实验二放线菌和霉菌的形态结构观察目的要求1.学习并掌握放线菌、霉菌形态结构的观察方法和制片方法。2.观察放线菌、霉菌的菌落特征、个体形态及其繁殖方式。3.观察霉菌个体形态及各种无性孢子及有性孢子的形态放线菌的菌丝形态单轮(有螺旋)双轮(无螺旋)双轮(有螺旋)单轮(无螺旋)垂直弯曲丛生紧螺旋松环,初级螺旋,钩状松螺旋链霉菌孢子丝形态实验材料(一)菌种灰色链霉菌。黄曲霉、黑根霉。(二)其他物品0.1%美蓝染液、乳酸石炭酸溶液、载片及盖片、显微镜、接种环、接种针、酒精灯、蒸馏水等。实验内容(放线菌)(一)菌落形态的观察观察放线菌菌落表面形状、大小、颜色、边缘,以及有无色素分泌到培养基内等;并用接种环挑取菌落,注意菌丝在培养基上着生的紧密情况。区别基内菌丝、气生菌丝及孢子丝的着生部位。实验内容(二)个体形态特征的观察观察放线菌菌丝和孢子丝自然生长的性状,其中包括气生菌丝(较粗),基内菌丝(较细)和孢子丝的形状。注意放线菌菌丝直径的大小,孢子丝的形状。哪种菌的孢子丝呈螺旋状?实验内容(三)孢子形状的观察(印片染色法)用盖片印片载片上滴加0.1%美蓝染液盖片印片一面朝下盖在载片上镜检高倍镜(400×)下观察灰色链霉菌和淡紫灰链霉菌的孢子及孢子丝。实验内容(四)插片法观察放线菌形态特征插片染色法:28℃插片培养4—6d,轻轻取出盖玻片,载片上滴加0.1%美蓝染液,盖片有菌一面朝下盖在载片上,镜检。观察淡紫灰链霉菌基内菌丝、气生菌丝及孢子丝的卷曲状况,及分生孢子的形状。实验内容(霉菌)(一)霉菌菌落特征的观察1.观察产黄青霉、黄曲霉、黑根霉平板中的菌落,描述其菌落特征。2.注意菌落形态的大小,菌丝的高矮,生长密度,孢子颜色和菌落表面等状况。3.将霉菌菌落与细菌、放线菌、酵母菌菌落进行比较。实验内容(二)制片观察于洁净的载片中央,滴加一小滴乳酸石炭酸(水)溶液,然后用接种钩从菌落边缘挑取少许菌丝体置于其中,使其摊开,轻轻盖上盖片(注意勿出现气泡),置于低倍镜、中倍镜、高倍镜下观察。实验内容1.产黄青霉观察菌丝体的分枝状况,有无横隔。分生孢子梗及其分枝方式、小梗及分生孢子的形状。利用平板插片法,可观察到较为清晰的分生孢子穗,帚状分枝的层次状况及成串的分生孢子。实验内容2.黄曲霉观察菌丝体有无横隔、足细胞,注意分生孢子梗、顶囊、小梗及分生孢子着生状况及形状。实验内容3.黑根霉观察无隔菌丝、假根、匍匐枝、孢子囊梗、孢子囊及孢囊孢子。孢子囊破裂后能观察到囊托及囊轴。观察黑根霉接合孢子。图2-100为根霉属的接合孢子实验报告内容(一)描述你所观察到的放线菌菌落特征。微生物名称大小表面形状含水程度菌落颜色透明度与培养基结合程度嗅味灰色链霉菌正面:反面:(二)记录并绘制灰色链霉菌个体形态及生殖方式图,标明气生菌丝、孢子丝及孢子的形态。微生物名称制片法个体形态及生殖方式图灰色链霉菌印片法或直接观察法(三)描述产黄青霉、黄曲霉、黑根霉的菌落的颜色及特征微生物名称大小表面形状菌丝颜色孢子颜色菌丝高矮生长密度与培养基结合程度嗅味黑根霉产黄青霉黄曲霉(四)绘制产黄青霉、黄曲霉、黑根霉的个体形态及生殖方式图微生物名称菌丝结构(及分化结构)无性孢子黑根霉(糖化酶、酿酒)示无隔菌丝、假根、匍匐枝、孢子囊梗、孢子囊孢囊孢子产黄青霉(青霉素)示有隔菌丝、分生孢子梗及其分枝方式、小梗分生孢子黄曲霉(蛋白酶、制酱油)示有隔菌丝、足细胞、顶囊、分生孢子梗及小梗分生孢子思考题列表总结放线菌与细菌菌落的差异。实验二结束请交报告!