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1.植物组织培养技术被广泛应用于培育无病毒植株、育种及获得植物次生代谢产物等生产生活实际。下图为番茄植株的培育过程。分析回答：(1)①过程中使用了____________酶，获得植物细胞原生质体，此处使用的溶液浓度不宜过小，以防止细胞原生质体____________。(2)铺平板类似于微生物接种，该过程必须在________旁进行操作。平铺板中添加蔗糖的目的除了提供营养外，还有________作用(3)同一番茄植株不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因________(填“相同”、“不相同”或“不一定相同”)；图中属于再分化的过程是________(填序号)。(4)多倍体番茄植株所结果实中维生素含量更高，若想培育多倍体番茄，可选择在图中的过程③中添加________进行处理，也可以选择在过程⑥中添加________进行处理。[来源:学优高考网]答案(1)纤维素酶和果胶(答“纤维素酶”也可)吸水涨破(2)酒精灯火焰调节渗透压[来源:学优高考网gkstk](3)不一定相同⑨⑩(答⑨或⑩也可)(4)聚乙二醇秋水仙素学优高考网2.育种工作者利用不同的方法进行了如下四组实验。请据图回答问题。(1)图Ⅰ过程由番茄韧皮部细胞形成幼苗A的过程需要经过________________两个关键步骤，该过程依据的原理是________________。(2)植物组织培养除了需要提供一定的营养、________、温度和光照外，还必须在________的条件下进行。(3)已知番茄的红果(Y)对黄果(y)为显性，少室(M)对多室(m)为显性，控制两对相对性状的基因分别位于两对同源染色体上。用红果多室(Yymm)番茄植株的花粉进行Ⅱ、Ⅲ有关实验，则Ⅱ过程中，从花粉形成幼苗B所进行的细胞分裂方式是________。Ⅲ过程中植物体C的基因型为__________________________。(细胞A为两两融合细胞)(4)图Ⅲ、Ⅳ过程中需要去除细胞壁，获得具有活力的____________。(5)在图中Ⅳ过程中，经过鉴别和筛选后，通常植物体D能表现出两个亲本的遗传性状，根本原因是_________________________________________________________________________。解析(1)图Ⅰ中植物组织培养过程，需要经过脱分化和再分化两个关键步骤，其原理是植物细胞的全能性。(2)植物组织培养除了需要提供一定的营养、植物激素(生长素、细胞分裂素)、温度和光照外，还必须在无菌的条件下进行。(3)Ⅱ过程中，从花粉形成幼苗B所进行的细胞分裂方式是有丝分裂。红果多室(Yymm)番茄植株产生的花粉基因型为Ym、ym，故Ⅲ过程中植物体C的基因型为YYmm、Yymm或yymm。(4)植物体细胞杂交时，要用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁，获得原生质体。(5)图Ⅳ中经植物体细胞杂交获得的植株具有两个亲本的遗传物质，能表现出两个亲本的遗传性状。答案(1)脱分化和再分化植物细胞全能性(2)植物激素(生长素、细胞分裂素)无菌(3)有丝分裂YYmm或Yymm或yymm(4)原生质体(5)具有两个亲本的遗传物质3.下图表示构建转抗体基因小鼠生产人源性单克隆抗体的流程。请据图回答问题：(1)图示过程涉及的生物技术有__________、__________、__________。(2)①过程使用的工具酶有____________________；构建的基因表达载体除含有人抗体基因、启动子、终止子外，还应具有__________。(3)向转基因小鼠注射特定的抗原后，从小鼠的________中提取B淋巴细胞；②过程通常用________________________诱导。(4)细胞X是________，体外培养细胞X所用的培养液必须添加________等天然成分，培养过程中会产生接触抑制吗？________________。答案(1)转基因技术动物细胞培养动物细胞融合(其他合理答案亦可)(2)限制酶、DNA连接酶标记基因(3)脾脏聚乙二醇或灭活的病毒(4)杂交瘤细胞血浆或血清不会4.科学家以番茄(2N)和马铃薯(4N)为材料利用下图技术得到“番茄—马铃薯”植株。请回答下列问题：(1)获得a、b所选用的酶为________，c和d的名称依次是________、________。(2)图示技术名称是________；由d培育成植株的过程运用的技术手段是________，其依据的原理是__________________________________________。(3)过程②称为________，所用的化学诱导剂一般是________，③过程成功的标志是______________________________________________________________。(4)过程④是________，⑤过程增殖的方式为________，诱导f中植株生根过程中培养基中生长素与细胞分裂素的比值较④过程________(高/低)；最终获得的“番茄—马铃薯”属于________倍体植株。答案(1)纤维素酶和果胶酶(正在融合的)原生质体杂种细胞(2)植物体细胞杂交技术植物组织培养植物细胞全能性(3)原生质体融合PEG(聚乙二醇)杂种细胞再生出细胞壁(形成新的细胞壁)(4)脱分化有丝分裂高六5.如图所示为获得转基因鼠和单克隆抗体的制备过程，据图回答下列问题：(1)过程Ⅰ将目的基因导入受体细胞的方法是________。在分子水平上检测该过程是否成功的程序是______________________________________________。(2)过程Ⅱ表示受精卵经过体外培养，形成早期胚胎，再移植到受体母鼠体内。培养过程中，培养液中添加一定量的________，以防止杂菌污染，此外，应____________以便清除代谢产物，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。(3)过程Ⅳ可以形成________种融合细胞，为了获得所需要的抗体，我们还需要的操作是________。答案(1)显微注射法带有放射性同位素等标记的含有目的基因的DNA片段与提取的DNA或RNA混合，如果出现杂交带则说明导入成功(2)抗生素定期更换培养液(3)3筛选6.