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·1·课后达标检测41微生物的培养和应用(建议用时：30分钟)1．请分析以下资料回答问题：资料一：硝化细菌是一类能进行化能合成作用的细菌，包括亚硝酸细菌和硝酸细菌两个菌群，通常生活在一起。亚硝酸细菌可将氨氧化成亚硝酸，硝酸细菌可将亚硝酸氧化成硝酸，氨和亚硝酸分别是亚硝酸细菌和硝酸细菌的惟一能源。资料二：可利用以下两种选择培养基，通过振荡培养从土壤中分离得到较纯净的硝酸细菌和亚硝酸细菌。1号选择培养基2号选择培养基(NH4)2SO4NaNO2NaClMnSO4FeSO4Na2CO3K2HPO4K2HPO4MgSO4MgSO4CaCO3NaH2PO4蒸馏水蒸馏水(1)这两种培养基中主要营养物质包括__________________________________。(2)2号培养基中起选择作用的主要物质是________；该培养基中亚硝酸细菌不能生长繁殖的主要原因是__________________________________。(3)硝化细菌属于________(填“好氧”或“厌氧”)细菌。(4)用1号培养基可分离得到较纯净的亚硝酸细菌，是因为NH＋4达到一定浓度后会抑制硝酸细菌的生长繁殖。若要探究抑制硝酸细菌生长繁殖的NH＋4浓度，可在2号培养基中加入________和不同浓度的________，制备多组培养基，利用________________法将等量稀释度相同且适宜的纯净硝酸细菌菌液分别接种于各组培养基中，培养一段时间后统计培养基中的________数。2.纤维素分解菌能够产生纤维素酶分解纤维素。回答下列问题：(1)在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用________染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。甲同学在实验时得到了如上图所示的结果，则纤维素分解菌位于________内。A．③B．①②C．②③D．①②③(2)乙同学打算从牛胃中分离纤维素分解菌并计数，与分离醋酸菌相比，进行培养时除了营养不同外，最主要的实验条件差别是________________，该同学采用活菌计数法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目________。·2·(3)丙同学在提取和分离纤维素酶的过程中，为了保证抵制外界酸和碱对酶活性的影响，采取的措施是向提取液和分离液中添加________________；若探究纤维素酶活性的最适温度，如何设置对照？______________________________。3．(2014·江苏盐城高三检测)请分析回答下列问题：(1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。常用的灭菌方法有________灭菌、干热灭菌和________灭菌。(2)涂抹平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是()①土壤取样②称取10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液③吸取0.1mL溶液进行平板涂布④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度A．①②③④B．①③②④C．①②④③D．①④②③(3)酵母菌将葡萄汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验，在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈________色。在发酵过程中，随着酒精度的提高，发酵液逐渐呈现深红色，原因是________________________________________________________________________。(4)从野生酵母菌群中分离纯化酵母菌，最常使用的接种方法是________________和________________两种。酵母菌适合生活在偏酸性环境，而放线菌则适合生活在偏碱性环境中，分离二者所用的培养基称为________________。(5)在腐乳制作的过程中，起主要作用的微生物是________________生物(原核、真核)。(6)腐乳制作过程中影响其风味和品质的因素有哪些()①盐的用量②酒的种类和用量③发酵温度④发酵时间⑤辛香料的用量A．①②③④⑤B．①②③C．①②⑤D．③④4．金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物，可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。如图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答相关问题。(1)按细胞结构分类，金黄色葡萄球菌属于________生物，从培养过程分析，金黄色葡萄球菌可进行________呼吸。(2)7.5%NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括________________________，用7.5%NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是________________________________________。(3)操作中在血平板上的接种方法是______________，接种操作前后需要对接种工具进行________灭菌。(4)在制备血平板时需将pH调节至________(“微酸性”或“微碱性”)后灭菌，待培养基________后，再加入适量血液。按培养基功能分类，血平板属于________培养基。(5)经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现________________________的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带，因此，要对本操作进行完善，完善的方案是__________________________________________。·3·答案与解析1．(1)碳源、氮源、无机盐和水(2)NaNO2缺乏亚硝酸细菌生长繁殖所需的惟一能源物质氨(3)好氧(4)琼脂(NH4)2SO4(或NH＋4)涂抹平板菌落2．解析：(1)利用刚果红染色法来筛选纤维素分解菌，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当培养基中的纤维素被纤维素酶分解后。刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。(2)牛胃内是无氧环境，故应在无氧环境下分离牛胃中的纤维素分解菌。菌落是同种菌体的集合，相距很近的细菌可以形成一个菌落，故菌落数比实际活菌数少。(3)在提取液和分离液中添加缓冲溶液可保证液体的pH不受干扰。探究某种酶活性的最适温度应设置不同的温度梯度进行相互对照。答案：(1)刚果红A(2)保证无氧环境小(低)(3)缓冲溶液设置不同的温度梯度进行相互对照3．解析：(1)常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法。(2)涂抹平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤包括：土壤取样→制备土壤提取液→溶液梯度稀释→平板涂布→微生物培养→分离和纯化。(3)可以利用重铬酸钾在酸性条件下与酒精反应呈灰绿色的原理来检验酒精的存在。(4)从野生酵母菌群中纯化酵母菌常用平板划线法和涂抹平板法。由于酵母菌适合生活在偏酸性环境中，而放线菌适合生活在偏碱性环境中，因此可利用选择培养基将二者分离。(5)在腐乳制作过程中，起主要作用的是毛霉，属于真核生物。(6)腐乳制作过程中多种因素都会影响其风味和品质。答案：(1)灼烧高压蒸汽(2)C(3)灰绿红葡萄皮的色素进入发酵液(4)平板划线法涂抹平板法选择培养基(5)真核(6)A4．(1)原核有氧(2)碳源、氮源、水和无机盐增加金黄色葡萄球菌的数量(3)平板划线法灼烧(4)微碱性冷却鉴别(5)周围存在透明圈设置不加鲜牛奶其他操作均相同的对照组