大专-病原微生物

第二篇病原微生物一．微生物的概念微生物（microorganism）：是存在于自然界的一群体形微小，结构简单，肉眼直接看不见，必须借助光镜或电镜放大（几百倍~几万倍）才能看到的微小生物。微生物的特点：1.个体微小,但具有一定的形态、结构和功能。2.种类多,数量大，在自然界中分布广泛。3.适宜环境中繁殖迅速,易变异。二．微生物的种类和分布种类：1.非细胞型微生物：无细胞结构，活细胞内繁殖，只有一种核酸(DNA\RNA)——病毒(virus)。2.原核细胞型微生物：细胞分化程度低，仅有染色质组成的核质，无核膜核仁，除核糖体外无其它细胞器——细菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体和放线菌3.真核细胞型微生物：细胞分化程度高，有核膜核仁和染色体，胞质中有多种细胞器，行有丝分裂。——真菌(fungus)。第十章细菌的形态与结构细菌（bacterium）：是属原核生物界的一种单细胞微生物.广义细菌：包括细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体狭义细菌：专指其中数量最大、种类最多、具有典型代表性的细菌第一节细菌的大小与形态大小:测量单位µm油镜观察基本形态球菌杆菌螺形菌1.球菌(coccus)2.杆菌(bacillus)杆菌形态多数呈直杆状多种形态的杆菌双歧杆菌棒状杆菌球杆菌分枝杆菌3.螺形菌(SPIRALBACTERIUM)弧菌螺菌螺杆菌第二节细菌的结构STRUCTUREOFBACTERIUM细菌的基本结构细菌的特殊结构细胞壁cellwall荚膜capsule细胞膜cellmembrane鞭毛flagellum细胞质cytoplasm菌毛pilus核质nuclearmaterial芽胞spore细胞壁(CELLWALL)位于菌细胞的最外层，包绕在细胞膜的周围。组成较复杂，并随不同细菌而异。用革兰染色法可将细菌分为两大类，即革兰阳性菌和革兰阴性菌肽聚糖（peptidoglycan）革兰阳性菌聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥三维立体结构，坚固15～50层革兰阴性菌聚糖骨架、四肽侧链二维平面结构，疏松1～2层N-乙酰葡糖胺N-乙酰胞壁酸β－1，4糖苷键共有组分溶菌酶作用位点青霉素作用位点革兰阳性菌细胞壁结构革兰阴性菌外膜（outermembrane）脂蛋白脂质双层脂多糖LPS外膜蛋白：与致病性和耐药性有关。脂多糖：是革兰阴性细菌重要致病物质，称内毒素。脂多糖由脂质A(lipidA)、核心多糖、特异多糖组成，其中脂质A是内毒素的主要毒性部分。脂多糖（LIPOPOLYSACCHARIDE，LPS）（1）脂质A（lipidA）为一种糖磷脂，由D-氨基葡萄糖双糖组成的基本骨架，不同细菌骨架一致。内毒素毒性与生物学活性成分无种属特异性（2）核心多糖（corepolysaccharide）位于脂质A的外层有属特异性，同一属细菌相同（3）特异多糖（specificpolysaccharide）最外层，由数个至数十个低聚糖（3~5个单糖）重复单位所构成的多糖链。是革兰阴性菌的菌体抗原（O抗原），具有种特异性3.G+菌与G-菌细胞壁的区别细胞壁革兰阳性菌革兰阴性菌强度较坚韧较疏松厚度21~80nm10~15nm肽聚糖层可达50层1~2层肽聚糖量50%~80%20%~50%结构磷壁酸﹢﹣外膜﹣﹢由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥构成坚固致密的三维立体结构，由聚糖骨架、四肽侧链构成疏松的二维平面结构，（1）维持细菌固有外形（2）保护细菌抵抗低渗外环境（3）参与细胞内外的物质交换（4）具有决定菌体的免疫原性的抗原表位4.细胞壁的功能细胞膜cellmembrane位于细胞壁内紧包细胞质，结构与真核细胞基本相同。功能生物合成物质交换调节细胞代谢细胞质(CYTOPLASM)1.成分：无色透明胶状物，由水、蛋白质、脂类、核酸及少量无机盐组成2.