红豆杉，又名紫杉，可从其树皮中分离出高抗癌活性的紫杉醇。下面是某同学设计的有关紫杉醇抗肿瘤实验的研究流程，请分析回答：(1)酶X是________酶，其主要作用是________。(2)物质Y是________，乙组起________作用。(3)细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同，例如，需要有________、________、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常还需要加入血清、血浆。(4)为清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，应采取的措施是________。(5)实验结果：若甲组____________________________，说明紫杉醇有抗肿瘤作用。(6)为了解决紫杉醇的药源问题，理论上可用________技术，把离体的红豆杉细胞经过________培养成愈伤组织，从中提取紫杉醇，进行加工生产。解析(1)动物细胞培养时，需先要用胰蛋白酶、胶原蛋白酶将组织细胞分散开，从而得到单个细胞。(2)实验设计时，需要遵循对照原则和单一变量原则，此实验的目的是探究紫杉醇对肿瘤细胞的作用，所以单一变量是有无紫杉醇，加入紫杉醇的甲组为实验组，则乙组应加入等量的生理盐水，作为对照组。(3)细胞体外培养所需营养物质有糖(葡萄糖)、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常还需要加入血清、血浆等天然成分。(4)定期更换培养液可清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。(5)若紫杉醇有抗肿瘤作用，则实验结果应是：甲组肿瘤细胞的数目少于乙组。(6)为了解决紫杉醇的药源问题，可采用植物细胞培养技术，即用植物组织培养技术把离体的红豆杉细胞经过脱分化培养成愈伤组织，从中提取紫杉醇，进行加工生产。答案(1)胰蛋白(胶原蛋白)使肿瘤细胞分散开[来源:学优高考网gkstk][来源:gkstk.Com](2)生理盐水对照(与紫杉醇形成对照)(3)糖(葡萄糖)氨基酸(4)(定期)更换培养液(5)肿瘤细胞的数目少于乙组(6)植物组织培养脱分化学优高考网7．下图表示利用胚胎干细胞(ES细胞)所作的一系列研究，请据图分析回答。(1)上图中的胚胎干细胞(ES细胞)可以从________和________中分离获取。(2)过程Ⅰ将胚胎干细胞置于γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的饲养层上，并加入动物血清、抗生素等物质，维持细胞不分化的状态。在此过程中，饲养层提供干细胞增殖所需的________，加入抗生素是为了________________。该过程对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。(3)过程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤中里面全是软骨、神经管、横纹肌和骨骼等人类组织和器官。实验时，必须去除小鼠的胸腺，使其存在免疫缺陷，该过程研究的意义在于解决____________________________问题。(4)该研究中，包含的生物技术有________________________(至少写出两种)。(5)过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有________的特点。在哺乳动物早期发育过程中，囊胚的后一个阶段是________________。(6)过程Ⅲ是培育转基因小鼠，将获得的目的基因导入胚胎干细胞之前需构建基因表达载体，将构建好的表达载体导入胚胎干细胞最常用的方法是______________________________。【解析】(1)胚胎干细胞(ES细胞)可以从早期胚胎和原始性腺中分离获取。(2)胚胎干细胞培养时所用的饲养层细胞可以供给干细胞增殖所需的营养物质，加入抗生素是为了防止杂菌污染。(6)将基因表达载体导入动物细胞最常用的方法是显微注射法。【答案】(1)早期胚胎原始性腺(2)营养物质防止杂菌污染(3)临床上供体器官不足或器官移植后免疫排斥等(4)动物细胞培养、转基因技术、早期胚胎培养、胚胎移植(5)全能性原肠胚(6)显微注射法8．我国科学家建立了小鼠哺乳动物单倍体胚胎干细胞系，为基因操作找到了新的动物模型，从而解决了二倍体哺乳动物体细胞不易进行基因操作和筛选，而生殖细胞已高度分化，不能在体外扩增培养的困难。操作过程如图所示，请据图回答：[来源:学优高考网gkstk](1)图中切割目的基因和载体所用的酶是________________，基因工程的核心步骤是________________，终止子的作用是________________。(2)单倍体胚胎干细胞取自囊胚的________________，④过程采用的技术手段________________________，由此可见，单倍体胚胎干细胞能够代替精子，使卵细胞成功“受精”，支撑小鼠胚胎的全程发育。(3)早期胚胎能够在受体内存活的主要生理学基础是__________________________________________________________________________________。(4)和生殖细胞相比，单倍体胚胎干细胞在体外培养的条件下，可以_____________________________________________________。【解析】(1)含有目的基因的外源DNA分子中含有三种限制酶(EcoRⅠ/SmaⅠ/BamHⅠ)的切割位点，但SmaⅠ的切割位点在目的基因上，使用该酶切割会破坏目的基因，因此应选择EcoRⅠ和BamHⅠ进行切割，再用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA。基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建；终止子的作用是使转录在所需要的地方停止下来。【答案】(1)EcoRⅠ和BamHⅠ基因表达载体的构建使转录在所需要的地方停止下来(2)内细胞团细胞融合(3)不发生免疫排