7500荧光定量PCR仪使用说明

7500荧光定量PCR仪使用说明注意事项：实验过程必须戴干净的一次性乳胶手套进行操作。PCR反应所用的96孔板、8联管或单管必须为ABI7500专用，凸盖PCR管禁止使用。使用8联管两侧需用空管支撑，使用单管四角需用空管支撑，以防止板槽受力不均。实验数据用光盘刻录，禁止U盘拷取，数据可暂存于本机电脑硬盘中，各实验室D盘中有指定文件夹，中心外部人员数据存于FUWU文件夹下的子文件夹中。操作步骤开机依次打开电脑显示屏、主机，输入开机密码“7500”。放入反应板注：关闭仪器托盘时，应按一个角度推压托盘的右侧。按压此处！待电脑启动稳定后，按压7500仪器电源按扭，等待仪器启动（约30s）。当仪器只显示Power状态指示灯时，方可按压托盘以打开它。（以下过程按字母顺序a→q进行操作）创建反应板文件双击电脑桌面上SDS软件图标打开SDS软件；在对话框中选择CreateNewDocument…，或选择菜单栏FileNew；a.从Assay下拉列表中选择反应板类型c.单击Next反应板文件类型有以下几种：1.RelativeQuantification(ddCt)Plate（相对定量）2.AbsoluteQuantification(StandardCurve)（绝对定量，标准曲线）3.AllelicDiscrimination（等位基因鉴别）4.Plus/Minus（阳性/阴性实验）d.选择要添加到反应板文件的探针（引物），单击Add添加选中探针e.如果在列表中未列出所需探针，请单击NewDetector创建新探针f.单击Nextb.为反应板文件命名为每个反应孔指定探针和任务为反应孔设置样品名g.选取探针相同的反应孔h.点击反应孔对应的探针。i.单击Task栏的下边指定探针任务。j.选择Use（使用）。k.单击Finish（完成）。ghijkl.选取反应孔，直接输入相应样品名（也可右键，调出反WellInspector对话框，在SampleName中进行修改）设定PCR循环参数、运行程序结束实验1.实验结束后关闭软件。（确认反应板文件数据已保存）2.打开拖盘，将反应板取出，关闭拖盘。3.按下7500仪器电源开关关闭机器。4.关闭电脑及显示屏。5.登记仪器使用情况。m.选择Instrument选项卡，默认条件下显示标准PCR条件，可跟据实验具体情况修改；n.单击AddDissociationStage添加溶解曲线循环；o.修改PCR反应体积；p.将反应板文件保存至指定路径。q.点击Start运行程序pmnoq请严格按照仪器使用说明进行操作，如有不明之处或遇其他情况请及时联系仪器负责人.谢谢配合！！