搜索
DNA靶向手性钌(Ⅱ)配合物的合成、表征及其抗肿瘤作用一．基本作用原理通常来说，以DNA为靶点的抗肿瘤药物，药物分子往往能够以共价键或非共价键方式与DNA发生选择性结合，使DNA构象发生改变，从而对DNA的生物功能发生微扰。所以小分子药物与DNA的特异性和选择性作用，特别是从核酸的分子识别为出发点，以序列选择性识别，位点专一性识别及形状选择性识别为基础的研究，在药物设计中具有非常重要的意义。研究发现，钌配合物能够以插人结合、沟面结合以及静电作用方式与DNA分子契合对于多吡啶钉(Ⅱ)配合物多吡啶钉(Ⅱ)配合物具有独特的刚性八面体结构，20世纪8O年代初期，Baaon等发现配合物[Ru(phen)]的不同异构体与DNA作用时存在选择性，△一和一[Ru(phen)]¨对B—DNA表现出不同亲合能力，且△一异构体与同为右螺旋的B．DNA的结合能力比一异构体强；计亮年等的研究进一步证实手性钌(Ⅱ)金属配合物与DNA的作用存在手性选择性，并且以一异构体与DNA的结合速率更快，在肿瘤的化学治疗、DNA的结构探针等领域具有潜在的应用前景二．研究对象[Ru(bpy)2(P-NPIP)](PF6)2·2H2O(1)和一[Ru(bpy)(p-tFPIP)](PF)·2H：O(2)三．方法方法采用MTY方法评价手性钌(Ⅱ)配合物1和2对肿瘤细胞生长的抑制，并采用电子吸收光谱、荧光光谱和黏度试验等方法研究手性钌配合物2与DNA的分子识别机制；采用凝胶电泳试验评价配合物2对DNA分子的光裂解作，Ef=I比如①黏度试验黏度试验使用乌氏黏度计进行测量，温度恒定在(28±0．1)qC。配合物用缓冲液配制。测试液按固定DNA的浓度，逐渐增加手性钌配合物浓度的方法配制。相对黏度按：(t—t。)／计算。t。为缓冲液流经毛细管所需的时间，t为DNA溶液(含浓度不等的钌配合物)流经毛细管所需的时间。以(77。)。对结合比率r(r=[Ru]／[DNA])作图。为未加钌配合物的DNA溶液的相对黏度②荧光光谱滴定试验配制一定浓度的手性钌(Ⅱ)配合物溶液，用微量进样器每次往样品池中加入相同体积的DNA溶液，使DNA与配合物浓度比值(CDNA／CRu)按一定的比例递增，直至饱和。用456nm波长激发，在500～750nm范围监测配合物的荧光光谱变化，记录发射光波峰和发光强度。四．结果1.对肿瘤细胞生长的抑制作用手性钌配合物对肿瘤细胞的生长表现出明显的抑制作用，特别是对HO8910PM卵巢癌细胞的抑制活性，C铀为47．8b~mol·L～，与同等试验条件下顺铂的抗肿瘤活性相当。2.手性钌(II)配合物对质粒pBR322DNA的光裂解作用DNA被认为是金属抗肿瘤药物如顺铂的作用靶点，药物分子以共价键方式或者非共价键方式与DNA分子契合，干扰其生物功能，达到抑制肿瘤细胞生长的目的。光照条件下，当用手性钌(Ⅱ)配合物2处理后，从凝胶电泳图上可以发现，质粒pBR322DNA的构象发生明显改变五．结论手性钌(Ⅱ)多吡啶配合物2能够选择性抑制肿瘤细胞生长，特别是对卵巢癌细胞HO8910PM生长的抑制活性与顺铂相当；光照条件下手性钌(Ⅱ)配合物能够使质粒pBR322DNA发生解螺旋作用，进一步的光谱学试验和黏度试验结果表明，配合物2能够以插入方式与DNA分子契合，对DNA的构象产生微扰，并抑制肿瘤细胞生长。但是，钌(Ⅱ)配合物的对肿瘤细胞生长的抑制是一个多因素综合作用的复杂过程，其具体的作用机制和作用机理还有待进一步的深人研究。