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生物实验试剂——层析液配方改进萧山中学周华芳人教版教材中色素分离所用层析液的配制方法20份石油醚、2份丙酮、1份苯。改进：20份石油醚、2份丙酮、1份甲苯。《叶绿体中色素的提取和分离》生物学是一门以实验和观察为主的学科。生物课程标准明确提出：生物教学要加强实验和其他实践活动的教学，加强对学生观察能力、实验能力、思维能力和自学能力等能力的培养；要关注教学资源的开发，如利用替代物品、药剂、仪器等，争取创造性地增加低成本的实验和其他实践活动，消除生物实验的安全隐患，促进学生的健康成长与发展。一、课题提出背景1、课标对实验的要求2、生物实验药品的安全性（1）氢氧化钠溶液呈强碱性，对人体健康具有负面影响，使用时务必小心，最好能戴上手套（2）过氧化氢具有强腐蚀性，对身体有害，经人体皮肤吸收可造成伤害，最好戴上手套和护目镜（3）丙酮、二苯胺具有一定的毒性，使用后务必洗手（4）苯是一种毒性大、渗透性较强、易挥发的有机物。它可以通过皮肤、呼吸道进入人体，而且难以排泄，使用时要注意通风一方面要培养学生的卫生与健康意识，培养学生良好的实验操作习惯另一方面教师更应探索用低毒性或无毒性的药品代替毒性较强的药品，以减轻药品对学生身体的危害，使实验更安全、环保3、生物实验教学的要求（1）苯是一种毒性大、渗透性较强、易挥发的有机物。它可以通过皮肤、呼吸道进入人体，而且难以排泄。短时间内吸入高浓度苯蒸气可造成急性中毒，产生头痛、头晕、咳嗽、胸闷、兴奋、步态蹒跚、神志模糊、血压下降、肌肉震颤、呼吸浅快、脉搏快而弱等现象。一般高中生物实验室的通风设备比较差，除了开门窗通风换气以外，几乎没有其他通风设备。尽管在层析液中苯的含量较少，但几十个组合在一起，加上学生在操作中不小心打翻，清洗时残液的挥发，整个实验室还是充满了苯蒸气。苯主要是以蒸气形态经呼吸道进入人体，这给学生、老师的身体健康带来很大的危害二、用甲苯代替苯对层析液配方改进的依据（2）甲苯属低毒，进入人体后，可以在人体的NADP（转酶Ⅱ）存在下被氧化成苯甲醇，再在NAD（转酶Ⅰ）存在下氧化为苯甲醛，生成甲基苯甲酸，然后与甘氨酸结合形成甲基马尿酸，在18小时内几乎全部排出体外。即使是吸入后残留在肺部的少量的甲苯，也在接触后3小时内（半衰期为0.5—1小时）全部呼出体外。实验中残留的甲苯，在清洗时进入水体，由于甲苯在水溶液中挥发的较快，其在地表水中，不是持久性的污染物，挥发到空气中的甲苯也能被光解三、《光合色素的提取和分离》实验实施1、实验原理（略）2、实验材料（略）3、实验步骤（略）为保证实验结果的正确性，每次试验都采用足够量的滤纸条，并且在不同的时间段反复进行。同时对用甲苯配制而成的层析液的稳定性进行试验，通过对其进行连续七天的跟踪实验，得知只要将该层析液保存在密闭容器里，一个星期内其效果将始终保持不变。胡萝卜素叶绿素a叶绿素b层析液高度叶黄素苯配制的层析液中层析而成4、实验结果层析液高度胡萝卜素叶绿素a叶黄素叶绿素b4、实验结果甲苯配制的层析液中层析而成（1）用甲苯代替苯，没有影响扩散效果。两种情况下，扩散的速度基本一致。（2）用甲苯代替苯，实验能够获得更明显的四条色素带。特别是第一条胡萝卜素与第二条叶黄素之间，分离十分明显。5、实验结果分析四、浙科版《光合色素的提取和分离》实验色素分离所用层析液：乙醚或石油醚材料：干燥的菠菜叶层析装置：带橡皮塞的试管1、几个变化2、几点结论（1）用新鲜叶片比干燥叶片分离效果好，但色素带颜色是干燥叶比较深（2）四种层析液配方中，石油醚作层析液效果最好（3）用试管作层析装置可以用锥形瓶替代