浩萱.殷佳慧.MENGFan-xu.WUMin.ZHANGHui-bin.TONGHao-xuan.YINJia-hui阿牙克库木湖嗜盐菌的分离及功能酶的筛选-浙江大学学报（理学版）2006,33(6)从新疆阿尔金山国家自然保护区阿牙克库木湖采集的泥样和水样中,分离培养了90株嗜盐菌,其中多数为中度和极端嗜盐菌,颜色以红色和白色为主,细胞形态多为杆状、球状,97%呈革兰氏阴性,研究结果表明该湖有着丰富的嗜盐微生物资源.对分离菌株进行了几种重要工业用酶的筛选,发现其中淀粉酶产生菌有4株,菌株AJ225和AJ243淀粉酶活性较高;蛋白酶产生菌有7株;脂肪酶生产菌有13株,菌株AJ238和AJ265具有较高的酶产量;在分离菌株中未检测到纤维素酶和木聚糖酶活性.4.学位论文刘树蓬内生真菌多样性及其产活性物质研究2006植物内生真菌(Endophyticfungi)是指在某一时期生活在健康植物体内但对寄主植物组织并不引起明显侵染的真菌。某些内生真菌能产生与宿主相似的活性代谢产物而成为新药的来源之一。内生真菌数量庞大，其作为一种新型的微生物资源，已成为人们关注的热点。本文以药用植物为研究对象，研究其内生真菌多样性及其产活性代谢产物状况，主要由以下三部分研究内容组成。一、从浙江临安天目山自然保护区和清凉峰自然保护区采集到共89种药用植物，并从中分离到1142株内生真菌，分析了不同植物种类及不同植物器官中分离到的内生真菌数量的差异，并为进一步研究奠定了基础。二、用分子生物学方法对分离自南方红豆杉(Taxusmairei)、香榧(Torreyagrandis)和三尖杉(Cephalotaxusfortunei)的共52株的镰刀菌属(Fusariumsp.)内生真菌进行分类鉴定，分析了这3株植物中不同种类的镰刀菌属内生真菌的分布状况。发现从红豆杉、香榧和三尖杉中分离到的镰刀菌属内生真菌包含9个已知镰刀菌种或分支和5种疑似的新种或分支：F.'LateritiumCladeIIC'、F.sp.A、F.sp.B、F.sp.C、F.sp.D。从这3株植物中分离到的镰刀菌属内生真菌的种类和数量均有较大的差异。用MID液体培养基对部分菌株进行培养，对其培养液进行研究后发现有3株南方红豆杉和香榧来源的镰刀菌F0021、F0042和F0081能够产生抗癌药物紫杉醇。三、对3株能产生新型抗生素——木霉菌酯素的南方红豆杉来源的木霉属(Trichodermasp.)内生真菌F0869、F0870和F0986进行鉴定，发现这3株木霉同属于一个木霉新种(Trichodermataxiisp.nov.)，用RAPD方法筛选到了该种的特有序列。研究还对木霉菌酯素的抑菌活性进行测定，发现其对立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)和灰葡萄孢(Botrytiscinerea)具有很强的抑制作用，其对灰葡萄孢抑菌活性比已知抗生素两性霉素B要高。5.学位论文陈秀贤海南岛腐霉属菌物资源调查及种类鉴定2007腐霉是一类世界性分布的重要菌物，可腐生、寄生或兼性寄生。全世界已报道的腐霉菌达200多种，我国已报道腐霉达58种。腐霉寄主范围广，可寄生多种植物，引起植物猝倒、苗腐、根腐和根颈腐等病害和储藏期种子、果蔬等的腐烂，在国内外均造成较大的损失，目前，超过80种腐霉被报道为植物重要的病原菌，然而，有些腐霉种类如寡雄腐霉、棘腐霉等能杀灭或抑制其他植物病原菌，具有生防价值；还有些腐霉种类如终极腐霉、畸雌腐霉等，能分泌有益化合物，在工、农业和医药上具有重要的应用价值。海南岛是典型的热带海洋气候，雨热充足，动植物、微生物资源十分丰富。然而，除了余永年记载的海南11种腐霉外(余永年，1998)，对其种类和分布至今尚未进行过系统调查。因此，为了明确海南岛腐霉的种类及分布情况，丰富海南岛的菌种资源，为植病生防及工业、医药的微生物资源开发提供菌种来源。本研究于2004～2006年间，从海南岛海口、澄迈、文昌等17个县市及4个热带雨林原始林区的不同地点和不同植物根围采集土壤标样350份，在实验室内采用饵钓和选择性培养基分离获得腐霉菌株1341株，根据形态特征和核糖体rDNAITSl测序分析，对海南岛的腐霉进行种类鉴定及系统的分布调查，主要研究结果有以下：1．