功能：细菌新陈代谢的场所3.主要内容物:①核糖体(ribosome)70s——30s(链霉素);50s(红霉素)80s(真核细胞)——40s;60s②质粒(plasmid)：染色体外遗传物质③胞质颗粒：异染颗粒二、细菌的特殊结构SPECIALSTRUCTURESOFBACTERIUM1.荚膜capsule细菌细胞壁外包围的一层粘液性物质结构。大多数为多糖，少数为多肽。荚膜的功能：保护细菌，抵抗有害物质的损伤作用。2.鞭毛FLAGELLUM细长呈波状弯曲的蛋白质丝，与细菌的运动有关；具有免疫原性，有鉴别意义；某些菌的鞭毛与致病有关。3.菌毛PILUS定义：由蛋白质组成，短而直，光镜下不能观察到。普通菌毛ordinarypilus：是细菌的粘附结构，能与宿主细胞的特异受体结合，介导细菌在局部定植，与细菌的致病性密切相关，不是运动器官。性菌毛sexpilus:数量少，中空管状。由F质粒编码产生，与细菌的遗传变异有关。可通过接合方式传递细菌的毒力和耐药性等。接合：细菌通过性菌毛将遗传物质从供体菌转移到受体菌的过程。4.芽胞SPORE某些细菌在一定条件下，在菌体中形成的在光学显微镜下可见的一个圆形或卵圆型小体。芽胞是细菌的一种特殊存活方式，而不是繁殖方式。一个细菌只能形成一个芽胞，一个芽胞也只能生成一个菌体。产芽胞的细菌在未产生芽胞时的菌体称为繁殖体（vegetativeform）。细菌芽胞的大小和位置芽胞的功能及意义抵抗力强。芽胞对理化因素（热、干燥、辐射、化学消毒剂等）具有高强度的抵抗力。炭疽杆菌芽胞可在草原中存活20~40年。灭菌是以杀死芽胞为标准的最可靠方法为高压蒸气灭菌致病性不直接引起疾病，发芽后形成繁殖体后致病鉴别意义根据芽胞位置、大小等细菌特殊结构1.荚膜抗吞噬2.鞭毛运动普通菌毛粘附3.菌毛性菌毛接合4.芽胞抵抗力强形态结构检查一般程序：标本涂片固定染色镜检（观察镜下特征：菌体形态、排列、染色性及特殊结构等）初步鉴定注：对形态、结构、排列方式和染色性无特征的细菌，直接涂片染色镜检无意义革兰染色法：革兰阳性菌（紫色）革兰阴性菌（红色）过程：标本涂片、固定---初染（结晶紫）---媒染（碘液）---脱色（95%乙醇）---复染（稀释复红）意义：鉴别细菌选择抗菌药物与细菌致病性有关（内毒素是G-菌主要致病物质；外毒素是大多数G+菌致病物质）细菌的营养物质水：营养物质必须先溶于水，营养的吸收与代谢均需有水才能进行。氮源：来源于氨基酸、蛋白质等，合成菌体成分。碳源：来源于糖类，提供能量。无机盐：钾、钠、钙、镁、磷、硫等。生长因子：生长必需但自身不能合成的物质，如维生素、氨基酸等。根据对分子氧的需要，细菌可分为4类专性需氧菌obligateaerobe微需氧菌microaerophilicbacterium兼性厌氧菌facultativeanaerobe专性厌氧菌obligateanaerobe二细菌生长与繁殖*细菌个体的生长繁殖——二分裂方式*细菌群体的生长繁殖——生长曲线细菌接种到定量的液体培养基中，定时取样测定活菌数量，以培养时间为横坐标，以活菌数的对数为纵坐标作图，得到的一条曲线。细菌生长繁殖的规律RULESOFBACTERIALGROWTHANDPROPAGATION个体生长繁殖：无性繁殖方式，即二分裂（binaryfission).多数细菌分裂一代需20~30min.结核分枝杆菌需18~20h.群体生长繁殖：一定数量的纯种细菌接种于液体培养基，其生长过程表现一定的规律性.总菌数细菌数对数活菌数051015202530h不同生长期的意义：迟缓期对数期稳定期衰亡期lagphaselogstationarydecline适应阶段快速生长速度减慢死亡增加形态染色产芽胞、抗形态显著生理活性生素、外毒素改变典型--能量代谢metabolismofenergy--代谢产物productsofmetabolism合成代谢产物（1）热原质细菌合成的一种注入人体内引起发热反应的物质。大多数是G-菌的脂多糖。热原质耐高温，高压蒸汽灭菌不能破坏（121℃，20min），250℃高温干烤才能破坏（2）毒素和侵袭性酶内毒素：G-菌的脂多糖外毒素：G+菌和少数G-菌产生的蛋白质侵袭性酶：血浆凝固酶（使金葡菌感染易于局限化）透明质酸酶（链球菌）损伤机体组织，促进细菌侵袭和扩散（3）色素：金葡菌--金黄色色素（脂溶性）铜绿假单胞菌--绿色色素（水溶性）可用于细菌鉴别（4）抗生素：多粘菌素、杆菌肽。（5）细菌素:只能抑制有近缘关系的细菌。如大肠菌素。无治疗意义，有助于细菌分型（6）维生素：某些肠道菌合成的，维生素Ｂ、维生素Ｋ消毒灭菌一、概念：消毒(disinfection)：杀死物体上或环境中病原微生物的方法，并不一定能杀死细菌芽胞或非病原微生物。灭菌(sterilization)：杀灭物体上所有微生物的方法，包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。无菌(asepsis)：不存在任何活菌的意思。无菌操作：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。二、消毒灭菌的方法热力辐射滤过消毒灭菌方法物理法化学法：各种消毒剂（1）、热力灭菌法湿热80℃经5-10min可杀死所有细菌繁殖体和真菌原理：多数无芽胞细菌经55-60℃作用30-60min后死亡干热灭菌法、湿热灭菌法（一）、物理消毒灭菌法分类：干热灭菌法焚烧：废弃物品、动物尸体。烧灼：接种环、试管口灭菌。干烤：160-170℃2h玻璃器皿、瓷器等。红外线：1-10m波长最强，但只在照射到的物体表面产生热效，医疗器械的灭菌。脱水干燥，使大分子变性湿热灭菌法：1.高压蒸汽灭菌法压力103.4kPa（1.05kg/cm2)，121.3℃，15～30min，杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。一般培养基、生理盐水、手术器械、敷料等物品。湿热灭菌法2.煮沸法：100℃5min杀灭繁殖体，1-2h杀灭芽胞，加入2%的碳酸氢钠，促进芽胞的杀灭，防止金属器皿生锈，一般用于食具、刀剪、注射器的消毒。3.巴氏消毒法：杀灭液体中的病原菌或特定微生物，不耐热成分不被破坏。61.1~62.8℃30min或71.1℃15~30s，一般用于酒类、牛乳等的消毒。湿热灭菌法4.超高温杀菌（UHT，UltraHighTemperature）：135～150℃和2～8s对牛乳或其他液态食品（如果汁及果汁饮料、豆乳、茶、酒及矿泉水等）最大优点是既能杀死产品中的微生物，又能较好地保持食品品质与营养价值。（2）、辐射杀菌法1、非电离辐射（紫外线）波长200-300nm，以260-266nm最强，此波长的紫外线易被细胞中核酸吸收杀菌机理：诱导了胸腺嘧啶二聚体的形成和DNA链的交联，从而抑制了DNA的复制•空气消毒•手术室、传染病房、细菌实验室•不耐热物品的表面消毒紫外线穿透力较弱，对皮肤、眼睛有损伤特点：应用范围：紫外线灯距离照射物以不超过2m为宜。杀菌机理：应用范围：2、电离辐射包括高速电子、X射线和射线：60Co－干扰DNA合成，破坏细胞膜一次性医用塑料制品的消毒食品、药品、生物制品的消毒，不破坏其营养成分（3）、滤过除菌法机制利用物理阻留的方法去除液体或空气中的细菌，以达到无菌目的。用途主要用于不耐高温无菌的血清、毒素、抗生素、药液，以及空气的除菌。特点仅能除去细菌，不能去除病毒、支原体、衣原体和有些L型细菌等。1.促进菌体蛋白质变性或凝固，如酚类（高浓度）、醇类、重金属盐类（高浓度）等；2.干扰细菌的酶系统和代谢，破坏蛋白与核酸的基团，如某些氧化剂、重金属盐类（低浓度）；3.损伤细菌的细胞膜，如酚类（低浓度）、表面活性剂、脂溶剂等。(二)、化学消毒灭菌法机制常用的化学消毒剂及防腐剂对人体组织都有危害，所以只限于外用或环境消毒。局限于：1、体表（皮肤、粘膜、伤口的消毒）2、手术器械消毒3、排泄物及周围环境的消毒表3-2常用消毒剂种类使用浓度用途石炭酸3-5%地面、器具表面、皮肤消毒乙醇70-75%皮肤、体温计消毒高锰酸钾0.1%皮肤、尿道消毒红汞2%皮肤、粘膜、小创伤消毒硫柳汞0.1%皮肤消毒、手术部位消毒过