将1301株腐霉菌鉴定为16个腐霉种和3个不确定种，另外113株腐霉菌不产生有性器官被归入PythiumGroupF(A、B、D、C、L、G、P、HS、SP)。这16个腐霉种分别是：刺器腐霉PythiumacanthophoronSideris、卡地腐霉PythiumcarolinianumDrechsler、禾生腐霉PythiumgraminicolaSubramanian、旋柄腐霉PythiumheliCOidesDrechsler、间型腐霉PythiumintermediumdeBary、肿囊腐霉PythiuminflatumMatthews、奇雄腐霉PythiummiddletoniiSparrow、华丽腐霉PythiumsplendensBraun、刺腐霉PythiumspinosumSawada、棘腐霉PythiumacanthicumDrechSler、瓜果腐霉Pythiumaphanidermatum(Edson)Fitzpatrick、链状腐霉PythiumcatenuZatumMatthews、德里腐霉PythiumdelienseMeurs、木蓝腐霉PythiumindigofereaeButler、群结腐霉PythiummyriotylumDrechsler、钟器腐霉PythiumvexansdeBary，其中，前9个为海南腐霉新记录种。还有3个未明确鉴定的腐霉种为齿孢腐霉Pythiumhydnosporum(Mont．)Schroter、PythiumoedochilumDrechsler和PythiumsylvaticumCampbell&Hendrix。2．对350份土样中各腐霉种的的分离步贞率进行统计分析，结果表明，Py.vexansdeBary的分离频率最高、分布最广，为优势种，其次是py．delienseMeurs、Py.aphanidermature(Edson)Fitzpatrick和Py.acanthiumDrechsler。3.通过核糖体rDNAITSl测序与BLASTN分析、同源性比较，从分子水平上明确了菌株Py0623H为旋柄腐霉，菌株Py0600a为刺器腐霉，菌株Py0600c2为卡地腐霉以及菌株Py0410s为华丽腐霉，表明这4个菌株的rDNAITSl测序结果与形态学初鉴定结果一致，验证了这4个腐霉种形态特征分类结果的可靠性，进一步说明了rDNAITSl测序分析是腐霉分类的重要辅助工具。4．华丽腐霉是油棕苗疫病的病原菌，油棕苗疫病是我国对外植物检疫对象，国内至今尚没有报道。本研究从海南岛坝王岭自然保护区长臂猿区所采集的土样中分离出一株腐霉菌株Py0410s，经形念学分类及核糖体rDNAITSl序列分析鉴定为华丽腐霉Py．splendensBraun，并进行了该菌株对油棕苗的致病性测定，结果表明：华丽腐霉分离菌株Py0410s能引起明显的油棕苗疫病症状，为油棕苗疫病的病原菌。6.学位论文李奇峰放线菌菌株YIM30701、YIM37470、YIM33510次生代谢产物的初步研究2005放线菌是一类具有重要开发价值的微生物资源，在目前发现的12000多种微生物来源的生物活性物质中，放线菌产生的生物活性物质大约占总量的三分之二。在我们前期研究工作中发现：分离自云南大理的两株放线菌，其次生代谢产物具有抗真菌活性。本论文以这两株放线菌为研究对象，对它们的发酵条件进行了初步研究并对发酵条件进行了优化。并以活性跟踪为指导，利用硅胶柱层析，凝胶柱层析和HPLC等多种分离纯化手段对发酵产物中的抗菌活性成分进行分离纯化。最后对分离到的活性物质单体进行了结构解析。从菌株YIM30701中分离得到两个活性组分，其中一个是活性单体化合物30701-1。本文还对放线菌菌株YIM33510进行了研究。菌株YIM33510分离自云南大围山自然保护区，其次生代谢产物具有抑制一氧化氮合酶活性。从菌株YIM33510中分离得到一个化合物33510-1，该化合物的结构推断为1-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-2-hydroxy-4-(3，4，5，-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)-tetrahydro-2H-pyran-2-yloxy)-benzoate，该化合物一氧化氮合酶抑制活性待测。7.学